ELISA試劑盒試驗復(fu)孔(kong)CV大可能原因及建(jian)議(yi)方案:
可能原因:
1、液體量(liang)取體積(ji)不壹致,使用(yong)前(qian)未混(hun)勻離心(xin)取上清;
2、邊緣(yuan)效(xiao)應:恒(heng)溫箱溫度(du)並(bing)不(bu)全(quan)恒(heng)溫,可能會由於(yu)貼近(jin)箱壁(bi),導(dao)致部(bu)分板條溫度(du)稍高;
3、 酶標(biao)板中液體有氣泡(pao),氣泡(pao)會(hui)阻礙(ai)孵育時(shi)抗原抗體(ti)結(jie)合,讀(du)數時(shi)有氣泡(pao),會(hui)改(gai)變液(ye)體透(tou)光率(lv);上機讀(du)數時(shi),酶標(biao)板底有指(zhi)紋或(huo)液(ye)體;
4、酶標(biao)儀(yi)未提前(qian)開(kai)機預(yu)熱(re),讀(du)值(zhi)不(bu)穩(wen)定。
建議(yi):
1、 標(biao)準(zhun)品加樣時(shi),可以(yi)單槍(qiang)頭從低濃度(du)到高濃(nong)度(du)垂(chui)直懸空添(tian)加,不換(huan)槍(qiang)頭,避(bi)免槍(qiang)頭誤差(cha);
2、 孵育時(shi),酶標(biao)板請勿(wu)堆(dui)疊(die),或(huo)放(fang)在(zai)貼近(jin)出風(feng)口(kou)和(he)箱壁(bi)處(chu);
3、 離心(xin)管(guan)中有氣泡(pao),可通(tong)過低速(su)離心(xin)去(qu)除;采用(yong)反(fan)向(xiang)移液,槍(qiang)頭在(zai)液面(mian)下(xia)第(di)二(er)擋(dang)吸入液體(ti),第壹擋推出液(ye)體(ti),適(shi)用(yong)於(yu)有壹定粘度(du)和(he)有泡沫的液(ye)體(ti)操(cao)作;
4、 酶標(biao)儀(yi)提(ti)前(qian)15分(fen)鐘預(yu)熱(re);上機讀(du)數前(qian)使用(yong)無塵布(bu)輕輕(qing)擦(ca)凈(jing)板底。