769-P人(ren)腎(shen)細(xi)胞腺(xian)癌(ai)細(xi)胞

公(gong)司(si)產(chan)品僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

壹、商品介紹：

二、細(xi)胞培養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以下細(xi)胞培養凍(dong)存(cun)處(chu)理僅供(gong)參考，具(ju)體操作(zuo)步驟以隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書(shu)為(wei)主。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞懸液的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有(you)細(xi)胞懸液加(jia)入含(han)適(shi)量培養基(ji)的培養瓶(ping)中(zhong)培養過夜（或將(jiang)細(xi)胞懸液加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養基(ji)，培養過夜）。第(di)二天(tian)換(huan)液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細(xi)胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即可進行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清(qing)，用(yong)不含(han)鈣、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤(run)所有(you)細(xi)胞，將(jiang)培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況(kuang)而定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消化(hua)情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞大(da)部(bu)分變圓並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回操作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養基(ji)終止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸液按(an)1:2比例分到(dao)新的含(han)8 mL培養基(ji)的新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置於培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞生長狀(zhuang)態良(liang)好時，可進行細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培養液，裝(zhuang)入無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根據細(xi)胞數(shu)量加(jia)入無血(xue)清(qing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支凍存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞懸液，註意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好標識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入液氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記錄凍存(cun)管(guan)位(wei)置以便(bian)下次拿取(qu)。

三(san)、培養註意(yi)事(shi)項(xiang)

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完好，培養液是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁等現(xian)象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請及時和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說(shuo)明(ming)書，了(le)解細(xi)胞相(xiang)關信息，如細(xi)胞形(xing)態、所(suo)用(yong)培養基(ji)、血清比例、所需 細(xi)胞因子等，確(que)保細(xi)胞培養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於培養條(tiao)件(jian)不壹致(zhi)而導(dao)致細(xi)胞出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態。因運輸問題(ti)，部分(fen)細(xi)胞由(you)於(yu)溫度 變化(hua)及劇(ju)烈碰(peng)亡破碎形(xing)成(cheng)碎片，是(shi)正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞可以消化(hua)，懸浮細(xi)胞直接(jie)混(hun)勻收(shou)集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的培養基(ji)重懸 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新的培養瓶(ping)或(huo)培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條(tiao)件(jian)的培養基(ji)用(yong)於細(xi)胞培養。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照(zhao)片，記錄細(xi)胞狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我司(si)技術(shu)部(bu)溝通 交流(liu)。由於運輸的原因，個別敏感細(xi)胞會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及時和(he)我(wo)們聯系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞 的具(ju)體情(qing)況，以便(bian)我(wo)們的技術(shu)人(ren)員跟蹤回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題(ti)解決。

7. 該細(xi)胞僅供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備註：運輸用(yong)的培養基(ji) (灌液培養基(ji)) 不能再(zai)用(yong)來(lai)培養細(xi)胞，請換用(yong)按照(zhao)說明(ming)書細(xi)胞培 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制的培養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第(di)壹次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售(shou)的產(chan)品：

A3人T淋(lin)巴細(xi)胞白血病細(xi)胞 The A3 of human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠腫(zhong)瘤壞死(si)因子相(xiang)關雕亡誘導(dao)配體受體4(AIL-R4)ELISA試劑(ji)盒(he) rHIL-1Ra/Cy3 熒光素(su)Cy3標記1受體拮(jie)抗劑 0.1ml

LLGL2： 相(xiang)似抑制基(ji)因HUGL抗體 CD2 Others Human 人 CD2 人細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao))

人肺(fei)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞HPF 大(da)鼠腫(zhong)瘤壞死(si)因子相(xiang)關雕亡誘導(dao)配體受體3(AIL-R3)ELISA試劑(ji)盒(he) KLH/Cy3 熒光素(su)Cy3標記血藍蛋白 0.1ml

