同型(xing)半ELISA檢測(ce)試劑盒(he)
操作步(bu)驟(zhou):
1. 使用(yong)前,將(jiang)所有(you)試(shi)劑充(chong)分(fen)混勻(yun)。不(bu)要使(shi)液體(ti)產(chan)生大(da)量的(de)泡沫,以(yi)免(mian)加樣(yang)時加入大(da)量的(de)氣(qi)泡,產(chan)生加(jia)樣(yang)上的誤差(cha)。
2. 根(gen)據(ju)待(dai)測(ce)樣品(pin)數(shu)量加(jia)上標(biao)準(zhun)品的(de)數(shu)量決(jue)定所需的(de)板條數。每個(ge)標(biao)準(zhun)品和(he)空白(bai)孔建議(yi)做復孔。每個(ge)樣(yang)品根(gen)據(ju)自(zi)己(ji)的數(shu)量來定(ding),能使用(yong)復(fu)孔的盡(jin)量做(zuo)復孔。
3. 加入(ru)稀(xi)釋好(hao)後(hou)的標(biao)準(zhun)品50ul於(yu)反(fan)應孔、加入(ru)待(dai)測(ce)樣品(pin)50ul於(yu)反(fan)應孔內。立即(ji)加(jia)入(ru)50ul的(de)標(biao)記(ji)的抗(kang)體(ti)。蓋(gai)上膜板,輕輕振蕩混勻(yun),37℃溫(wen)育45分(fen)鐘。
4. 甩(shuai)去孔內液體(ti),每孔加滿洗滌液,振蕩30秒(miao),甩(shuai)去洗滌液,用(yong)吸(xi)水紙(zhi)拍幹(gan)。重復(fu)此(ci)操作4次(ci)。如果(guo)用(yong)洗板機(ji)洗滌,洗滌次(ci)數增(zeng)加(jia)壹次。
5. 每孔加入(ru)100ul的親(qin)和(he)鏈(lian)酶素-HRP,輕(qing)輕振蕩混勻(yun),37℃溫(wen)育30分(fen)鐘。
6. 甩(shuai)去孔內液體(ti),每孔加滿洗滌液,振蕩30秒(miao),甩(shuai)去洗滌液,用(yong)吸(xi)水紙(zhi)拍幹(gan)。重復(fu)此(ci)操作4次(ci)。如果(guo)用(yong)洗板機(ji)洗滌,洗滌次(ci)數增(zeng)加(jia)壹次。
7. 每孔加入(ru)底(di)物(wu)A、B各(ge)50ul,輕(qing)輕振蕩混勻(yun),37℃溫(wen)育5分(fen)鐘。避(bi)免(mian)光照。
8. 取(qu)出(chu)酶標(biao)板,迅速加入50ul終止(zhi)液,加(jia)入終止(zhi)液後(hou)應立即(ji)測(ce)定結(jie)果(guo)。
9. 在(zai)450nm波長(chang)處(chu)測(ce)定各(ge)孔的OD值。