KATO III人胃(wei)癌細(xi)胞

公(gong)司(si)產(chan)品僅供(gong)科(ke)研(yan)研究使用、不(bu)得用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

二、細(xi)胞培養(yang)操作

1) 復蘇細(xi)胞：以下細(xi)胞培養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理僅供(gong)參考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水浴中迅(xun)速搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後將(jiang)所(suo)有細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入含適量(liang)培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第二天換(huan)液(ye)並檢(jian)查(zha)細(xi)胞密度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞密度達 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

    a、棄去(qu)培養上清，用不(bu)含鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消化液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況而(er)定），然(ran)後在顯微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消化情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞大(da)部分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫落，迅(xun)速拿(na)回操作臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養基(ji)終止消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝入(ru)無菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻。        

     c、將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)按(an)1:2比例(li)分(fen)到(dao)新的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進行(xing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄盡PBS，進行(xing)細(xi)胞計數(shu)。

     b、根據(ju)細(xi)胞數量(liang)加入無血清(qing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞懸液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管(guan)位置(zhi)以便下次拿取(qu)。  

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收到(dao)細(xi)胞後首先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否完好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否有漏液(ye)、渾(hun)濁等現象，若(ruo)有上(shang)述(shu)現象 發生請及(ji)時和我們聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細(xi)胞說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞相關(guan)信息，如細(xi)胞形(xing)態、所(suo)用培(pei)養(yang)基、血清比例(li)、所需 細(xi)胞因子(zi)等，確保細(xi)胞培養(yang)條(tiao)件壹致，若(ruo)由於(yu)培養(yang)條(tiao)件不(bu)壹致(zhi)而導(dao)致細(xi)胞出現(xian)問題，責任(ren)由 客戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分(fen)細(xi)胞由於(yu)溫度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是正(zheng)常現(xian)象。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可(ke)以消化，懸浮(fu)細(xi)胞直接(jie)混勻收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮的(de)培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並接(jie)種到(dao)新的(de)培(pei)養瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行(xing)培(pei)養。

5. 請客(ke)戶(hu)用相(xiang)同(tong)條(tiao)件的(de)培(pei)養基(ji)用於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天各拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞照片，記錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和我司技術部溝通(tong) 交(jiao)流。由於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感細(xi)胞會出(chu)現不(bu)穩定的(de)情(qing)況，請及(ji)時和我們聯(lian)系，告(gao)知細(xi)胞 的(de)具(ju)體情(qing)況，以(yi)便我們的(de)技術人員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供(gong)科(ke)研(yan)使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培(pei)養基(ji) (灌液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞，請換(huan)用按(an)照說(shuo)明(ming)書細(xi)胞培 養(yang)條(tiao)件新配制(zhi)的(de)培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收到(dao)細(xi)胞後第(di)壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。

公(gong)司(si)正在出售的(de)產(chan)品：

MKLP2： 有絲(si)分(fen)裂(lie)驅動蛋白(bai)樣2抗(kang)體(ti) 小鼠誘導(dao)性(xing)多(duo)潛能(neng)幹(gan)細(xi)胞;PUMC-mips-C4

P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 L6(大(da)鼠成肌(ji)細(xi)胞) 大(da)鼠尾(wei)加(jia)壓(ya)素(su)2受(shou)體(ti)(S2R)ELISA試(shi)劑盒 HBcAb(Mouse hepatitis B virus core antibody)  小鼠乙型(xing)肝炎核心抗(kang)體(ti) 615小鼠T細(xi)胞性(xing)白(bai)血病瘤株(zhu);L7912

IL18BP Protein Mouse 重(zhong)組小鼠 IL18BP 蛋白(bai) (His 標簽(qian)) 大(da)鼠維受(shou)體(ti)應(ying)答(da)蛋白(bai)2(RARRES2)ELISA試(shi)劑盒 HBeAb(Mouse hepatitis B virus e antibody)  小鼠乙型(xing)肝炎e抗(kang)體(ti) CDK7 & CCNH & MNAT1 Others Human 人(ren) CDK7 & CCNH & MNAT1 Heteroimer 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

小鼠腮腺(xian)細(xi)胞培養(yang)基 100mL 大(da)鼠維受(shou)體(ti)α(RARα)ELISA試(shi)劑盒 F XII  大(da)鼠Ⅻ 96T

MDFIC： 肌(ji)原(yuan)調節(jie)抑制(zhi)蛋白(bai)抗(kang)體(ti) Eca-109細(xi)胞，食管(guan)癌細(xi)胞 人食(shi)管鱗(lin)癌,KYSE 150細(xi)胞 中國(guo)倉(cang)鼠卵巢(chao)細(xi)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A

Rhesus antibody Rh CCR-3 細(xi)胞表(biao)面(mian)趨(qu)化因子(zi)受(shou)體(ti)3抗(kang)體(ti) HA Others H7N9 甲(jia)型(xing)流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

人(ren)臍(qi)帶單核細(xi)胞培養(yang)基 100mL 人超(chao)敏(min)生長(chang)激素(su)(U S-GH)ELISA 試(shi)劑盒 Integrin Alpha3 整合(he)素(su)α3抗(kang)原(yuan) 0.5mg

Phospho-IRF3 (Ser396)： 0酸化幹(gan)擾(rao)素(su)調節(jie)因子(zi)3 0.1ml

Rhesus antibody Rh CCR4/CD194 細(xi)胞表(biao)面(mian)趨(qu)化因子(zi)受(shou)體(ti)4抗(kang)體(ti) 猴(hou)腎(shen)細(xi)胞;vero IgRCD4- 慢性(xing)髓原白血病(bing)，K562細(xi)胞 BxPC-3(原位胰腺(xian)腺癌細(xi)胞)

IL13 Others Mouse 小鼠 IL13 / ALRH 人細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 人超(chao)敏(min)前(qian)列腺(xian)特(te)異性(xing)抗(kang)原(yuan)(PSA-U S)ELISA 試(shi)劑盒 Integrin Beta5 整合(he)素(su)β5抗(kang)原(yuan) 0.5ml

KATO III人(ren)胃(wei)癌細(xi)胞PKC zeta： 蛋白(bai)激酶(mei)C zeta 抗(kang)體(ti) 兔(tu)晶體上皮(pi)細(xi)胞永生系;N/N1003A(RLE)

MN-c, 小鼠皮(pi)質神(shen)經(jing)元(yuan) 大(da)鼠(CH)ELISA試(shi)劑盒 LR/Ob-R(Human Leptin receptor)  人苗條(tiao)素(su)受(shou)體(ti) 96T

PRG2： 嗜(shi)酸性(xing)粒細(xi)胞顆(ke)粒關鍵堿(jian)性(xing)蛋白(bai)抗(kang)體(ti) IGFBP3 Others Human 人(ren) IGFBP3 / IBP3 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

人(ren)間(jian)充(chong)質幹(gan)細(xi)胞-肝臟RNAHMSC-hp miRNA5 μg 大(da)鼠(CH)ELISA試(shi)劑盒 HGH(Human growth hormone)  人生長(chang)激素(su) 96T

Proinsulin： 胰(yi)島(dao)素(su)原抗(kang)體(ti) 非洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎(shen)細(xi)胞;GL-37