IEC-6大(da)鼠(shu)小腸隱(yin)窩(wo)上(shang)皮(pi)細胞

公(gong)司(si)產品僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不得(de)用於(yu)臨床診斷(duan)！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮變圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培(pei)養

液終止消化，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將懸液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後按 1:2 比(bi)例進行分(fen)瓶傳(chuan)代，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱中培(pei)養；

壹(yi)、商品介(jie)紹(shao)：

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮變圓(yuan)後加入(ru)培(pei)養液終

止消化，輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將懸液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適量的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並(bing)放(fang)置於(yu)凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先將細胞凍(dong)存(cun)管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其移入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後轉入(ru)液(ye)氮中進行長(chang)期(qi)保存。使用程序

降(jiang)溫(wen)盒可直接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細胞培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞：以(yi)下(xia)細胞培(pei)養凍(dong)存(cun)處理僅(jin)供(gong)參(can)考，具體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨貨(huo)產品說明書(shu)為主(zhu)。將含有(you)1 mL細胞懸液的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心3 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將所有(you)細胞懸液加入(ru)含(han)適量培(pei)養基(ji)的(de)培(pei)養瓶中培(pei)養過夜（或(huo)將細胞懸液加入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過夜）。第(di)二天換液(ye)並檢查細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代：如果(guo)細胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可進行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄去培(pei)養上(shang)清(qing)，用不含鈣(gai)、鎂離子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中，使(shi)消化液(ye)浸(jin)潤所有(you)細胞，將培(pei)養瓶置於(yu)37℃培(pei)養箱中消化1-2 min（視細胞情(qing)況(kuang)而(er)定），然(ran)後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿回操(cao)作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後加2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止消化。輕輕打(da)勻後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液後吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞懸液按1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新的(de)含8 mL培(pei)養基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀態(tai)良好時，可進行細胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集細胞及(ji)細胞培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心4 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄盡PBS，進行細胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞數(shu)量(liang)加入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液，註意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做好標識。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮灌儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置以便(bian)下次拿取(qu)。

公司(si)正(zheng)在(zai)出售(shou)的(de)產品：

MHC class I： 組織(zhi)相容(rong)性復(fu)合(he)體蛋白1抗(kang)體 人(ren)羊膜(mo)上(shang)皮(pi)細胞cDNAHAmEpiC cDNA

BALB/3T3 clone A31小鼠(shu)胚(pei)胎成纖(xian)維細胞 BALB/3T3 clone A31 mouse embryo fibroblasts DMEM培(pei)養基(ji)+10%FBS 大(da)鼠(shu)細胞色(se)素(su)P450家(jia)族(zu)成(cheng)員11A1(CYP11A1)ELISA試劑盒 IL-17(Human Interleukin 17)  人(ren)白介(jie)素(su)17 96T

MRPS22： 線粒(li)體(ti)核糖(tang)體蛋白S22抗(kang)體 EM2 Others Human 人(ren) EM2 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照)

CL-0362HS 683(人(ren)腦膠(jiao)質(zhi)瘤(liu)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)細胞色(se)素(su)P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒 LBP  大鼠脂(zhi)多(duo)糖(tang)結合蛋白 96T

MPP7： 棕(zong)櫚酰化膜(mo)蛋白7抗(kang)體 雜(za)交瘤(liu)(B類(lei));Z153A2A5B3A12

phospho-HNF4 (Ser304)： 0酸(suan)化肝(gan)細胞核因子(zi)4α抗體 水(shui)牛皮(pi)膚成(cheng)纖(xian)維樣(yang)細胞;WB-S4 胃(wei)腺癌(ai)細胞，SGC7901細胞 CW-2(結(jie)腸腺癌(ai)細胞)

REG3A Others Rat 大(da)鼠 REG3A 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 人(ren)彈(dan)白(Elastin)ELISA 試劑盒 T7 tag(recombinant T7-tagged proteins) T7 tag標簽抗(kang)原 0.5mg

