COLO206F細胞(bao)

公(gong)司(si)產品僅供(gong)科研研究(jiu)使(shi)用、不(bu)得用於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)！

1、細胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察，待細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈(chen)澱細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸，然(ran)後(hou)按 1:2 比例(li)進行(xing)分瓶傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)；

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察，待細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕輕吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並(bing)放置於(yu)凍(dong)存管(guan)中；

4）先將細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)中進行(xing)長期保(bao)存。使(shi)用程(cheng)序

降溫盒可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處(chu)理僅供(gong)參考，具(ju)體操作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產品說明(ming)書為(wei)主。將含(han)有1 mL細胞(bao)懸液的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所(suo)有細胞(bao)懸液加(jia)入含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸液加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第二天(tian)換(huan)液並檢查細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如果細胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄去培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤所(suo)有細胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況，若(ruo)細胞(bao)大(da)部分變(bian)圓並(bing)脫(tuo)落，迅速拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將細胞(bao)懸液按1:2比例(li)分到新的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶中，置於(yu)培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生長狀(zhuang)態良(liang)好時(shi)，可進行(xing)細胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去上清(qing)液(ye)，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍，棄盡PBS，進行(xing)細胞(bao)計數。

b、根(gen)據細胞(bao)數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸液，註意凍(dong)存管(guan)做好標識(shi)。將凍(dong)存管(guan)放入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存。記(ji)錄凍(dong)存管(guan)位置以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售的(de)產品：

組織(zhi)過氧化(hua)氫(qing)（HYDROGEN PEROXIDE）活性比色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒

同位(wei)素(su)（PCR產物(wu)）蛋(dan)白(bai)結(jie)合DNA酶足(zu)跡(ji)法(fa)分析(xi)試劑盒

細胞(bao)HHV6（HUMAN HERPESVIRUS 6）病毒

TNF ALPHA蛋白(bai)表(biao)達ELISA定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒

通用(yong)型鹽含量(liang)比(bi)色(se)法定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒

活體細胞(bao)半-7（CASPASE-7）活性原位(wei)熒(ying)光染色檢(jian)測試劑盒

組織(zhi)PDGFRβ激酶活性定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒（A/B/C）

細胞(bao)有絲分裂（指數）流(liu)式細胞(bao)儀檢測(ce)試劑盒

白(bai)細胞(bao)分類染色(se)試劑盒

細胞(bao)長鏈(lian)酮脂(zhi)酰(xian)硫(liu)解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒

石蠟切(qie)片羅丹(dan)寧(ning)（RHODANINE）銅(tong)染色(se)試劑盒

隱(yin)孢(bao)子(zi)蟲(chong)（Cryptosporidium）塗片(pian)免(mian)疫熒(ying)光染色試(shi)劑盒

載玻片細胞(bao)RyR受(shou)體蛋白(bai)表(biao)達熒(ying)光顯(xian)微(wei)鏡檢(jian)測試劑盒

無(wu)脊(ji)椎(zhui)動(dong)物(wu)和(he)昆(kun)蟲(chong)組(zu)織(zhi)基(ji)質金(jin)屬（MMP）總活性熒光定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒

動物(wu)肝(gan)細胞(bao)分離(li)培(pei)養(yang)試(shi)劑盒

早老素(su)蛋白(bai)1+2抗體

鈣(gai)粘(zhan)蛋(dan)白(bai)21抗體

驅動蛋白(bai)家(jia)族(zu)成員1B抗體

JM4蛋白(bai)抗體

細胞(bao)骨(gu)架(jia)蛋白(bai)C端PDLIM1抗體

Z DNA結(jie)合蛋白(bai)抗體

跨(kua)膜(mo)蛋(dan)白(bai)70抗體

COLO206F細胞(bao)APC標記人TCR α/β單克(ke)隆(long)抗體

鋅指蛋(dan)白(bai)780B抗體

三(san)、培(pei)養(yang)註意事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否有漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等現(xian)象，若有上述(shu)現(xian)象 發生請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯系(xi)。

2. 仔細閱讀細胞(bao)說明(ming)書，了解細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息，如細胞(bao)形(xing)態、所(suo)用培(pei)養(yang)基(ji)、血清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若由於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致而導致細胞(bao)出(chu)現(xian)問題，責(ze)任(ren)由 客戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸問題，部(bu)分細胞(bao)由(you)於(yu)溫度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常現(xian)象。觀察(cha)好細胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮細胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重懸 細胞(bao)，並(bing)接種到新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用相(xiang)同條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由於(yu)運輸(shu)的(de)原因(yin)，個別(bie)敏感細胞(bao)會出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情況，請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體情況，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的(de)技術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供(gong)科研使(shi)用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換(huan)用(yong)按照(zhao)說明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新配制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)第壹次傳(chuan)代建議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。