CTX大(da)鼠(shu)腦星(xing)形膠質細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅供科研(yan)研究使(shi)用、不得(de)用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然(ran)後將(jiang)懸液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清，沈澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru)培養液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然(ran)後將(jiang)懸液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放置(zhi)於(yu)凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存(cun)管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入液(ye)氮中(zhong)進行長期(qi)保存(cun)。使(shi)用程序

降(jiang)溫(wen)盒可直接(jie)放入-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培養凍存(cun)處(chu)理(li)僅供參(can)考，具(ju)體(ti)操作(zuo)步驟以隨(sui)貨產品(pin)說明書為主。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的(de)凍存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含適量(liang)培養基(ji)的(de)培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並檢查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳代(dai)培(pei)養。

a、棄去培養上清，用不含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後在顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓並脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回(hui)操作(zuo)臺，輕(qing)敲幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時(shi)，可(ke)進行細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝(zhuang)入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去上清液(ye)，用PBS清洗壹(yi)遍，棄盡PBS，進行細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數量(liang)加(jia)入(ru)無血清細(xi)胞(bao)凍存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意凍存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入液(ye)氮灌(guan)儲存。記錄(lu)凍存(cun)管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取。

三(san)、培養註意事項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後首(shou)先(xian)觀察細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否完好，培養液(ye)是(shi)否有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁等現象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說明書，了解細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形態、所(suo)用培(pei)養基(ji)、血清比(bi)例(li)、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等，確保細(xi)胞(bao)培養條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條件(jian)不壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責(ze)任由(you) 客(ke)戶自(zi)行承擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇烈碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培(pei)養瓶或培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進行培養。

5. 請(qing)客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培養。

6. 建議客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我(wo)司技(ji)術部(bu)溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏感細(xi)胞(bao)會出現不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們聯系，告知細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪直至問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科研(yan)使(shi)用。

8. 備(bei)註：運輸用的(de)培(pei)養基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養基(ji)) 不能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)，請(qing)換用按(an)照說明書細(xi)胞(bao)培 養條件(jian)新配(pei)制的(de)培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳代(dai)建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。

公司(si)正(zheng)在出售的(de)產(chan)品(pin)：

CM-H060人(ren)支(zhi)持(chi)細(xi)胞(bao)培養基(ji)100mL 大(da)鼠(shu)脯酰(xian)羧(suo)肽(tai)酶(mei)(PRCP)ELISA試劑盒 DR-70TM(Human tumor marker DR-70 for lung cancer)  人肺(fei)癌標誌(zhi)物(wu)DR-70 96T

NSG2： 神(shen)經(jing)元特異性(xing)蛋(dan)白(bai)家族(zu)成員(yuan)2抗(kang)體 大(da)鼠(shu)腎上腺嗜(shi)鉻(ge)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao);PC-12 [PC12]

人(ren)脊(ji)髓星(xing)形膠質細(xi)胞(bao)(HA-sp)(1×106) 人腦微血管(guan)內(nei)皮細(xi)胞(bao) Human 大(da)鼠(shu)脯酸羥化酶(PHD)ELISA試劑盒 SP(Mouse Substance P)  小鼠P物(wu)質 96T

NEDD4： 神(shen)經(jing)前(qian)體細(xi)胞(bao)發育(yu)下(xia)調(tiao)蛋(dan)白4抗(kang)體 中(zhong)國(guo)倉鼠(shu)卵(luan)巢(chao)細(xi)胞(bao)K1(亞系克(ke)隆(long));CHO-K1

IL5 Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) IL5 / Ierleukin 5 蛋(dan)白(bai) 大(da)鼠(shu)脯酸羥化酶(PHD)ELISA試劑盒 FSA(Human fetal sulfoslycoprotein antigen)  人胚胎(tai)性(xing)硫(liu)糖蛋白抗(kang)原 96T

ICK： 絲(si)酸/蘇(su)酸蛋白激酶(mei)ICK抗(kang)體 雜(za)交(jiao)瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7

CFSC-2G細(xi)胞(bao)，大(da)鼠(shu)肝(gan)星形細(xi)胞(bao) 7721(7721肝(gan)癌細(xi)胞(bao)) tTA基(ji)因(yin)修(xiu)飾(shi)的(de)小(xiao)鼠(shu)胰(yi)腺癌細(xi)胞(bao)(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6 犬(quan)肌鈣(gai)蛋(dan)白(bai)Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 試劑盒 NKR(Neuromedin B Receptor) 神(shen)經(jing)激肽(tai)B受(shou)體(ti)(抗(kang)原) 0.5mg

ICT1： 肽(tai)酰(xian)tRNA水(shui)解酶ICT1抗(kang)體 TGFBR1 Others Human 人(ren) TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

上(shang)皮細(xi)胞(bao)cDNAHMEpiC cDNA 犬(quan)胱天(tian)蛋(dan)白(bai)酶(mei)3(Casp-3)ELISA 試劑盒 NF-L(Neurofilament triplet L) 低分(fen)子(zi)量(liang)神(shen)經(jing)絲(si)蛋白(抗(kang)原) 0.5mg

IFI27： alpha幹擾素(su)誘(you)導(dao)蛋白(bai)27抗(kang)體 人(ren)巨細(xi)胞(bao)白血病(bing)細(xi)胞(bao)株;Mo7e

CTX大(da)鼠(shu)腦星(xing)形膠質細(xi)胞(bao)RAD51C： 癌和卵(luan)巢(chao)癌易感(gan)基(ji)因(yin)RAD51C抗(kang)體 興(xing)國(guo)鯉(li)尾(wei)鰭(qi)細(xi)胞(bao);XGL

CM-M030小(xiao)鼠(shu)腸(chang)粘(zhan)膜上皮細(xi)胞(bao)培養基(ji)100mL 大(da)鼠(shu)α平滑肌肌動(dong)蛋(dan)白(bai)(α-SMA)ELISA試劑盒 GS(Human Gelsolin)  人凝(ning)溶膠蛋白(bai) 96T

Phospho-RSK3 (Thr353 + Thr356)： 0酸化核糖體蛋白S6激(ji)酶(mei)家族(zu)RSK3抗(kang)體 ACVRL1 Others Rat 大(da)鼠(shu) ALK-1 / ACVRL1 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

角(jiao)質細(xi)胞(bao)培養基(ji)(特定)KM-d 大(da)鼠(shu)α肌動蛋(dan)白(α Actin)ELISA試劑盒 CRP(Human C-Reactive Protein)  人C反應(ying)蛋(dan)白 96T

Phospho-RSK3 (Thr356 + Ser360)： 0酸化核糖體蛋白S6激(ji)酶(mei)家族(zu)RSK3抗(kang)體 786-O(人(ren)腎透(tou)明細(xi)胞(bao)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2