HMG14： 高(gao)遷移率核小體(ti)結合(he)蛋白1 0.1ml

Rhesus antibody Rh CCDC60 卷(juan)曲(qu)螺(luo)旋(xuan)結構域(yu)蛋白60抗(kang)體 CM-M034小鼠(shu)肝動(dong)脈(mai)內(nei)皮細胞培(pei)養基(ji)100mL

TSCCA細胞，人(ren)舌鱗(lin)癌(ai)細胞系(xi) 乙(yi)型(xing)副(fu)傷(shang)門氏(shi)菌 黑化大家(jia)鼠(shu)肺(fei)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞;NRm 人(ren)膽酸(Cholic acid)ELISA 試劑盒 V5 tag(recombinant V5-tagged protein) V5 tag多肽(tai)抗(kang)原 0.5mg

IEC-6大(da)鼠小腸隱(yin)窩(wo)上(shang)皮(pi)細胞P2X5b： 三(san)0酸(suan)腺苷受體(ti)P2X5b抗(kang)體(ti) SW13細胞，人(ren)腎上(shang)腺皮(pi)質瘤 人(ren)癌細胞,BT-549細胞 抗(kang)真(zhen)菌溶液AMS

HA Others H5N2 甲型流感(gan) H5N2 (A/osich/South Africa/AI1091/2006) 血(xue)凝素HA1 (Hemagglutinin) 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 大鼠(shu)低氧誘(you)導因子(zi)2α(HIF2α)ELISA試劑盒 NKB (Ret) 大鼠神經肽(tai)B 96T

P2RX6： 三(san)0酸(suan)腺苷受體(ti)P2X6抗(kang)體(ti) 猴(hou)腎細胞;vero IgRCD4-

RBE, 人(ren)肝膽管癌細胞 大(da)鼠(shu)低(di)氧誘(you)導因子(zi)1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 P-CK(pan-cytokeratin)  豬(zhu)廣譜細胞角(jiao)蛋白 96T

PRR7： 突觸富含(han)脯(pu)酸膜(mo)蛋白7抗(kang)體 IL18BP Others Human 人(ren) IL18BPa 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照)

三(san)、培(pei)養註意(yi)事項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞後首先(xian)觀(guan)察(cha)細胞瓶(ping)是否完好，培(pei)養液是否有(you)漏液、渾濁(zhuo)等(deng)現象，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及(ji)時和我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞說明書(shu)，了(le)解(jie)細胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞形(xing)態(tai)、所用培(pei)養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例、所需(xu) 細胞因子(zi)等，確保細胞培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致而(er)導致細胞出現(xian)問(wen)題，責(ze)任由 客(ke)戶(hu)自行承擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭細胞瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞狀態(tai)。因運輸問(wen)題，部分(fen)細胞由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變化及劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎形(xing)成碎片(pian)，是正常現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細胞狀態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可(ke)以(yi)消化，懸浮細胞直接混(hun)勻(yun)收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮(xian)的培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細胞，並(bing)接種(zhong)到(dao)新的(de)培(pei)養瓶或培(pei)養皿(min)中，置於(yu)培(pei)養箱中進行培(pei)養。

5. 請(qing)客(ke)戶用相同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養基(ji)用於(yu)細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收到(dao)細胞後前 3 天各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞照片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀態(tai)，便(bian)於(yu)和我(wo)司(si)技術(shu)部溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由於(yu)運輸的(de)原因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞會(hui)出現(xian)不(bu)穩定的(de)情(qing)況，請(qing)及(ji)時和我(wo)們聯系，告知細胞 的(de)具(ju)體(ti)情況，以(yi)便(bian)我(wo)們的技術(shu)人(ren)員跟蹤(zong)回訪直至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該細胞僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備註：運輸用的培(pei)養基(ji) (灌液培(pei)養基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養細胞，請(qing)換用按照說明書(shu)細胞培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的(de)培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細胞。     收到(dao)細胞後第(di)壹(yi)次傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。