HS746T人(ren)胃癌細胞

公司產(chan)品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使用、不得(de)用於臨床診斷！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中的(de)培養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察，待(dai)細胞回縮(suo)變圓後(hou)加入(ru) 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化，再(zai)輕(qing)輕吹打(da)細胞使之(zhi)脫落，然後(hou)將懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈澱細胞用 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養箱(xiang)中培養；

壹、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

2、細(xi)胞凍存：

1）細(xi)胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中的(de)培養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察，待(dai)細胞回縮(suo)變圓後(hou)加入(ru)培養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化，輕(qing)輕吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫落，然後(hou)將懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先將(jiang)細(xi)胞凍存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移(yi)入-80℃過夜，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮中進(jin)行(xing)長(chang)期保存(cun)。使用程(cheng)序

降(jiang)溫盒可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞培養操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以下細(xi)胞培養凍(dong)存(cun)處理(li)僅供參考(kao)，具體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水浴中迅(xun)速(su)搖晃解凍，加(jia)4 mL培養基混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件下離(li)心3 min，棄(qi)去上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將所有(you)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量培養基的(de)培養瓶中培養過夜（或(huo)將細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基，培養過夜）。第二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢查(zha)細胞密(mi)度。

2) 細胞傳(chuan)代：如果(guo)細胞密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳(chuan)代培養。

a、棄(qi)去培養上清，用不含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，使(shi)消化液(ye)浸(jin)潤(run)所有(you)細(xi)胞，將培養瓶置於37℃培養箱(xiang)中消化1-2 min（視(shi)細胞情況而(er)定(ding)），然後(hou)在(zai)顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞消化情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓並(bing)脫落，迅速(su)拿回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培養瓶後(hou)加2-3ml培養基終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到新的(de)含(han)8 mL培養基的(de)新皿(min)中或(huo)者瓶中，置於培養箱(xiang)中培養。 3) 細(xi)胞凍存：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良好時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞凍存。下(xia)面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及細胞培養液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心4 min，棄(qi)去上清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計數。

b、根據細(xi)胞數量加(jia)入(ru)無(wu)血清細(xi)胞凍存液(ye)，使(shi)細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液(ye)，註意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好標識。將凍存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管(guan)位(wei)置以(yi)便下次(ci)拿取(qu)。

公司正(zheng)在(zai)出售的產(chan)品：

MBP： 髓(sui)鞘(qiao)堿白/0脂(zhi)堿白抗體(ti) HSPA1A Others Human 人(ren) HSP70 / HSPA1A 桿狀(zhuang)病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

大(da)鼠脈(mai)絡(luo)膜血管(guan)細(xi)胞培養基 100mL 大(da)鼠酰(xian)基化(hua)饑(ji)餓(e)素(su)(AG)ELISA試(shi)劑盒 c  大(da)鼠心(xin)肌特(te)異(yi)性(xing)肌鈣蛋(dan)白T 96T

MelanA： 黑色素(su)瘤(liu)相(xiang)關(guan)抗原/黑色素(su)-A抗體(ti) NCI-H446[H446]細胞，小(xiao)細(xi)胞肺癌細(xi)胞 人(ren)癌細胞系,ZR-75-30細胞 615小(xiao)鼠T細(xi)胞性白血(xue)病(bing)瘤株(zhu);L7712

CD3D Others Cynomolgus 食(shi)蟹(xie)猴(hou) CD3d / CD3 delta 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠纖(xian)維(wei)粘(zhan)連(lian)蛋(dan)白(FN)ELISA試(shi)劑盒 sMHC-1(Mouse soluble myosin heavy chain 2)  小(xiao)鼠可(ke)溶性(xing)肌球蛋(dan)白重(zhong)鏈(lian)1 96T

MCP1： 單(dan)核(he)細(xi)胞趨(qu)化(hua)蛋(dan)白1抗體(ti) 人(ren)骨骼肌成(cheng)肌細胞總(zong)RNAHSkMM NA

CCL3 Protein Rat 重組(zu)大(da)鼠 CCL3 / Mip1a 蛋(dan)白 人(ren)多(duo)巴(ba)胺脫羧(suo)酶(DDC)ELISA 試(shi)劑盒 Gax(growth arrest-specific homeobox) 生(sheng)長(chang)終(zhong)止(zhi)特(te)異(yi)性(xing)同源(yuan)盒基因(yin)抗原 0.5mg