LAMTOR1： LAMTOR1蛋白抗體 小(xiao)鼠胚(pei)胎成(cheng)骨細(xi)胞前(qian)體(ti)細(xi)胞;MC3T3-E1

B16-F1(小(xiao)鼠黑(hei)色(se)素(su)瘤(liu)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren)星形(xing)膠(jiao)質細(xi)胞HA 大(da)鼠腫(zhong)瘤壞死(si)因子相(xiang)關雕亡誘導(dao)配體受體1(AIL-R1)ELISA試劑(ji)盒(he) OVA (Ovalbumin)/Cy3 熒光素(su)Cy3標記雞卵(luan)白蛋白 0.1ml

Hurt-78細(xi)胞，人(ren)T細(xi)胞淋(lin)巴(ba)瘤 小(xiao)鼠胚(pei)胎成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞,3T3-swiss albino細(xi)胞 人(ren)肺(fei)泡上(shang)皮細(xi)胞cDNAHPAEpiC cDNA 人(ren)可溶性轉(zhuan)鐵(tie)蛋白受體(sTfR)ELISA 試劑(ji)盒(he) DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)N terminal 雙(shuang)鏈RNA腺(xian)苷酸脫(tuo)基(ji)酶(mei)抗原(N端) 0.5mg

GNPTAB： 溶酶(mei)體(ti)累積病相(xiang)關蛋白/口吃(chi)相(xiang)關蛋白抗體 PRLR Others Mouse 小(xiao)鼠 PRLR / Prolactin Receptor 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao))

正常大(da)鼠腎(shen)細(xi)胞;NRK 人(ren)可溶性腫(zhong)瘤(liu)壞(huai)死因子相(xiang)關雕亡誘導(dao)配體(sAIL)ELISA 試劑(ji)盒(he) DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 雙(shuang)鏈RNA腺(xian)苷酸脫(tuo)基(ji)酶(mei)抗原 0.5mg

GSK3 Alpha + Beta： 糖(tang)原合(he)酶(mei)激(ji)酶(mei)3α+β抗體 人胚腎(shen)細(xi)胞;2V6.11

COS-1(非洲(zhou)綠猴(hou)SV40轉化的腎(shen)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0174NRK-52E(大(da)鼠腎(shen)小(xiao)管(guan)導(dao)管(guan)上(shang)皮細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠嗜(shi)堿性粒細(xi)胞性(xing)白血病細(xi)胞;RBL-2H3 人(ren)可溶性腫(zhong)瘤(liu)壞(huai)死因子α受體(sTNFαR)ELISA 試劑(ji)盒(he) MMP9 基(ji)質金(jin)屬蛋白酶(mei)9 0.5mg

769-P人腎(shen)細(xi)胞腺(xian)癌(ai)細(xi)胞PKA C alpha+beta： 蛋白激酶(mei)C抗體 JAR細(xi)胞，胚(pei)絨(rong)毛癌(ai)細(xi)胞 人(ren)肺(fei)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞,LTPEP-a-2細(xi)胞 KM3, 人(ren)多(duo)發性(xing)骨髓瘤細(xi)胞

LIF Others Mouse 小(xiao)鼠 LIF 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 大(da)鼠金(jin)屬硫(liu)蛋白(MT)ELISA試劑(ji)盒(he) SLE(Human systemic lupus erythematosus)  人系統(tong)性紅斑(ban)狼瘡 96T

PHF-tau： 成(cheng)對螺旋(xuan)細(xi)絲(si)蛋白抗體 CL-0395NCI-H2227(人小(xiao)細(xi)胞肺(fei)癌(ai)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2

SW620人結(jie)腸癌(ai)細(xi)胞 SW620 human colon cancer cells L-15+10%FBS 大(da)鼠解(jie)整合(he)素(su)樣金(jin)屬蛋白酶(mei)9(ADAM9)ELISA試劑(ji)盒(he) Glp-1  大(da)鼠胰(yi)高(gao)血(xue)糖(tang)素(su)樣(yang)肽(tai)1 96T

PITX3： 炎癥因子3抗體 TNFSF9 Others Mouse 小(xiao)鼠 4-1BBL / TNFSF9 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao))