HeLa.S3人(ren)宮(gong)頸(jing)癌(ai)細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供科研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不(bu)得用於臨床(chuang)診斷！

二、細胞(bao)培養操作

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培養凍(dong)存處理(li)僅(jin)供參考(kao)，具體(ti)操作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培養基(ji)混(hun)合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後吹勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所(suo)有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培養基(ji)的培養瓶(ping)中(zhong)培養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二天換(huan)液並檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳代(dai)培養。

    a、棄(qi)去培養上(shang)清(qing)，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。        

    b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶(ping)置於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後在顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大(da)部分變(bian)圓(yuan)並脫落，迅速(su)拿(na)回操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下(xia)培養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養基(ji)終止(zhi)消化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養液(ye)後吹勻(yun)。        

     c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到新的(de)含(han)8 mL培養基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集(ji)細胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計數(shu)。

     b、根據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無血清細(xi)胞(bao)凍(dong)存液，使(shi)細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標識。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存。記錄(lu)凍存管(guan)位(wei)置以便(bian)下(xia)次拿(na)取(qu)。  

三(san)、培養註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收到細胞(bao)後首先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好(hao)，培養液(ye)是否(fou)有漏液、渾濁等(deng)現(xian)象，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所用(yong)培養基(ji)、血清比(bi)例(li)、所需(xu) 細胞(bao)因(yin)子(zi)等，確(que)保細(xi)胞(bao)培養條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由於培養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責任(ren)由 客戶(hu)自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問題(ti)，部分細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈碰亡破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的(de)培養基(ji)重懸(xuan) 細胞(bao)，並接種(zhong)到新的(de)培養瓶(ping)或(huo)培養皿(min)中(zhong)，置於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相同(tong)條件(jian)的培養基(ji)用於(yu)細胞(bao)培養。

6. 建(jian)議客戶收到細胞(bao)後前(qian) 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部溝通(tong) 交流(liu)。由於運(yun)輸的原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏感細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情況(kuang)，請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體情況(kuang)，以便(bian)我(wo)們(men)的技(ji)術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤回訪直(zhi)至(zhi)問題(ti)解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使(shi)用。

8. 備(bei)註：運輸用的(de)培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不能再用來培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條(tiao)件新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培養基(ji)來培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後第壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司(si)正(zheng)在出(chu)售的產品(pin)：

MN-c, 小鼠(shu)皮質(zhi)神經(jing)元 大(da)鼠(shu)血管(guan)緊(jin)張(zhang)素Ⅰ(AngⅠ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) TG mouse  小鼠(shu)甘油三(san)酯 96T

Phospho-Mst1(Thr183)： 0酸(suan)化(hua)蛋白激酶(mei)MST1抗(kang)體 KM小鼠(shu)未分(fen)化(hua)神經(jing)膠(jiao)質瘤瘤株(zhu);B22

NCI-H209(人小細(xi)胞(bao)肺(fei)癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 MRC-5(胚(pei)肺細胞(bao)) 大(da)鼠(shu)血管(guan)緊(jin)張(zhang)素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) valosin-containing protein kit/VCP (human) 人(ren)含(han)纈(xie)酪肽蛋白 96T

MRP9： 多(duo)藥(yao)耐(nai)藥(yao)相(xiang)關蛋白9抗(kang)體 豬(zhu)細(xi)胞(bao);ST

IFNB1 Protein Human 重組人(ren) Ierferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白 (Fc 標簽) 大(da)鼠(shu)血管(guan)緊(jin)張(zhang)素1-7(Ang1-7)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) sCD28(human soluble cluster of differentiation 28)  人(ren)可(ke)溶(rong)性CD28 96T

HIC2： 異(yi)常(chang)甲基(ji)化(hua)蛋白2抗(kang)體 CL-0090Hacat(人(ren)永生(sheng)化(hua)角質形(xing)成細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

MuM-2C細胞(bao)， 人(ren)眼(yan)脈(mai)絡(luo)黑(hei)色(se)素瘤細胞(bao) 赭(zhe)綠(lv)青黴 小鼠(shu)成纖(xian)維細胞(bao);φ2 人(ren)幹(gan)擾素α2a(I)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) DPPA2 (developmental pluripotency associated gene2) 多(duo)能發(fa)育(yu)相關(guan)基因(yin)2抗(kang)原 0.5mg

HIF Prolyl Hydroxylases： 缺(que)氧(yang)誘(you)導(dao)因(yin)子(zi)脯酰(xian)羥(qiang)化(hua)酶(mei)4抗(kang)體 THSD1 Others Mouse 小鼠(shu) THSD1 / TMTSP 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao))

水(shui)貂(diao)肺(fei)上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao);Mv.1.Lu(NBL-7) 人(ren)肝(gan)脂酶(mei)(HL)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) DR4/APO2/TRAILR1 (Death receptor 4) 死亡受體(ti)4抗(kang)原 0.5mg

HERV-FRD： 人內源(yuan)性逆轉錄病(bing)毒膜(mo)糖(tang)蛋白2抗(kang)體 EB病(bing)毒(du)轉化(hua)的人(ren)B淋(lin)巴細胞(bao)(彜(yi)族(zu));KM934

HeLa.S3人宮(gong)頸(jing)癌(ai)細(xi)胞(bao)PRDX5+PRDX6： 過氧化(hua)還(hai)原(yuan)酶(mei)5/6抗(kang)體 LILRB1 Others Human 人(ren) LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao))

ME-180 人子宮(gong)頸(jing)表(biao)皮癌細胞(bao) 大(da)鼠(shu)鈣(gai)調(tiao)結合蛋白(CALD)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) MV IgM(Human measlesvirus IgM)  人(ren)麻疹(zhen)病(bing)毒(du)IgM 96T

PRDX1： 過氧化(hua)還(hai)原(yuan)酶(mei)1抗(kang)體 Ca Ski細(xi)胞(bao)，人(ren)小腸(chang)頸(jing)部表(biao)皮樣癌細胞(bao) 人(ren)癌(ai)細胞(bao),ZR75-1細(xi)胞(bao) 狗(gou)間充(chong)質幹(gan)細胞(bao)-脂(zhi)肪(fang)DMSC-ad

RET Others Human 人 RET Kinase 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao)) 大(da)鼠(shu)鈣(gai)調(tiao)蛋白依賴性蛋白激酶(mei)激(ji)酶(mei)(CaMKK)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Cox V-IgM(Human Coxsackie virus IgM)  人(ren)柯(ke)薩(sa)奇病(bing)毒IgM 96T

PNMT： 胺甲基(ji)轉移酶(mei)抗(kang)體 CM-H093人(ren)顱(lu)蓋(gai)造骨細胞(bao)培養基(ji)100mL