AsPC-1 人(ren)轉移胰腺腺癌細胞

公司(si)產品(pin)僅供(gong)科(ke)研研究使用(yong)、不得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞傳代(dai)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變圓後加(jia)入 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫落，然後將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸，然後按 1:2 比例進行(xing)分(fen)瓶傳代(dai)，最後放(fang)入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱中培(pei)養；

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變圓後加(jia)入培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化，輕(qing)輕吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫落，然後將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並放置(zhi)於(yu)凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍(dong)存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其移入-80℃過夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入液氮中進(jin)行(xing)長期保(bao)存。使(shi)用(yong)程序

降(jiang)溫盒可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下(xia)細胞培(pei)養凍(dong)存處理(li)僅供(gong)參(can)考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨(sui)貨產品(pin)說明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細胞懸液的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹(chui)勻。然後將(jiang)所有(you)細胞懸液加(jia)入含(han)適量(liang)培(pei)養基(ji)的培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過夜(ye)（或將(jiang)細胞懸液加(jia)入10 cm皿(min)中，加(jia)入約8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過夜(ye)）。第二天(tian)換液並檢(jian)查細胞密度。

2) 細胞傳代(dai)：如果細胞密度達 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳代(dai)培(pei)養。

    a、棄(qi)去培(pei)養上清(qing)，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子的PBS潤(run)洗細胞1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使消(xiao)化液(ye)浸潤(run)所有(you)細胞，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而定(ding)），然後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細胞大部分(fen)變圓並脫落(luo)，迅(xun)速拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕打(da)勻後裝(zhuang)入無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹(chui)勻。        

     c、將(jiang)細胞懸液按1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的含8 mL培(pei)養基(ji)的新皿(min)中或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細胞凍(dong)存：待(dai)細胞生長(chang)狀態良(liang)好(hao)時(shi)，可進(jin)行(xing)細胞凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集細胞及細胞培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離心管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞計(ji)數(shu)。

     b、根(gen)據(ju)細胞數(shu)量(liang)加(jia)入無(wu)血清(qing)細胞凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻，每支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做(zuo)好(hao)標識。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉(zhuan)入液氮灌儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位置(zhi)以便下(xia)次拿取(qu)。  

公司(si)正在(zai)出(chu)售的產品(pin)：

LIN7C： LIN7C蛋(dan)白抗(kang)體(ti) MMP9 Others Human 人(ren) MMP-9 / CLG4B 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照)

人(ren)星形(xing)膠(jiao)質(zhi)細胞HA 大鼠(shu)質(zhi)細胞源(yuan)性神經(jing)營(ying)養因(yin)子(GDNF)ELISA試劑(ji)盒 Rabbit IgG/PE 熒光(guang)素(su)PE標記兔(tu)IgG(細胞流式同(tong)型(xing)對(dui)照) 0.1ml

LINGO4： 富(fu)含(han)亮(liang)酸重(zhong)復(fu)序(xu)列(lie)Nogo受體(ti)反(fan)應(ying)蛋(dan)白(bai)4抗(kang)體(ti) 小鼠(shu)骨髓(sui)瘤(liu)細胞;Sp2/0-Ag14

C3H/10T1/2, Clone 8(小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎成纖(xian)維細胞) 5×106cells/瓶×2 人(ren)支(zhi)氣(qi)管(guan)平滑肌(ji)細胞HBSMC 大鼠(shu)質(zhi)膜鈣(gai)ATP酶(mei)(PMCA)ELISA試劑(ji)盒 Rabbit IgG/Cy5 熒光(guang)素(su)Cy5標記兔(tu)IgG(細胞流式同(tong)型(xing)對(dui)照) 0.1ml

LRG1： 富(fu)含(han)亮(liang)酸α2糖(tang)蛋(dan)白抗(kang)體(ti) CL-0017A673(人(ren)橫紋(wen)肌(ji)瘤(liu)細胞)5×106cells/瓶×2

HA tag： HA tag標簽(qian)抗(kang)體(ti) HA Others H9N2 甲型(xing)流感(gan) H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照)

小(xiao)鼠(shu)胰(yi)腺癌細胞(B類);Pan02 人(ren)抗(kang)中(zhong)性粒細胞抗(kang)體(ti)(ANA)ELISA 試劑(ji)盒 EXPB-2 植物(wu)延(yan)展(zhan)素(su)-β(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

