CBRH7919大鼠肝癌細(xi)胞(bao)

公司產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研研究(jiu)使用、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培養液(ye)，用 PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約 1ml 至培養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止消化，再輕(qing)輕吹(chui)打(da)細(xi)胞使之脫落，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養箱(xiang)中培(pei)養；

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培養液(ye)，用 PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約 1ml 至培養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加入(ru)培(pei)養液(ye)終(zhong)

止消化，輕輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使之脫落，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於(yu)凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮中進(jin)行(xing)長期(qi)保(bao)存。使用程(cheng)序

降溫盒可(ke)直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞培養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以下細胞(bao)培(pei)養凍(dong)存處理(li)僅(jin)供(gong)參考(kao)，具體操作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速搖晃(huang)解凍，加4 mL培養基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清液，加1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養基(ji)的(de)培養瓶(ping)中培(pei)養過夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中，加入(ru)約8 mL培養基(ji)，培養過夜(ye)）。第(di)二天換液並檢查(zha)細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如果細胞密度達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳代培養。

a、棄(qi)去培養上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子的(de)PBS潤洗細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中，使消化液浸潤(run)所(suo)有(you)細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而(er)定(ding)），然後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下觀察細胞消化情況，若(ruo)細胞(bao)大部(bu)分(fen)變(bian)圓並(bing)脫落，迅(xun)速拿回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲幾(ji)下培養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止消化。輕輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例(li)分(fen)到(dao)新的(de)含8 mL培養基(ji)的(de)新皿中或者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞(bao)凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞(bao)培養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下離心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清液，用PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計(ji)數。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數量(liang)加入(ru)無血清細胞凍存液，使細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標(biao)識。將(jiang)凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄凍存管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下次拿取。

公司正(zheng)在(zai)出(chu)售的(de)產品：

其(qi)他(ta)白(bai)細胞介(jie)素(su) 大鼠葡萄(tao)糖(tang)依賴(lai)性胰島(dao)素(su)釋(shi)放多(duo)肽(tai)(GIP)ELISA試(shi)劑盒(he) OT/BGP(Mouse Osteocalcin/Bone gla protein)  小(xiao)鼠骨鈣素(su)/骨(gu)谷酸蛋白(bai) 96T

NAP1L2： 腦特異性蛋白BPX抗(kang)體 BTK Others Human 人(ren) Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆蟲(chong)細(xi)胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

小(xiao)鼠視(shi)網膜神經(jing)節(jie)細胞培養基(ji) 100mL 大鼠葡萄(tao)糖(tang)依賴(lai)性胰島(dao)素(su)釋(shi)放多(duo)肽(tai)(GIP)ELISA 試(shi)劑盒(he) Human CA724  人(ren)標(biao)誌(zhi)物(wu) 96T

NARF： 核(he)纖(xian)層蛋白A識別(bie)因(yin)子抗(kang)體 L1210細胞(bao)，白血(xue)病細(xi)胞(bao) 人(ren)肝癌細(xi)胞(bao),HepG-2細胞 CM-M118小(xiao)鼠虹膜色素(su)上(shang)皮細(xi)胞(bao)培(pei)養基(ji)100mL

FGF18 Others Human 人(ren) FGF18 / FGF-18 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 大鼠葡萄(tao)糖(tang)氧(yang)化酶(GOD)ELISA 試(shi)劑盒(he) GABA(Mouse Gamma-aminobutyric acid)  小(xiao)鼠γ基 96T

IGBP1： 免疫(yi)球(qiu)蛋白結(jie)合(he)蛋白(bai)1抗(kang)體 人(ren)子宮(gong)內膜(mo)腺(xian)癌細(xi)胞(bao);HEC-1-B

WI-38(人(ren)胚(pei)肺(fei)細胞) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠癌細(xi)胞;CCC-Ca761-03 犬(quan)腎(shen)素(su)(Renin)ELISA 試(shi)劑盒(he) MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓(sui)鞘相(xiang)關(guan)糖(tang)蛋白(bai)(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

phospho-IGF1R (Tyr1346)： 1受體抗(kang)體 原(yuan)代平滑肌(ji)細胞特(te)制(zhi)無血清添加劑Many types of cells包裝(zhuang)：1ml

