NCI-h1688人經(jing)典(dian)小(xiao)細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞

公司(si)產品(pin)僅供科研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不(bu)得(de)用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞傳代：

1）細(xi)胞生長(chang)至覆蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加入 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱細(xi)胞用 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳代，最後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

壹、商品介(jie)紹(shao)：

2、細(xi)胞凍存(cun)：

1）細(xi)胞生長(chang)至覆蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加入培養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管中(zhong)；

4）先將細(xi)胞凍存(cun)管放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進行(xing)長(chang)期(qi)保存。使用程(cheng)序

降溫盒(he)可直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞培養操作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以下(xia)細(xi)胞培養凍(dong)存(cun)處(chu)理僅供參考，具(ju)體操作步(bu)驟(zhou)以隨貨產(chan)品說明書(shu)為(wei)主(zhu)。將含(han)有1 mL細(xi)胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存管在(zai) 37℃水浴(yu)中迅速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培養基(ji)混合均勻。在(zai)1000 rpm條件下離心3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養基(ji)後吹勻。然(ran)後將所(suo)有細(xi)胞懸液(ye)加入含(han)適量(liang)培養基(ji)的(de)培養瓶(ping)中(zhong)培養過夜（或(huo)將細(xi)胞懸液(ye)加入10 cm皿中，加入約8 mL培養基(ji)，培養過夜）。第(di)二(er)天換液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞密度。

2) 細(xi)胞傳代：如果(guo)細(xi)胞密度達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行(xing)傳代培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤(run)所(suo)有細(xi)胞，將培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況(kuang)而定），然(ran)後在(zai)顯微(wei)鏡下觀(guan)察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿回(hui)操作臺，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶(ping)後加2-3ml培養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培養液(ye)後吹勻。

c、將細(xi)胞懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例分到新的(de)含(han)8 mL培養基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞生長(chang)狀態良好時，可進(jin)行(xing)細(xi)胞凍存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培養液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下離心4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計數。

b、根(gen)據細(xi)胞數量(liang)加入無血清(qing)細(xi)胞凍存(cun)液(ye)，使細(xi)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍(dong)存1mL細(xi)胞懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管做好標識(shi)。將凍(dong)存管放(fang)入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管位置(zhi)以便(bian)下次拿取(qu)。

公司(si)正在(zai)出售的產品(pin)：

NSDHL： 類脫氫酶樣(yang)蛋(dan)白NSDHL抗體 人胚(pei)肺成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞;HFL-I

IL12B Protein Marmoset 重(zhong)組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋(dan)白 (Fc 標簽(qian)) 大(da)鼠生長(chang)分化(hua)因(yin)子3(GDF3)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Col IV  大(da)鼠Ⅳ型(xing)膠(jiao)原(yuan) 96T

Phospho-NFKB1(Ser373)： 0酸(suan)化(hua)細(xi)胞核因(yin)子p50/k基因(yin)結合核因(yin)子抗體 EPHB1 Others Mouse 小(xiao)鼠 EphB1 / EPHT2 桿(gan)狀病毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照)

小(xiao)鼠膀胱(guang)平(ping)滑肌細(xi)胞培養基(ji) 100mL 大(da)鼠生長(chang)分化(hua)因(yin)子2(GDF2)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor)  人腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營(ying)養因(yin)子 96T

phospho-NF1(Ser2817)： 0酸(suan)化(hua)1型(xing)神(shen)經(jing)纖維瘤抗體 F81細(xi)胞，貓腎(shen)細(xi)胞 人結腸(chang)癌(ai)細(xi)胞,LS174T細(xi)胞 CM-H085人臍動(dong)脈平(ping)滑肌細(xi)胞培養基(ji)100mL

IRX5： Iroquois同(tong)源(yuan)蛋(dan)白5抗體 CDC37 Others Mouse 小(xiao)鼠 CDC37 / CDC37A 桿(gan)狀病毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照)

人膀胱(guang)平(ping)滑肌細(xi)胞培養基(ji) 100mL 人S100A14鈣結合蛋(dan)白(S100A14)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) SRF(Serum response factor) 血清(qing)應(ying)答因(yin)子抗原 0.5mg

