A375人惡(e)性黑(hei)色(se)素(su)瘤細胞(bao)

公(gong)司(si)產品僅供(gong)科研研(yan)究使(shi)用(yong)、不得用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

壹、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

二、細胞(bao)培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下細胞(bao)培養(yang)凍(dong)存(cun)處理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以隨貨產品說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中迅速搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培養(yang)基(ji)混合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹勻。然後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)含(han)適量培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶中培養(yang)過(guo)夜（或將細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查(zha)細胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳代：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即(ji)可進行傳代培養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上(shang)清，用(yong)不含鈣、鎂離子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中，使(shi)消化液(ye)浸潤所有(you)細(xi)胞(bao)，將培養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化情(qing)況，若細胞(bao)大(da)部分變圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速拿回(hui)操(cao)作臺，輕敲(qiao)幾下培養(yang)瓶後加2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離心管(guan)中，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分到新(xin)的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新(xin)皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良好時(shi)，可(ke)進行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集細胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量加入(ru)無(wu)血(xue)清細胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好標(biao)識(shi)。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以便(bian)下次拿(na)取(qu)。

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事項(xiang)

1. 收到細(xi)胞(bao)後首先(xian)觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶是否(fou)完(wan)好，培養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏液(ye)、渾濁等現象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細閱(yue)讀細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關信(xin)息，如(ru)細胞(bao)形態(tai)、所用(yong)培養(yang)基(ji)、血(xue)清比例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因子等，確(que)保(bao)細胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出現(xian)問(wen)題，責任由(you) 客(ke)戶自行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精擦(ca)拭細胞(bao)瓶表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細胞(bao)由於(yu)溫度(du) 變化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰亡破碎形成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀態後(hou)，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可以消化，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻收集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細胞(bao)，並接(jie)種到(dao)新(xin)的培養(yang)瓶或培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相同條(tiao)件(jian)的培養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客戶(hu)收到(dao)細(xi)胞(bao)後前 3 天(tian)各(ge)拍幾張細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝(gou)通 交流(liu)。由於(yu)運(yun)輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏感(gan)細(xi)胞(bao)會出現(xian)不穩定的情(qing)況，請及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況，以便(bian)我們(men)的技術(shu)人(ren)員跟蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科研使(shi)用(yong)。

8. 備註：運輸(shu)用(yong)的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養(yang)基(ji)) 不能再用(yong)來培養(yang)細(xi)胞(bao)，請換(huan)用(yong)按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配(pei)制的培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後第(di)壹次(ci)傳代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正在(zai)出售的產品：

人真(zhen)皮(pi)成(cheng)纖(xian)維(wei)母細胞(bao)-胎兒(er)HDF-f 大(da)鼠腫瘤壞死(si)因(yin)子(zi)α(TNFα)ELISA試劑盒 Insulin Protein/Cy3 熒(ying)光素(su)Cy3標記(ji)豬(zhu)胰(yi)島(dao)素(su)蛋(dan)白(bai) 0.1ml

LAMR1(CT)： 層(ceng)粘(zhan)連(lian)蛋(dan)白(bai)受(shou)體(ti)1抗(kang)體(ti) 小鼠血(xue)細(xi)胞(bao);WEHI-3 [WEHI3]

Beta-TC-6(小鼠胰(yi)島(dao)素(su)瘤胰(yi)島(dao)β細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 人淋(lin)巴(ba)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao)HLF 大(da)鼠腫瘤壞死(si)因(yin)子(zi)α(TNF-α)ELISA 試劑盒 Mouse IgG (免疫(yi)親(qin)和化(hua)) 小(xiao)鼠(shu)IgG 1mg

LAMR1： 層(ceng)粘(zhan)連(lian)蛋(dan)白(bai)受(shou)體(ti)1抗(kang)體(ti) CL-0041BT-549(人管(guan)癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2

FGF14 Protein Human 重組(zu)人 FGF14 / SCA27 蛋(dan)白(bai) (isoform 1B) 大(da)鼠腫瘤壞死(si)因(yin)子(zi)(配(pei)體)超(chao)家(jia)族(zu)成(cheng)員14(TNFSF14)ELISA試劑盒 Mouse IgM 小(xiao)鼠(shu)IgM (免疫(yi)親(qin)和化(hua)) 1mg

Walker氏癌(ai)肉(rou)瘤256瘤株;W256 人(ren)可溶(rong)性白(bai)細(xi)胞(bao)分化抗(kang)原(yuan)30配(pei)體(sCD30L)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 ADRA2 peptide 能(neng)受(shou)體2抗(kang)原(yuan) 0.5mg

SCHAD： 短鏈L-3羥(qiang)烷(wan)基(ji)脫(tuo)氫(qing)酶(mei)抗(kang)體(ti) 人(ren)胚(pei)胎(tai)，皮(pi)膚，肌肉(rou);M-7

Daudi(人淋巴(ba)瘤細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 CL-0206SGC7901(人胃(wei)癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 中國(guo)倉鼠(shu)卵巢細胞(bao);CHO 人可溶(rong)性白(bai)細(xi)胞(bao)分化抗(kang)原(yuan)28(sCD28)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促(cu)腎(shen)上(shang)腺(xian)皮(pi)質激(ji)素(su)釋放(fang)因子(zi) 0.5mg

HDAC9： 組(zu)蛋(dan)白(bai)去(qu)乙(yi)酰(xian)化(hua)酶(mei)9抗(kang)體(ti) SV40T轉化的人(ren)胚(pei)腎(shen)細胞(bao);293T

PC-3M-IE8(人前列腺癌(ai)高(gao)轉(zhuan)移細(xi)胞(bao)株) 5×106cells/瓶×2 人可(ke)溶(rong)性白(bai)細(xi)胞(bao)分化抗(kang)原(yuan)21(CR2/sCD21)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 CT (Calcitonin ) 降鈣素(su)(抗原(yuan)) 0.5mg

A375人惡(e)性黑(hei)色(se)素(su)瘤細胞(bao)PCDHA2： 原(yuan)鈣(gai)粘(zhan)附蛋(dan)白(bai)α2抗(kang)體(ti) CHRF細(xi)胞(bao)，人巨核(he)細(xi)胞(bao)白血(xue)病 人肺(fei)癌(ai)細(xi)胞(bao)系(未(wei)分化),Calu-6細(xi)胞(bao) 5637, 人膀胱(guang)癌(ai)細(xi)胞(bao)

TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠膠(jiao)質細(xi)胞(bao)源性神經營養(yang)因子(zi)(GDNF)ELISA試劑(ji)盒 VB6  大(da)鼠維(wei)生素(su)B6 96T

PAX4： 配(pei)對(dui)盒同(tong)源(yuan)基(ji)因(yin)4抗體 CL-0354HFSF(人胚(pei)胎(tai)眼(yan)鞏膜(mo)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao))5×106cells/瓶×2

LS 174T人結(jie)腸(chang)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao) LS 174T human colon adenocarcinoma cells DMEM培養(yang)基(ji)+10%FBS 大(da)鼠膠(jiao)質細(xi)胞(bao)系來源(yuan)的神經營養(yang)因子(zi)(GDNF)ELISA試劑(ji)盒 aGT(Mouse angiotensinogen) 小(xiao)鼠(shu)血(xue)管(guan)緊張(zhang)素(su)原(yuan) 96T

PR3： 白細胞(bao)蛋(dan)白(bai)酶(mei)3抗(kang)體(ti) HA Others H1N1 甲型(xing)流(liu)感(gan) H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血(xue)凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))