KB人(ren)口腔(qiang)表(biao)皮(pi)癌(ai)細胞(bao)

公司(si)產品(pin)僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使用、不得用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷！

二、細胞(bao)培(pei)養操作(zuo)

1) 復蘇細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培(pei)養凍存處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步驟以(yi)隨(sui)貨產品(pin)說明書(shu)為(wei)主(zhu)。將含有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下離心(xin)3 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後吹勻。然(ran)後將所(suo)有細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含適量培養基的培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過夜(ye)（或將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養基，培養過夜(ye)）。第二(er)天(tian)換液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

    a、棄去(qu)培(pei)養上清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂離子(zi)的(de)PBS潤洗細胞(bao)1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤所(suo)有細胞(bao)，將培養瓶(ping)置於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細胞(bao)大(da)部分變圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速拿回操作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養基終止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入無菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻。        

     c、將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例(li)分到新的(de)含(han)8 mL培養基的新皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態(tai)良好時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入無菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離心(xin)4 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計(ji)數(shu)。

     b、根(gen)據細胞(bao)數(shu)量加(jia)入無血(xue)清細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存管做(zuo)好標識(shi)。將凍存管放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記錄凍存管位(wei)置以(yi)便下次拿取(qu)。  

三(san)、培養註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到細胞(bao)後(hou)首先觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是否完好，培養液(ye)是否有漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解細胞(bao)相關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用培(pei)養基、血清(qing)比例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因(yin)子(zi)等，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於培(pei)養條件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問題(ti)，責任由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精擦拭(shi)細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡下觀(guan)察細胞(bao)狀態(tai)。因運輸問題(ti)，部分細胞(bao)由(you)於(yu)溫度 變化及劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好細胞(bao)狀態(tai)後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮細胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培(pei)養基重懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接種到新的(de)培(pei)養瓶(ping)或培(pei)養皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養。

5. 請(qing)客(ke)戶用相同(tong)條件(jian)的(de)培(pei)養基用於(yu)細胞(bao)培(pei)養。

6. 建議(yi)客戶收(shou)到細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片，記錄細胞(bao)狀態(tai)，便於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部溝通(tong) 交(jiao)流。由(you)於運輸的原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感細胞(bao)會(hui)出現(xian)不(bu)穩定(ding)的情(qing)況，請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況(kuang)，以(yi)便我(wo)們的技(ji)術人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運輸用的(de)培(pei)養基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養基) 不能(neng)再(zai)用來(lai)培養細胞(bao)，請(qing)換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明書(shu)細胞(bao)培(pei) 養條件(jian)新配(pei)制的培養基來培(pei)養細胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正在(zai)出售(shou)的(de)產品(pin)：

CL-0272EA.hy926(人(ren)臍(qi)靜脈細胞(bao)融(rong)合(he)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(VE)ELISA試劑盒(he) HBeAg(Mouse hepatitis B virus e antigen)  小(xiao)鼠乙(yi)型(xing)肝炎e抗(kang)原(yuan) 96T

MRP8： 多藥(yao)耐(nai)藥(yao)相關(guan)蛋白8抗(kang)體 小(xiao)鼠誘(you)導(dao)性多潛能(neng)幹(gan)細胞(bao);PUMC-mips-D2

PA-1(人(ren)卵(luan)巢腺癌細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 H9c2(2-1)(大(da)鼠心(xin)肌細胞(bao)) 大(da)鼠(VE)ELISA 試劑盒(he) F X III  大(da)鼠ⅩⅢ 96T

MRP7： 多藥(yao)耐(nai)藥(yao)相關(guan)蛋白7抗(kang)體 小(xiao)鼠正常肝細胞(bao);NCTC 1469 [NCTC1469]

IL1B Protein Human 重組人(ren) IL-1 beta / IL1B 蛋白 大(da)鼠維(wei)生受體(VDR)ELISA試劑盒(he) F III  大(da)鼠Ⅲ 96T

NR8383(大(da)鼠肺泡(pao)巨(ju)噬細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren) PRAP1 / Proline-rich acidic 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 人(ren)腸(chang)脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒(he) Integrin AlphaE2/CD103 整合(he)素(su)αE2抗(kang)原(yuan) 0.2ml

phospho-IRS1(Ser332 + Ser336)： 0酸化胰(yi)島(dao)素(su)受(shou)體底(di)物-1抗體 大(da)鼠間充(chong)質幹(gan)細胞(bao)-骨(gu)髓(sui)RMSC

CXCL5 Protein Human 重組人(ren) CXCL5 蛋白 人(ren)腸(chang)三葉因子(zi)(ITF)ELISA 試劑盒(he) ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3) ENPP3抗原(yuan) 0.5mg

phospho-IRS1(Ser612)： 0酸化胰(yi)島(dao)素(su)受(shou)體底(di)物-1抗體 XCL1 Others Canine 狗 XCL1 桿狀病毒(du)-昆蟲細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

人(ren)外(wai)周(zhou)血白細胞(bao)培(pei)養基 100mL 人(ren)腸(chang)病毒(du)(Eerovirus)ELISA 試劑盒(he) IQGAP1 支架蛋白抗(kang)原(yuan) 0.5mg

KB人(ren)口腔(qiang)表(biao)皮(pi)癌(ai)細胞(bao)PCK1： 0酸烯醇酸(suan)羧激酶抗(kang)體 Cyc-tAg細胞(bao)，小(xiao)鼠T淋巴細胞(bao)瘤(SV40T抗原(yuan)轉染) 人(ren)卵(luan)巢癌(ai)耐(nai)藥(yao)株(zhu),A2780/Taxol細胞(bao) 人(ren)肺動(dong)脈成(cheng)纖維(wei)細胞(bao)裂(lie)解物HPAFL

ILKAP Others Human 人(ren) ILKAP 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠單(dan)核(he)細胞(bao)趨(qu)化(hua)蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒(he) PGF2 Alpha(Human Prostaglandin F2 Alpha)  人(ren)前(qian)列腺素(su)F2α 96T

PAPOA： 多聚合(he)酶α抗(kang)體 狗肺成(cheng)纖維(wei)樣(yang)細胞(bao);DogL1

小(xiao)鼠神(shen)經幹(gan)細胞(bao)(EGFP標(biao)記) 大(da)鼠單(dan)核(he)細胞(bao)趨(qu)化(hua)蛋白4(MCP-4)ELISA試劑盒(he) tPSA(Human total prostate s pecific antigen)  人(ren)總(zong)前列腺特異抗(kang)原(yuan) 96T

PAPOG： 多聚合(he)酶g抗(kang)體 IGF1R Others Human 人(ren) IGF1R 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))