Ishikawa人(ren)子(zi)宮(gong)內膜癌細(xi)胞(bao)

公(gong)司產品僅供科(ke)研研究使(shi)用、不得用於臨床(chuang)診斷！

二、細(xi)胞(bao)培養操作

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培養凍(dong)存處理(li)僅供參考(kao)，具(ju)體操作步驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產品說明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培養基混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下離(li)心3 min，棄去(qu)上清液(ye)，加1-2 mL培養基後吹勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入含(han)適(shi)量(liang)培養基的培養瓶中培養過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入10 cm皿中，加入約8 mL培養基，培養過(guo)夜）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並檢查(zha)細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細(xi)胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳(chuan)代培養。

    a、棄去(qu)培養上清，用不含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。        

    b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，使(shi)消化液(ye)浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶置(zhi)於37℃培養箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然(ran)後在顯微鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回操作臺，輕敲幾下(xia)培養瓶後加2-3ml培養基終止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養液(ye)後吹勻(yun)。        

     c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例分(fen)到新(xin)的(de)含(han)8 mL培養基的新(xin)皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時，可(ke)進(jin)行細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心4 min，棄去(qu)上清液(ye)，用PBS清洗壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計(ji)數。

     b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數量加入無(wu)血清細(xi)胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲存。記錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便下次拿(na)取。  

三(san)、培養註意(yi)事(shi)項 

1. 收到細(xi)胞(bao)後首先(xian)觀察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否完(wan)好(hao)，培養液(ye)是否有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生(sheng)請(qing)及時和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用培養基、血清比(bi)例、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因子(zi)等，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培養條件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於培養條件(jian)不壹(yi)致(zhi)而(er)導致(zhi)細(xi)胞(bao)出現(xian)問(wen)題(ti)，責任(ren)由(you) 客戶(hu)自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運輸問題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於溫度(du) 變(bian)化及劇烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精消毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮的(de)培養基重懸 細(xi)胞(bao)，並接種(zhong)到新(xin)的(de)培養瓶或(huo)培養皿中，置(zhi)於培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養。

5. 請客戶(hu)用相同(tong)條件(jian)的培養基用於細(xi)胞(bao)培養。

6. 建議客戶(hu)收到細(xi)胞(bao)後前 3 天(tian)各拍幾張細(xi)胞(bao)照片，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝通(tong) 交流。由(you)於運輸的原(yuan)因，個別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出現(xian)不(bu)穩(wen)定的(de)情(qing)況，請及時和(he)我(wo)們聯系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況，以(yi)便我(wo)們的技(ji)術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科(ke)研使(shi)用。

8. 備(bei)註：運輸用的培養基 (灌液(ye)培養基) 不能再(zai)用來培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按(an)照說明書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條件(jian)新(xin)配(pei)制的培養基來培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後次傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公(gong)司正(zheng)在出售的產品：

phospho-MLC(Ser20)： 0酸(suan)化肌(ji)球(qiu)蛋白輕(qing)鏈抗(kang)體 MGC80-3細(xi)胞(bao)，胃癌(ai)細(xi)胞(bao) 人(ren)喉癌細(xi)胞(bao),TU212細(xi)胞(bao) 正(zheng)常(chang)大(da)鼠(shu)腎(shen)細(xi)胞(bao);NRK

KDR Others Mouse 小鼠(shu) VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 大(da)鼠(shu)細(xi)胞(bao)色(se)素P450 3A4(CYP3A4)ELISA試(shi)劑盒(he) IL-1 Beta(Human Interleukin 1 Beta)  人(ren)白介素1β (IL-1B) 96T

MuRF1/Trim63： 肌(ji)肉(rou)細(xi)胞(bao)特異(yi)性泛(fan)素蛋(dan)白連(lian)接(jie)酶1抗(kang)體 人(ren)角膜上皮細(xi)胞(bao)cDNAHCEpiC cDNA

