C6大鼠(shu)腦膠(jiao)質瘤細胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研研究使用、不得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕(qing)輕吹(chui)打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫落，然後將懸(xuan)液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後按 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養箱中(zhong)培養；

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養液終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫落，然後將懸(xuan)液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放置於(yu)凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移入-80℃過夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行長期保存(cun)。使用程(cheng)序(xu)

降溫盒可(ke)直(zhi)接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養操作

1) 復蘇細胞(bao)：以下細胞(bao)培養凍(dong)存(cun)處(chu)理僅供(gong)參(can)考(kao)，具體操作步驟以隨貨產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主。將含有1 mL細胞(bao)懸液的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基(ji)混合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄去上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將所(suo)有細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含適(shi)量(liang)培養基(ji)的(de)培養瓶中(zhong)培養過夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養基(ji)，培養過夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液並(bing)檢查細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去培養上(shang)清(qing)，用不含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中(zhong)，使消化液浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞(bao)，將培養瓶置於(yu)37℃培養箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細胞(bao)情況(kuang)而定(ding)），然後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細胞(bao)消化情況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大部分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫落，迅速拿(na)回操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶後加2-3ml培養基(ji)終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上(shang)清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液按1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的(de)含8 mL培養基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置於(yu)培養箱中(zhong)培養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞(bao)生長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培養液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄去上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數。

b、根據(ju)細胞(bao)數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做好標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置以便(bian)下次拿(na)取(qu)。

公司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售的(de)產(chan)品(pin)：

IL25 Protein Mouse 重(zhong)組小鼠(shu) IL25 蛋白(bai) (His 標簽) 大鼠(shu)前(qian)列(lie)腺合成(cheng)酶(PGDS)ELISA試劑(ji)盒 GAD-Ab  大鼠(shu)谷酸脫羧(suo)酶自(zi)身(shen)抗體 RPS6KA2 Others Human 人(ren) RSK3 / RPS6KA2 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照)

小鼠(shu)角膜(mo)上(shang)皮細胞(bao)培養基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)前(qian)列(lie)腺2(PGD2)ELISA試劑(ji)盒 EK(Human epidermal keratin)  人(ren)表皮角蛋白(bai) 96T

Nestin： 巢(chao)蛋白(bai)/神(shen)經(jing)上(shang)皮幹(gan)細胞(bao)蛋白(bai)抗體 VERO C1008細胞(bao)，非洲綠(lv)猴(hou)腎(shen)細胞(bao) 人(ren)胰(yi)腺腺泡上(shang)皮癌,HPAC細胞(bao) CM-M087小鼠(shu)軟骨(gu)細胞(bao)培養基(ji)100mL

SERPINI1 Others Mouse 小鼠(shu) SerpinI1 / Neuroserpin 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照) 大鼠(shu)前(qian)列(lie)腺環素合成(cheng)酶(PGIS)ELISA試劑(ji)盒 M2-PK(Mouse Pyruvate Kinase)  小鼠(shu)酸激酶M2型(xing)同(tong)工(gong)酶 96T

Neurobeachin： 蛋(dan)白(bai)激酶錨(mao)定(ding)蛋白(bai)抗體 真皮微血(xue)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(fang)(1ml)

Rhesus antibody Rh Clenbuterol Hydrochloride(Spiropent)/抗體 ALOX15B Others Human 人(ren) ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照)

人(ren)真皮淋巴上(shang)皮細胞(bao)培養基(ji) 100mL 犬血(xue)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)生長因子(VEGF)ELISA試劑(ji)盒 Snake poison Protein 蛇毒(du)蛋(dan)白(bai) 1mg

IFI16： γ幹(gan)擾(rao)素誘(you)導(dao)蛋(dan)白(bai)16抗體 小鼠(shu)成(cheng)纖維(wei)細胞(bao)(EGFP標記) 人(ren)肺(fei)癌細胞(bao)，SW 900[SW-900; SW900]細胞(bao) P3X63Ag8(骨(gu)髓(sui)瘤細胞(bao))

CD68 Others Rat 大(da)鼠(shu) CD68 / Macrosialin 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照) 犬心肽(tai)(ANP)ELISA 試劑(ji)盒 Leptin 瘦素(抗原) 0.5mg

Integrin Alpha V + Beta 1： 整合素αVβ1抗體 小鼠(shu)誘導(dao)性多潛能(neng)幹(gan)細胞(bao);PUMC-mips-D2

C6大(da)鼠(shu)腦膠(jiao)質瘤細胞(bao)RNF166： 環指(zhi)蛋白(bai)166抗體 HA Others H7N9 甲(jia)型流(liu)感(gan) H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血(xue)凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照)

EC-304? 人(ren)血(xue)管(guan)內(nei)皮細胞(bao) 大鼠(shu)β澱粉樣(yang)蛋白(bai)1-42(Aβ 1-42)ELISA試劑(ji)盒 MHC(Human myosin heavy chain)  人(ren)肌(ji)球(qiu)蛋白(bai)重鏈(lian) 96T

RP1： 視(shi)網膜(mo)色素變性蛋(dan)白(bai)1抗體 T-24細胞(bao)，膀胱變移細胞(bao)癌細胞(bao) 人(ren)巨(ju)細胞(bao)白(bai)血(xue)病(bing)細胞(bao)株,Mo7e細胞(bao) 人(ren)肺(fei)腺癌細胞(bao);Calu-3

FCGRT & B2M Others Human 人(ren) FCGRT & B2M Heterodimer 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照) 大鼠(shu)β澱粉樣(yang)蛋白(bai)1-40(Aβ1-40)ELISA試劑(ji)盒 HSP-27(Human heat shock protein 27)  人(ren)熱休(xiu)克(ke)蛋白(bai)27 96T

RAB10： G蛋(dan)白(bai)結合蛋白(bai)RAB10抗體 SV40T轉化(hua)的(de)人(ren)胚腎(shen)細胞(bao)(亞(ya)系(xi));293T/17

三(san)、培養註意(yi)事(shi)項 

1. 收到(dao)細胞(bao)後首先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶是否完(wan)好，培養液是(shi)否有漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現象，若(ruo)有上(shang)述(shu)現象 發(fa)生請及(ji)時(shi)和我們聯系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解細胞(bao)相關(guan)信(xin)息，如細胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用培養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因子等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培養條件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養條件(jian)不壹致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞(bao)出現問題(ti)，責(ze)任(ren)由 客戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問題(ti)，部分(fen)細胞(bao)由於(yu)溫度 變化(hua)及劇烈碰(peng)亡破(po)碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是正常現象。觀(guan)察好細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接混勻(yun)收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮的(de)培養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到(dao)新的(de)培養瓶或(huo)培養皿中(zhong)，置於(yu)培養箱中(zhong)進(jin)行培養。

5. 請客戶用相(xiang)同(tong)條件(jian)的(de)培養基(ji)用(yong)於(yu)細胞(bao)培養。

6. 建(jian)議(yi)客戶收到(dao)細胞(bao)後前(qian) 3 天各拍(pai)幾(ji)張細胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和我司(si)技(ji)術部溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由於(yu)運(yun)輸的(de)原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細胞(bao)會出現不穩(wen)定(ding)的(de)情況(kuang)，請及(ji)時(shi)和我們聯系(xi)，告(gao)知細胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情況(kuang)，以便(bian)我們的(de)技(ji)術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題(ti)解決。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科(ke)研使用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不能(neng)再用(yong)來培養細胞(bao)，請換(huan)用(yong)按照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞(bao)培 養條件(jian)新配(pei)制(zhi)的(de)培養基(ji)來(lai)培養細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後第(di)壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。