HL 60（hl-60）人(ren)早(zao)幼(you)粒白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產(chan)品僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)、不得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處(chu)理僅供(gong)參考，具體(ti)操作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產(chan)品說(shuo)明(ming)書為主。將含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸液的(de)凍(dong)存管在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將(jiang)所有細(xi)胞(bao)懸液加入含適量培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液加入10 cm皿中(zhong)，加入約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二(er)天換(huan)液並(bing)檢查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

    a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上清(qing)，用(yong)不含鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次。        

    b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而(er)定），然後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓並(bing)脫落，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操作臺，輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止消(xiao)化。輕輕打勻後(hou)裝(zhuang)入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。        

     c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液按1:2比(bi)例(li)分(fen)到新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新皿中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用(yong)PBS清洗壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數。

     b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量加入無血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存液，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混勻，每(mei)支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註(zhu)意凍(dong)存管做(zuo)好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存管放(fang)入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄凍(dong)存管位(wei)置以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取(qu)。  

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培(pei)養(yang)液是(shi)否(fou)有漏液、渾(hun)濁(zhuo)等現象，若(ruo)有上述現象 發(fa)生請及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息，如細(xi)胞(bao)形態、所用(yong)培(pei)養(yang)基、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所需 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等，確(que)保細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培(pei)養(yang)條件(jian)不壹(yi)致而導致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現問題，責(ze)任由 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運輸(shu)問題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於(yu)溫度 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正常現象。觀察好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的(de)培(pei)養(yang)基重懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用(yong)於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部(bu)溝通(tong) 交流(liu)。由於(yu)運輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現不穩定的(de)情況，請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情況，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪直至(zhi)問題解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件(jian)新配制的(de)培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公(gong)司正在出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品：

人腦(nao)微血(xue)管內(nei)皮細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)信(xin)號轉(zhuan)導分(fen)子(zi)7(Smad7)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 sTNF AlphaR(Human soluble Tumor Necrosis Factor Alphareceptor)  人(ren)可溶(rong)性(xing)壞死因(yin)子(zi)α受體 96T

MICB： MHC I類鏈相(xiang)關(guan)蛋(dan)白B 0.1ml

Rhesus antibody Rh EST1A 端(duan)粒酶結(jie)合蛋(dan)白EST1A抗(kang)體 小鼠T淋巴瘤(liu)細(xi)胞(bao)(雞(ji)OVA基(ji)因(yin)修(xiu)飾);E.G7-OVA

NCI-H2452(人間皮瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 L1210(白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao)) 大(da)鼠(shu)信(xin)號轉(zhuan)導分(fen)子(zi)1(Smad1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 GnRHR  大(da)鼠釋(shi)放激素受體 96T

MLC1： 膜(mo)蛋(dan)白MLC1抗(kang)體 犬腎細(xi)胞(bao);MDCK(NBL-2)

TE671 subline No.2細(xi)胞(bao)，人(ren)橫(heng)紋肌(ji)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao) 化(hua)膿(nong)性(xing)鏈球(qiu)菌 轉(zhuan)PYTL基因(yin)小(xiao)鼠支持(chi)細(xi)胞(bao);15P-1 人(ren)附(fu)睪蛋(dan)白4(HE-4)ELISA試(shi)劑(ji)盒 EPOR peptide 紅細(xi)胞(bao)生(sheng)成(cheng)素(su)受體抗原(yuan) 0.5mg

HECT E3 ubiquitin ligase： HECT E3泛(fan)素(su)鏈接(jie)酶抗(kang)體 JAG1 Others Human 人 JAG1 / JAGL1 / CD339 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))

兔(tu)主動脈(mai)平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao);CCC-SMC-2 人(ren)封(feng)閉(bi)抗體(BA)ELISA 試劑(ji)盒 phospho-ERK1/MAPK-1/2(pThr183 + pTyr185) 0酸化原活(huo)化(hua)蛋(dan)白激(ji)酶1/2抗(kang)原 0.5mg

HDAC11： 組蛋(dan)白去(qu)乙酰(xian)化酶11抗(kang)體 EB病毒(du)轉(zhuan)化的(de)人(ren)B淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao);KM933

LS-174T(人結(jie)腸(chang)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren) PRNP / Prion 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao)) 人(ren)風(feng)疹病毒(du)抗體(ti)(RV-Ab)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原(yuan)活(huo)化(hua)蛋(dan)白激(ji)酶抗(kang)原 0.5mg

HL 60（hl-60）人早(zao)幼粒白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao)CD79B Others Mouse 小鼠(shu) CD79B / B29 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao)) 大(da)鼠(shu)分(fen)泌型(xing)卷(juan)曲(qu)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白1(SFRP1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 CRF(Human corticotropin-releasing factor)  人(ren)促腎上(shang)腺皮質激素釋(shi)放(fang)因(yin)子(zi) 96T

PKR： 蛋(dan)白激(ji)酶R抗(kang)體 CM-H053人子(zi)宮(gong)平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基100mL

Calu-1人肺癌(ai)細(xi)胞(bao) Calu-1 human lung cancer cells McCOY's 5A+10%FBS 大(da)鼠(shu)肺炎(yan)病(bing)毒(du)抗體(ti)(PV-Ab)ELISA試(shi)劑(ji)盒 C-Peptide  大(da)鼠C肽 96T

Pancreatic Lipase： 胰(yi)脂(zhi)肪(fang)酶抗(kang)體 KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))

TNFa轉(zhuan)染耐VP16絨癌(ai)細(xi)胞(bao);JEG-3-VP16-TNFa 大(da)鼠(shu)肺表(biao)面(mian)活(huo)性(xing)物質(zhi)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白D(SP-D)ELISA試(shi)劑(ji)盒 dDAVP(Human/1-desamino-8-D-arginine vasopressin)  人(ren)去加壓素/1-去(qu)基(ji)-8-右旋-精(jing)酸加壓素 96T