HMEC-1人(ren)微(wei)血管(guan)內皮(pi)細(xi)胞(bao)株

公司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研研(yan)究使用、不得用於臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中，倒置顯微(wei)鏡下(xia)觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化(hua)，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進行(xing)分瓶傳代，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

壹、商(shang)品介紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中，倒置顯微(wei)鏡下(xia)觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化(hua)，輕(qing)輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並放置於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進行長(chang)期保(bao)存(cun)。使用程序

降溫(wen)盒(he)可直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養(yang)操作

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅供(gong)參考，具體操作步驟(zhou)以(yi)隨貨(huo)產(chan)品說明(ming)書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶中培養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過夜）。第(di)二(er)天(tian)換液(ye)並檢查(zha)細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行(xing)傳代培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上清(qing)，用不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使消化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶置於37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況(kuang)而(er)定(ding)），然後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部(bu)分變圓並脫落，迅速(su)拿(na)回操作臺，輕敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例分到新的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新皿中或者瓶中，置於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態良好時，可進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記錄凍(dong)存(cun)管(guan)位置以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取。

公司正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的產(chan)品：

Phospho-MSK1 (Ser376)： 0酸(suan)化有(you)絲分裂(lie)原和(he)應(ying)激(ji)活(huo)化型(xing)蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)1抗(kang)體 GBC-SD細(xi)胞(bao)，膽(dan)囊癌細(xi)胞(bao) 體細(xi)胞(bao)系,WI-38細(xi)胞(bao) 小(xiao)鼠(shu)小(xiao)膠(jiao)質細(xi)胞(bao);BV2

CXCL16 Others Rat 大(da)鼠(shu) CXCL16 / SR-PSOX 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠(shu)心(xin)型(xing)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)結合蛋(dan)白(bai)(h-FABP)ELISA試(shi)劑盒(he) BMP-2(Mouse Bone morphogenetic protein 2)  小(xiao)鼠(shu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2 96T

Phospho-MSK1 (Thr581)： 0酸(suan)化有(you)絲分裂(lie)原和(he)應(ying)激(ji)活(huo)化型(xing)蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)1抗(kang)體 人(ren)臍(qi)動(dong)脈內皮(pi)細(xi)胞(bao)總(zong)RNAHUAEC NA

U-373MG人(ren)腦(nao)神經(jing)膠(jiao)質瘤(liu)細(xi)胞(bao) U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS 大鼠(shu)心(xin)型(xing)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)結合蛋(dan)白(bai)(h-FABP)ELISA試(shi)劑盒(he) HSP47  大鼠(shu)熱(re)休(xiu)克蛋(dan)白(bai)47 96T

MYPT1： 肌球蛋(dan)酸(suan)酶抗(kang)體 AMICA1 Others Human 人(ren) JAML / AMICA 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

人(ren)前(qian)列(lie)腺上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 人(ren)肺炎衣原體抗(kang)體(Cpn-Ab)ELISA 試(shi)劑盒(he) ets1/E26 (E-twenty six 1) Ets轉錄因(yin)子(zi)家(jia)族(zu)ets1抗原 0.5mg

Phospho-HDAC4 (Ser632) + HDAC5 (Ser498) + HDAC7 (Ser486)： 0酸(suan)化組(zu)蛋(dan)白(bai)去(qu)乙(yi)酰(xian)化酶(mei)4/5/7抗體 大(da)額牛皮(pi)膚(fu)細(xi)胞(bao);BFR-S3 非洲(zhou)綠猴腎細(xi)胞(bao)，VERO細(xi)胞(bao) PC-3(前(qian)列(lie)腺癌細(xi)胞(bao))

FAM3D Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) FAM3D / Oit1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 人(ren)肺耐(nai)藥(yao)蛋(dan)白(bai)(LRP)ELISA 試(shi)劑盒(he) EV71(Human enterovirus 71)VP1(CT) 腸(chang)道(dao)病毒71型(xing)/手(shou)足口病病毒抗(kang)原(C端) 0.5mg