Integrin alpha E： 整(zheng)合素αE抗體 草魚(yu)肝(gan)臟(zang)細(xi)胞;L8824 人視網膜母細(xi)胞瘤，WERI-Rb-1細(xi)胞 KB(口腔(qiang)表(biao)皮(pi)樣(yang)癌(ai)細(xi)胞)

IL1R2 Others Mouse 小(xiao)鼠 IL1R2 / CD121b 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照) 人Qa淋(lin)巴細(xi)胞抗原2(Qa-2)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) SREBP-1(Sterol Regulatory Element Binding Protein-1) 調節元(yuan)件結合蛋(dan)白1抗原 0.5mg

ICAM-2： 細(xi)胞間粘(zhan)附分子-2抗體 牦(mao)牛(niu)皮(pi)膚細(xi)胞;BMU-S1

NCI-h1688人經(jing)典(dian)小(xiao)細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞CL-0182P815(小(xiao)鼠肥大(da)細(xi)胞瘤細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠白介(jie)素(su)7(IL7)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) pERK(Human phospho-extracellular signal-regulated kinase)  人0酸化(hua)細(xi)胞外信(xin)號調節激(ji)酶 96T

RIPK-1： 絲酸蘇酸激酶(mei)1受(shou)體相互作用蛋(dan)白抗體 EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照)

人臍帶(dai)間充質(zhi)幹細(xi)胞裂(lie)解(jie)物HUMSCL 大(da)鼠白介(jie)素(su)6受(shou)體(IL-6R)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) AChE(Human Acetylcholinesterase)  人乙酰(xian)酯(zhi)酶(mei) 96T

RAIDD： CASP2雕(diao)亡相關(guan)蛋(dan)白抗體 恒河(he)猴腎(shen)細(xi)胞;MMK2

人整(zheng)合SV40基因(yin)的(de)上(shang)皮(pi)細(xi)胞;HBL-100 [HBL100] 人腎(shen)動(dong)脈平(ping)滑肌細(xi)胞培養基(ji) 100mL 大(da)鼠白介(jie)素(su)6受(shou)體(IL6R)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) GOD(Human glucose oxidase)  人葡(pu)萄(tao)糖氧(yang)化(hua)酶(mei) 96T

三、培養註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞後首先觀(guan)察細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完好，培養液(ye)是(shi)否(fou)有漏液(ye)、渾濁等現象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述現(xian)象 發(fa)生請及時(shi)和我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細(xi)胞說明書(shu)，了解細(xi)胞相關(guan)信(xin)息，如細(xi)胞形態、所(suo)用培養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因(yin)子等，確(que)保細(xi)胞培養條(tiao)件壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培養條(tiao)件不(bu)壹致而(er)導致細(xi)胞出現問題(ti)，責任(ren)由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞狀態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分細(xi)胞由於(yu)溫度 變(bian)化(hua)及劇烈(lie)碰亡破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎片，是(shi)正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好細(xi)胞狀態後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可以消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直接(jie)混勻收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞，並接(jie)種到(dao)新的(de)培養瓶(ping)或(huo)培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請客戶(hu)用相(xiang)同條件的培養基(ji)用於(yu)細(xi)胞培養。

6. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收到細(xi)胞後前 3 天各拍幾張(zhang)細(xi)胞照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀態，便(bian)於(yu)和我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於(yu)運輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感(gan)細(xi)胞會出現不(bu)穩定(ding)的情況(kuang)，請及時(shi)和我(wo)們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的具(ju)體情況(kuang)，以便(bian)我(wo)們的技(ji)術(shu)人員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供科研(yan)使用。

8. 備註(zhu)：運輸(shu)用的(de)培養基(ji) (灌液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培養細(xi)胞，請換用按(an)照說明書(shu)細(xi)胞培 養條(tiao)件新配(pei)制(zhi)的培養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞。     收到細(xi)胞後第(di)壹次傳代建議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。