EFNB3 Protein Rat 重(zhong)組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白(bai) (Fc 標簽(qian)) 犬(quan)腎(shen)上(shang)腺(xian)髓質(zhi)素(su)(ADM)ELISA 試(shi)劑盒(he) MMP-1(Mous ematrix metalloproteinases-1) 基(ji)質(zhi)金(jin)屬蛋(dan)白(bai)酶-1(小(xiao)鼠抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

IGFBPL1： 結合(he)蛋白(bai)樣1抗(kang)體 ASL Others Human 人(ren) Arginosuccinase / ASL 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆蟲(chong)細(xi)胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

CBRH7919大鼠肝癌細(xi)胞(bao)RPA70： 單鏈結(jie)合(he)蛋白(bai)70抗(kang)體 6T-CEM (人(ren)T細(xi)胞(bao)白(bai)血(xue)病細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2

EB病毒轉化的(de)人(ren)B淋(lin)巴細(xi)胞(bao);KMY0905 胎兒(er)真(zhen)皮(pi)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞培(pei)養基(ji) 100mL 大鼠β2糖蛋(dan)白1抗(kang)體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試(shi)劑盒(he) SAA(Human Serum amyloid A)  人(ren)血(xue)清澱粉樣蛋(dan)白A 96T

Retinal S antigen： 視(shi)網膜S抗(kang)原(yuan)抗(kang)體 CL-0280HEL(人(ren)紅(hong)白(bai)細(xi)胞(bao)白(bai)血病細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2

HUM, 正(zheng)常(chang)人(ren)主(zhu)動(dong)脈(mai)平滑肌(ji)細胞 大鼠β2能受體(β2-AR)ELISA試(shi)劑盒(he) Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60)  人(ren)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋(dan)白(bai)60 96T

RAMP2： 受體活性(xing)修飾蛋白2抗(kang)體 HA Others H7N9 甲型(xing)流感(gan) H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

三、培(pei)養註意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首先(xian)觀(guan)察細胞瓶是否完好(hao)，培(pei)養液(ye)是否有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現象，若(ruo)有(you)上(shang)述現象 發生(sheng)請(qing)及時和(he)我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解細胞相(xiang)關(guan)信息(xi)，如細胞(bao)形(xing)態、所(suo)用(yong)培(pei)養基(ji)、血清比例(li)、所需 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確(que)保(bao)細胞(bao)培養條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由於(yu)培養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現問題，責(ze)任由(you) 客(ke)戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細胞(bao)瓶表面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下觀察細胞狀(zhuang)態。因(yin)運輸問題，部(bu)分(fen)細(xi)胞由(you)於溫度 變(bian)化及劇烈(lie)碰亡破(po)碎(sui)形(xing)成碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常(chang)現象。觀察好細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精消毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞可(ke)以(yi)消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到新的(de)培養瓶(ping)或培(pei)養皿中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客戶用(yong)相(xiang)同(tong)條件的(de)培養基(ji)用於(yu)細(xi)胞培養。

6. 建(jian)議客(ke)戶收(shou)到(dao)細胞後(hou)前 3 天各(ge)拍幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄細胞狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和(he)我司技(ji)術部(bu)溝(gou)通 交流。由(you)於運輸的(de)原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏感細(xi)胞會出(chu)現不(bu)穩定(ding)的(de)情況，請(qing)及時和(he)我們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具體情況，以便(bian)我們的(de)技(ji)術人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至問題解決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註：運輸用的(de)培養基(ji) (灌(guan)液培(pei)養基(ji)) 不(bu)能再用來培(pei)養細(xi)胞，請(qing)換用按(an)照說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件新配制(zhi)的(de)培養基(ji)來培(pei)養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。