Phospho-HER2 (Tyr877)： 0酸(suan)化HER2受(shou)體(ti)抗體 CL-0034BHK-21(倉(cang)鼠(shu)腎細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2

A673細(xi)胞(bao)，人(ren)橫(heng)紋(wen)癌細(xi)胞(bao) 肺炎鏈球菌 615小(xiao)鼠(shu)狀(zhuang)肺腺(xian)癌瘤(liu)株;P615 人(ren)肺部(bu)活化(hua)調(tiao)節(jie)趨(qu)化(hua)因(yin)子(zi)(PARC/CCL18)ELISA 試(shi)劑盒(he) ATEXPA10 peptide 植(zhi)物擴(kuo)張(zhang)蛋(dan)白(bai)ATEXPA10(擬(ni)南(nan)芥(jie))抗(kang)原 0.5mg

HMEC-1人(ren)微(wei)血管(guan)內皮(pi)細(xi)胞(bao)株Protein Z： 蛋(dan)白(bai)Z抗(kang)體(ti) DMF7細(xi)胞(bao)，雙位點HC-KIT受(shou)體(ti)細(xi)胞(bao)株 人(ren)癌高(gao)轉移細(xi)胞(bao),MDA-MB-435細(xi)胞(bao) 間充(chong)質幹(gan)細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)MSCM-sf

CD33 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) CD33 / Siglec-3 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠(shu)非轉移細(xi)胞(bao)1表(biao)達NM23A蛋(dan)白(bai)(NME1)ELISA試(shi)劑盒(he) Inhbb(Human inhibin beta-B)  人(ren)抑(yi)制(zhi)素β-B 96T

Protein S： 蛋(dan)白(bai)S抗(kang)體(ti) CM-H037人(ren)結腸(chang)平滑肌細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)100mL

IMR-32人(ren)神經(jing)母(mu)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao) IMR-32 human neuroblastoma cells MEM培養(yang)基(ji)(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)非受(shou)體(ti)型(xing)蛋(dan)白(bai)酪酸(suan)0酸(suan)酶11(PTPN11)ELISA試(shi)劑盒(he) CPSA  大鼠(shu)復合(he)前(qian)列(lie)腺特異(yi)性(xing)抗原 96T

PEBP2B： 多(duo)瘤(liu)病毒增(zeng)強了結合蛋(dan)白(bai)2β抗(kang)體(ti) F11R Others Human 人(ren) JAM-A 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

三、培(pei)養(yang)註意事(shi)項 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀察細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否完好，培養(yang)液(ye)是(shi)否有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現象，若有(you)上述現象 發生請及(ji)時和(he)我們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細(xi)胞(bao)說明(ming)書，了解(jie)細(xi)胞(bao)相關信息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形態、所用培養(yang)基(ji)、血清(qing)比(bi)例、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因子(zi)等(deng)，確(que)保細(xi)胞(bao)培養(yang)條件(jian)壹致，若(ruo)由於培養(yang)條件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出現問題，責(ze)任(ren)由 客戶自(zi)行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因運輸(shu)問題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正常現象。觀察好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮的培(pei)養(yang)基(ji)重懸 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種到新的培(pei)養(yang)瓶或培養(yang)皿中(zhong)，置於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客戶用相同條件(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)用於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建議(yi)客戶收到細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便於和(he)我司技(ji)術(shu)部(bu)溝通(tong) 交流。由於運輸(shu)的原因，個別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會出(chu)現不穩(wen)定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及(ji)時和(he)我們聯系，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的具體情況(kuang)，以(yi)便(bian)我們的技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回訪直(zhi)至(zhi)問題解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供(gong)科(ke)研使用。

8. 備註(zhu)：運輸(shu)用的培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不能再(zai)用來培養(yang)細(xi)胞(bao)，請換(huan)用按照說明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條件(jian)新配制(zhi)的培(pei)養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。