H5N1 Matrix Protein 2： A型病(bing)毒H5N1-M2蛋(dan)白抗體(ti) THPO Others Human 人(ren) Thrombopoietin / THPO / TPO CHO細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

人(ren)胰腺上皮細胞培養基 100mL 人(ren)多(duo)巴(ba)胺-β羥(qiang)化(hua)酶(DBH)ELISA 試(shi)劑盒 GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 生(sheng)長(chang)分(fen)化(hua)因子8抗原 0.5mg

Hyaluronidase-1： 透(tou)明(ming)質(zhi)酸酶/酸酶抗體(ti) 大(da)額牛皮膚成(cheng)纖(xian)維(wei)樣細胞;BOS-1 正常肝(gan)細胞，L-02細胞 T24(膀(pang)胱(guang)移(yi)行細(xi)胞癌細胞)

RTN4R Others Human 人(ren) Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 人(ren)多(duo)巴(ba)胺D2受體(ti)(D2R)ELISA 試(shi)劑盒 GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 膠質(zhi)細(xi)胞源(yuan)性神(shen)經營養因(yin)子(zi)抗原 0.5mg

HS746T人(ren)胃癌細胞PRMT1： 蛋(dan)白質(zhi)精(jing)酸甲基轉(zhuan)移(yi)酶1抗體(ti) SUSD4 Others Human 人(ren) SUSD4 / Sushi domain-coaining 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

MV3 人(ren)黑色素(su)瘤(liu)細(xi)胞 大(da)鼠兒(er)茶(cha)酚胺(CA)ELISA 試(shi)劑盒 AR(Human androgen receptor)  人(ren)雄激(ji)素(su)受體(ti) 96T

P450 1A2/CYP1A2： 細胞色素(su)P450 1A2抗體(ti) DU145細胞，人(ren)前(qian)列(lie)腺癌細胞 人(ren)癌細胞,LCC1細胞 間(jian)充(chong)質(zhi)幹細(xi)胞培養基MSCM-acf-prf

ENPP7 Others Mouse 小(xiao)鼠 ENPP7 / NPP-7 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠兒(er)茶(cha)酚-O-甲基轉(zhuan)移(yi)酶(COMT)ELISA試(shi)劑盒 LN  大(da)鼠層連(lian)蛋(dan)白/板層素(su) 96T

Phospho-PLC gamma 1 (Tyr771)： 0酸化(hua)0酯(zhi)酶Cγ1抗體(ti) CM-H004人(ren)肺大(da)靜脈(mai)內(nei)皮(pi)細胞培養基100mL

三、培養註意(yi)事項 

1. 收(shou)到細胞後(hou)首先觀察細(xi)胞瓶是否(fou)完好(hao)，培養液(ye)是否(fou)有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若有(you)上述(shu)現象 發生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀細胞說明(ming)書(shu)，了(le)解細胞相關(guan)信(xin)息，如細胞形(xing)態、所用培養基、血(xue)清比(bi)例(li)、所需(xu) 細胞因子等(deng)，確(que)保細(xi)胞培養條(tiao)件壹致，若由(you)於培養條(tiao)件不壹致而(er)導(dao)致細胞出現問題(ti)，責任由(you) 客戶自(zi)行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞瓶表(biao)面(mian)，顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞狀(zhuang)態。因運輸(shu)問題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞由(you)於溫度 變化及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正(zheng)常現象。觀察好(hao)細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於 37℃培養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可以消化，懸浮(fu)細胞直接混勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮(xian)的培養基重(zhong)懸 細(xi)胞，並(bing)接種到新的(de)培養瓶或(huo)培養皿(min)中，置於培養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客戶用相同條(tiao)件的培養基用於細(xi)胞培養。

6. 建(jian)議(yi)客戶收(shou)到細胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便於和(he)我司技(ji)術(shu)部(bu)溝通(tong) 交流。由(you)於運(yun)輸(shu)的原因，個(ge)別敏感細(xi)胞會出現不穩(wen)定的(de)情況，請(qing)及時(shi)和(he)我們聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細胞 的具體(ti)情況(kuang)，以(yi)便我們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題(ti)解決。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供科研(yan)使(shi)用。

8. 備註：運輸(shu)用的培養基 (灌(guan)液(ye)培養基) 不(bu)能再(zai)用來培養細(xi)胞，請(qing)換(huan)用按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)細胞培 養條(tiao)件新配(pei)制的(de)培養基來培養細(xi)胞。     收(shou)到細胞後(hou)第壹次(ci)傳(chuan)代建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。