CAL 27人(ren)舌鱗(lin)癌(ai)細(xi)胞(bao) Human tongue squamous cell carcinoma cell line CAL 27 DMEM+10% FBS 大(da)鼠(shu)細(xi)胞(bao)色(se)素P450 1A1(CYP1A1)ELISA試(shi)劑盒(he) T 睪酮(tong) 96T

MAFbx/Fbx32： 泛(fan)素蛋(dan)白連(lian)接(jie)酶抗(kang)體 RSPO1 Others Human 人(ren) R-Spondin 1 / RSPO1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照)

CXCL16 Protein Canine 重組(zu)狗(gou) CXCL16 / SR-PSOX 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽) 人(ren)乙酰(xian)化酶(CHAc)ELISA 試(shi)劑盒(he) HLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原(yuan) 0.5mg

HOMER2： HOMER2抗體(ti) ENPP3 Others Cynomolgus 食(shi)蟹猴(hou) ENPP3 / CD203c 桿狀(zhuang)病(bing)毒-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照)

人(ren)胰島β細(xi)胞(bao)培養基 100mL 人(ren)酯轉移蛋(dan)白(bai)(CETP)ELISA 試(shi)劑盒(he) HLA-E 人(ren)類白(bai)細(xi)胞(bao)抗(kang)原(yuan)E 0.5mg

HDBP2： 瘤病毒(du)調控(kong)因子(zi)1抗體(ti) 水牛皮膚(fu)成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)細(xi)胞(bao);WB-S5 腎(shen)透(tou)明細(xi)胞(bao)腺(xian)癌，786-0細(xi)胞(bao) A-375 [A375](惡(e)性(xing)黑(hei)色素瘤細(xi)胞(bao))

REG3A Others Rat 大(da)鼠(shu) REG3A 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) (CH)ELISA試(shi)劑盒(he) Anti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高遷(qian)移率族(zu)蛋白A1抗原(yuan) 0.5mg

Ishikawa人(ren)子(zi)宮(gong)內膜癌細(xi)胞(bao)PSGR： 前列(lie)腺(xian)特異(yi)性G蛋(dan)白偶(ou)聯(lian)受(shou)體/嗅(xiu)覺受(shou)體51E2抗(kang)體 CD58 Others Cynomolgus 食(shi)蟹猴(hou) LFA-3 / CD58 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照)

NCI-H345(懸浮(fu)) 小細(xi)胞(bao)肺癌 大(da)鼠(shu)低(di)密度(du)脂蛋(dan)白(bai)受(shou)體相關蛋(dan)白5(LRP5)ELISA試(shi)劑盒(he) FS(Human Follistatin)  人(ren)卵泡(pao)抑素 96T

P2Y11： G蛋白(bai)偶(ou)聯嘌(piao)呤(ling)受(shou)體p2y11抗(kang)體 THP1細(xi)胞(bao)，人(ren)單核(he)細(xi)胞(bao)型(xing)淋(lin)巴瘤 人(ren)導管(guan)瘤細(xi)胞(bao),BT-474細(xi)胞(bao) 非(fei)必(bi)需氨(an)基酸(suan)　100XNEAA

CD83 Others Mouse 小鼠(shu) CD83 / HB15 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 大(da)鼠(shu)低(di)密度(du)脂蛋(dan)白(bai)受(shou)體相關蛋(dan)白1(LRP-1)ELISA試(shi)劑盒(he) TAb(Human Parathyroid Hormone Related Protein)  人(ren)甲狀(zhuang)腺(xian)素抗(kang)體 猴(hou)源(yuan)細(xi)胞(bao)

NCI-N87 [N87]人(ren)胃癌(ai)細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)低(di)密度(du)脂蛋(dan)白(bai)受(shou)體(LDLR)ELISA試(shi)劑盒(he) CA(Human catecholamine)  人(ren)兒茶(cha)酚胺 96T