HIG1： 缺(que)氧誘導基(ji)因(yin)1蛋白(bai)抗(kang)體(ti) 人(ren)正常(chang)前(qian)列(lie)腺上皮細胞;RWPE-1

DU 145(人(ren)前列(lie)腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0230Tca-8113(人(ren)舌鱗(lin)癌細胞)5×106cells/瓶×2 敘(xu)利亞(ya)倉鼠(shu)細胞系;Syrian Hamster AV12 人(ren)抗(kang)中(zhong)性粒細胞核周抗(kang)體(ti)(pANCA)ELISA 試劑(ji)盒 FAS (Apo-a1; CD95;)(抗(kang)原(yuan)) 載(zai)脂蛋白-a1 0.5mg

HCG alpha(4A8)： 人(ren)絨毛(mao)膜α 亞基(ji)單(dan)抗(kang) 0.1ml

AsPC-1 人(ren)轉移胰腺腺癌細胞EB病(bing)毒轉化的人(ren)B淋巴(ba)細胞;KMY0902 大鼠(shu)堿(jian)性0酸酶(mei)(ALP)ELISA試劑(ji)盒 AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody)  人(ren)抗(kang)染(ran)色體(ti)抗(kang)體(ti) 豹(bao)貓(mao)肺(fei)成纖維樣細胞;LCL4

人(ren)脂肪(fang)間(jian)充質幹細胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105) EC109，人(ren)食(shi)管(guan)癌細胞 Human 大鼠(shu)堿(jian)性0酸酶(mei)(ALP)ELISA 試劑(ji)盒 ABAb(Human anti-brain tissue antibody)  人(ren)抗(kang)腦(nao)組織抗(kang)體(ti) 人(ren)表皮黑(hei)色素(su)細胞-淺色素(su)總RNAHEM-l NA

TNFSF10 Protein Mouse 重(zhong)組小鼠(shu) TNFSF10 / AIL / APO-2L 蛋(dan)白(bai) (aa 118-291, His 標簽(qian)) 大(da)鼠(shu)堿(jian)性0酸酶(mei)(AKP)ELISA試劑(ji)盒 IL-1 Beta  大鼠(shu)白(bai)介素(su)1β 96T

Phospho-PLC beta3 (Ser1105)： 0酸(suan)化0酯酶(mei)Cβ3抗(kang)體(ti) SMYD3 Others Human 人(ren) SMYD3 / ZMYND1 桿(gan)狀病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照)

H1299 人(ren)肺(fei)腺癌細胞 大鼠(shu)堿(jian)性成纖(xian)維細胞生長(chang)因(yin)子9(bFGF-9)ELISA試劑(ji)盒 CH50(Mouse 50% complement hemolysis) 小鼠(shu)血清(qing)總補體 96T

三(san)、培(pei)養註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞後首(shou)先(xian)觀察(cha)細胞瓶是否(fou)完好(hao)，培(pei)養液(ye)是(shi)否有(you)漏液、渾濁(zhuo)等現(xian)象，若(ruo)有上述現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及時(shi)和我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱讀細胞說明(ming)書(shu)，了解(jie)細胞相關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態、所用(yong)培(pei)養基(ji)、血清(qing)比(bi)例、所需(xu) 細胞因(yin)子等，確(que)保(bao)細胞培(pei)養條(tiao)件(jian)壹致，若由於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不壹致而導致細胞出(chu)現(xian)問題(ti)，責(ze)任由 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞瓶表面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞狀態。因(yin)運輸(shu)問題(ti)，部(bu)分(fen)細胞由於(yu)溫(wen)度(du) 變化及劇(ju)烈(lie)碰亡破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀(guan)察好細胞狀態後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可以消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細胞直接混(hun)勻收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細胞，並接種(zhong)到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱中進行(xing)培(pei)養。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養基(ji)用(yong)於(yu)細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議客戶收到(dao)細胞後前(qian) 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張細胞照片(pian)，記錄(lu)細胞狀態，便於(yu)和我(wo)司(si)技(ji)術部溝(gou)通(tong) 交流。由於(yu)運(yun)輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感(gan)細胞會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及時(shi)和我(wo)們聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細胞 的具體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們(men)的技(ji)術人(ren)員跟蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞僅供(gong)科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的培(pei)養基(ji) (灌液培(pei)養基(ji)) 不能(neng)再用(yong)來培(pei)養細胞，請換用(yong)按照說明(ming)書(shu)細胞培(pei) 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制的培(pei)養基(ji)來培(pei)養細胞。     收到(dao)細胞後第壹次(ci)傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。