更新(xin)時(shi)間(jian):2025-11-23
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動物血清(qing):內(nei)皮(pi)細胞(bao)血清(qing)、GIBCO胎牛(niu)清(qing)、HyClone。動(dong)物(wu)血清(qing):內(nei)皮(pi)細胞(bao)血清(qing)、GIBCO胎牛(niu)清(qing)、HyClone。
細胞(bao):*細胞(bao)、正常(chang)細胞(bao)、腫瘤(liu)細胞(bao)、腫瘤(liu)耐(nai)藥(yao)細胞(bao)。細胞(bao):*細胞(bao)、正常(chang)細胞(bao)、腫瘤(liu)細胞(bao)、腫瘤(liu)耐(nai)藥(yao)細胞(bao)。
小鼠(shu)白介素1受(shou)體拮抗劑elisa試(shi)劑盒哪家(jia)好註意(yi)事(shi)項(xiang)
1.試(shi)劑盒從冷藏(zang)環(huan)境(jing)中(zhong)取(qu)出(chu)應(ying)在室溫平(ping)衡(heng) 15-30 分(fen)鐘後方可使(shi)用(yong),酶標包(bao)被(bei)板(ban)開封後(hou)如未用完,板(ban)條(tiao)應(ying)裝(zhuang)入(ru)密(mi)封袋(dai)中(zhong)保存。
2.濃(nong)洗(xi)滌(di)液可能(neng)會(hui)有結(jie)晶(jing)析(xi)出(chu),稀釋(shi)時(shi)可在水浴中加溫助(zhu)溶(rong),洗(xi)滌(di)時(shi)不(bu)影響(xiang)結(jie)果(guo)。
3.各(ge)步(bu)加樣均應(ying)使(shi)用(yong)加樣器,並經常(chang)校對(dui)其準(zhun)確(que)性(xing),以避(bi)免試(shi)驗誤(wu)差。壹(yi)次(ci)加樣時(shi)間(jian)控(kong)制(zhi)在 5 分(fen)鐘內(nei),如(ru)標本數量多,使(shi)用(yong)排(pai)槍(qiang)加樣。
4.請每次(ci)測定(ding)的同(tong)時(shi)做(zuo)標準(zhun)曲(qu)線,做(zuo)復孔。如標本中待(dai)測物質含量過高(樣本OD 值大(da)於(yu)標準(zhun)品(pin)孔*孔(kong)的OD 值),請先用樣品(pin)稀釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)壹(yi)定(ding)倍數(n 倍)後再測定(ding),計(ji)算時(shi)請(qing)後(hou)乘(cheng)以總稀釋(shi)倍數(×n×5)。
5.封板(ban)膜只限(xian)壹(yi)次(ci)性(xing)使(shi)用(yong),以避(bi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)。
6.底(di)物(wu)請避(bi)光保存。
7.嚴格按(an)照(zhao)說明(ming)書的(de)操(cao)作(zuo)進行,試(shi)驗結(jie)果判(pan)定(ding)必(bi)須(xu)以酶標儀讀(du)數為(wei)準(zhun).
8.所有樣品(pin),洗(xi)滌(di)液和各(ge)種(zhong)廢棄(qi)物都(dou)應(ying)按傳染(ran)物(wu)處(chu)理(li)。
操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)
1.標準(zhun)品(pin)的稀(xi)釋(shi):本試(shi)劑盒提供(gong)原(yuan)倍標準(zhun)品(pin)壹(yi)支,用(yong)戶可按(an)照(zhao)下列圖表(biao)在小試(shi)管中(zhong)進行稀釋(shi)。
2.加樣:分(fen)別(bie)設(she)空白孔(kong)(空白對(dui)照孔(kong)不(bu)加樣品(pin)及酶標試(shi)劑,其余各(ge)步(bu)操(cao)作(zuo)相同(tong))、標準(zhun)孔(kong)、待(dai)測樣品(pin)孔。在酶標包(bao)被(bei)板(ban)上(shang)標準(zhun)品(pin)準(zhun)確(que)加樣 50µl,待(dai)測樣品(pin)孔中(zhong)先加樣品(pin)稀釋(shi)液(ye) 40µl,然後再加待(dai)測樣品(pin) 10µl(樣品(pin)終稀(xi)釋(shi)度為 5 倍)。加樣將樣品(pin)加於(yu)酶(mei)標板(ban)孔(kong)底部,盡量不觸及孔壁(bi),輕輕晃動(dong)混(hun)勻(yun)。
3.溫育:用封板(ban)膜封板(ban)後(hou)置(zhi) 37℃溫育 30 分(fen)鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗(xi)滌(di)液用蒸(zheng)餾(liu)水(shui) 30 倍稀釋(shi)後(hou)備用
5.洗(xi)滌(di):小心揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿洗(xi)滌(di)液,靜置(zhi) 30 秒後棄去,如此重復 5 次(ci),拍幹。
6.加酶:每孔加入酶(mei)標試(shi)劑 50µl,空白孔除外。
7.溫(wen)育:操作(zuo)同(tong) 3。
8.洗(xi)滌(di):操作(zuo)同(tong) 5。
9.顯色(se):每孔先加入顯色(se)劑 A50µl,再加入顯色(se)劑 B50µl,輕輕震(zhen)蕩混(hun)勻(yun),37℃避(bi)光顯色(se)
15 分(fen)鐘.
10.終止(zhi):每孔加終止(zhi)液(ye) 50µl,終止反(fan)應(ying)(此時(shi)藍色(se)立(li)轉黃(huang)色(se))。
11.測定(ding):以空白空調(tiao)零,450nm 波長(chang)依序(xu)測量各(ge)孔(kong)的吸光度(OD 值)。 測定(ding)應(ying)在加終止(zhi)液(ye)後 15 分(fen)鐘以內(nei)進(jin)行。
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