HCC 38人(ren)乳腺(xian)導(dao)管癌細(xi)胞

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床診斷(duan)！

壹、商品(pin)介紹：

二(er)、細胞培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下細(xi)胞培(pei)養(yang)凍存(cun)處(chu)理僅供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟以隨貨(huo)產品(pin)說明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將含有1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍存(cun)管在 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基混合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下離(li)心3 min，棄(qi)去上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)含適量(liang)培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將細(xi)胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第二(er)天(tian)換液並檢查(zha)細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳代：如果(guo)細(xi)胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳代培(pei)養(yang)。

    a、棄去培(pei)養(yang)上清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細胞1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸潤(run)所(suo)有細胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若細(xi)胞大(da)部(bu)分變圓(yuan)並脫落，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻(yun)。        

     c、將細胞懸(xuan)液按1:2比(bi)例分到(dao)新的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新皿(min)中或(huo)者瓶中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍存(cun)：待細(xi)胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好時(shi)，可進行細胞凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養(yang)液，裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心4 min，棄(qi)去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄盡(jin)PBS，進行細胞計(ji)數(shu)。

     b、根據(ju)細(xi)胞數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞凍存(cun)液，使細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存(cun)管凍存(cun)1mL細(xi)胞懸(xuan)液，註意(yi)凍存(cun)管做好標(biao)識。將(jiang)凍存(cun)管放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管位置(zhi)以便(bian)下(xia)次拿取(qu)。  

三、培(pei)養(yang)註意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞後(hou)首(shou)先觀(guan)察細(xi)胞瓶是否完好，培(pei)養(yang)液是否有漏液、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若有上述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生請(qing)及(ji)時和(he)我們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細(xi)胞說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞相(xiang)關(guan)信(xin)息，如(ru)細胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基、血(xue)清(qing)比(bi)例、所(suo)需 細(xi)胞因子等(deng)，確保細(xi)胞培(pei)養(yang)條件(jian)壹致，若由(you)於培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致細胞出現(xian)問題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精擦(ca)拭(shi)細胞瓶表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運輸問題(ti)，部(bu)分細(xi)胞由(you)於溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈碰(peng)亡破(po)碎(sui)形成(cheng)碎片(pian)，是正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細胞直接混勻(yun)收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基重(zhong)懸 細(xi)胞，並接種到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相同(tong)條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用(yong)於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收到(dao)細胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片(pian)，記錄細胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我司技(ji)術(shu)部(bu)溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於運輸的(de)原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞會(hui)出現(xian)不(bu)穩定的(de)情況(kuang)，請(qing)及(ji)時和(he)我們聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體情(qing)況，以便(bian)我們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪(fang)直至問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該細(xi)胞僅供(gong)科(ke)研(yan)使用(yong)。

8. 備註：運輸用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來培(pei)養(yang)細胞，請(qing)換(huan)用(yong)按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞培(pei) 養(yang)條件(jian)新配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基來培(pei)養(yang)細胞。     收到(dao)細胞後(hou)第(di)壹次傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正在出售的(de)產品(pin)：

LLC-PK1豬腎近(jin)曲(qu)小管上皮細胞 LLC-PK1 porcine kidney proximal tubular epithelial cells M199+3% FBS/DMEM+F12+12%FBS 大(da)鼠血(xue)管生成(cheng)素樣(yang)蛋(dan)白1(ANGPTL1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) GH-RF(Human growth hormone relasing factor)  人(ren)生(sheng)長激素(su)釋(shi)放因子 96T

MAGEA12： 黑色(se)素(su)瘤相(xiang)關(guan)抗(kang)原(yuan)12抗體 ICOSLG Others Mouse 小鼠 B7-H2 / CD275 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

C6, 大(da)鼠腦膠質(zhi)瘤細(xi)胞 大(da)鼠血(xue)管生成(cheng)素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑(ji)盒(he) BACE2  大(da)鼠β位澱(dian)粉(fen)樣(yang)前(qian)體(ti)蛋(dan)白裂解(jie)酶(mei)2 96T

MAGEA2： 黑色(se)素(su)瘤相(xiang)關(guan)抗(kang)原(yuan)2抗體 KM小鼠子瘤株(zhu);U27

MDA-MB-468-06(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 Y1(腎上腺(xian)皮質細(xi)胞) 大(da)鼠血(xue)管生成(cheng)素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑(ji)盒(he) Mouse c-fos  小鼠c-fos 96T

Phospho-Histone H3(Thr3)： 0酸化(hua)組蛋(dan)白H3抗(kang)體(ti) F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

人肺大(da)動脈(mai)平(ping)滑肌細胞培(pei)養(yang)基 100mL 人胱天(tian)蛋(dan)白酶(mei)12(Casp-12)ELISA 試劑(ji)盒(he) Glu-Glu Tag peptide Glu-Glu Tag多(duo)肽(tai)蛋(dan)白 0.5mg

HPRT： 次0酸核(he)糖基轉(zhuan)移(yi)酶(mei)1抗體(ti) 家(jia)豬皮膚細(xi)胞;SSC-S1 癌(ai)細(xi)胞，ZR-75-1細(xi)胞 NS1細(xi)胞，小鼠骨髓(sui)瘤細(xi)胞

SDC1 Others Rat 大(da)鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 人(ren)(Coronaviruses IgG)ELISA 試劑(ji)盒(he) CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 環核(he)苷酸(suan)陽(yang)離(li)子通(tong)道(dao)蛋(dan)白α2抗(kang)原(yuan) 0.5mg

Histone H3 (acetyl K9)： 乙酰化(hua)組蛋(dan)白H3抗(kang)體(ti) CL-0162MS1(小鼠胰(yi)島內皮細胞)5×106cells/瓶×2

HCC 38人乳腺(xian)導(dao)管癌細(xi)胞IGFBP7 Others Human 人 IGFBP7 / IBP-7 人細胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠幹(gan)細(xi)胞因子/肥(fei)大(da)細(xi)胞生(sheng)長(chang)因子(SCF/MGF)ELISA 試劑(ji)盒(he) cAMP  大(da)鼠環0酸腺(xian)苷 96T

APRIN： 雄(xiong)激(ji)素誘(you)導(dao)增殖抑制蛋(dan)白抗(kang)體(ti) CM-R037大(da)鼠小腸(chang)隱窩(wo)上皮細胞培(pei)養(yang)基100mL

BT-549人管癌細(xi)胞 BT-549 human breast duct carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠幹(gan)細(xi)胞因子(SCF)ELISA試劑(ji)盒(he) LP Ag(Human Legionella pneumophila antigen)  人(ren)軍團菌抗(kang)原(yuan) 96T

Phosphoserine： 0酸化(hua)絲(si)酸(suan)抗(kang)體(ti) MICB Others Human 人(ren) MICB 人細胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

C3H/An小鼠結締(di)組織細胞(L929-TK-);LTK- 大(da)鼠幹(gan)細(xi)胞生(sheng)長(chang)因子(SCF)ELISA試劑(ji)盒(he) Human colicin  人(ren)大(da)腸(chang)菌素(su) 96T