KU812人(ren)外周(zhou)血(xue)嗜堿(jian)性白(bai)血(xue)病(bing)細胞

公司(si)產品(pin)僅供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨(lin)床診斷(duan)！

二(er)、細胞培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下細胞培(pei)養(yang)凍存處理僅供(gong)參考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟以隨貨產(chan)品(pin)說明書為主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞懸液的凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃解凍，加(jia)4 mL培養基(ji)混合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細胞懸液加(jia)入含適(shi)量(liang)培養(yang)基(ji)的培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將細胞懸液加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培養(yang)過夜）。第二(er)天換(huan)液並檢查細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代：如果細胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳代培養。

    a、棄(qi)去培養上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。        

    b、加(jia)1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤所(suo)有細胞，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞情(qing)況(kuang)而定(ding)），然後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若細胞大(da)部分變圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養基(ji)終止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入無菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培養液後(hou)吹勻(yun)。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到(dao)新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新(xin)皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍存：待細胞生(sheng)長狀(zhuang)態良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進行(xing)細胞凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細胞及(ji)細胞培(pei)養(yang)液，裝入無菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細胞計(ji)數(shu)。

     b、根據(ju)細胞數(shu)量(liang)加(jia)入無血(xue)清(qing)細胞凍存液，使(shi)細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，註意(yi)凍存管做好標識(shi)。將凍存管放(fang)入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)灌(guan)儲存。記錄(lu)凍存管位(wei)置(zhi)以便下(xia)次拿取(qu)。  

三(san)、培養(yang)註意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收到細胞後(hou)首(shou)先觀察細胞瓶(ping)是否完(wan)好(hao)，培(pei)養液是否有(you)漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若有上述現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯系。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞說明書，了解細胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如細胞形(xing)態、所用(yong)培(pei)養基(ji)、血(xue)清(qing)比例、所需(xu) 細胞因(yin)子等，確保細胞培(pei)養(yang)條件壹致(zhi)，若由(you)於培(pei)養條件不(bu)壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞出現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客戶自行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞瓶(ping)表面，顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部分細胞由(you)於溫(wen)度(du) 變化及(ji)劇(ju)烈碰亡破碎形(xing)成(cheng)碎片，是(shi)正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可(ke)以消化(hua)，懸浮(fu)細胞直(zhi)接混勻(yun)收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培養瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同條件的培(pei)養基(ji)用(yong)於(yu)細胞培(pei)養(yang)。

6. 建議客戶收到細胞後(hou)前 3 天各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便於(yu)和(he)我司(si)技術部溝(gou)通 交流(liu)。由(you)於運(yun)輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏(min)感細胞會(hui)出現(xian)不(bu)穩定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯系，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們(men)的(de)技術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至問(wen)題(ti)解決。

7. 該細胞僅供(gong)科研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培養(yang)基(ji) (灌液培養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來培養細胞，請換(huan)用(yong)按照(zhao)說明書細胞培(pei) 養(yang)條件新配(pei)制的(de)培(pei)養基(ji)來培養細胞。     收到細胞後(hou)第壹次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。

公(gong)司(si)正(zheng)在出售的(de)產(chan)品(pin)：

MAP1LC3A： 自噬(shi)微管(guan)相(xiang)關蛋白(bai)輕鏈(lian)3抗(kang)體 XRCC5 & XRCC6 Others Human 人(ren) XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆蟲細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

小鼠(shu)淋(lin)巴管(guan)內皮細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)微粒(li)體S轉(zhuan)移酶1(MGST1)ELISA試劑(ji)盒 TGF- Beta1(Human Transforming Growth factor Beta1)  人(ren)轉(zhuan)化生(sheng)長因(yin)子β1 96T

MRF/C11orf9： 髓(sui)鞘(qiao)基(ji)因(yin)調控因(yin)子抗(kang)體 NIH:OVCAR-3細胞，卵(luan)巢癌細胞 人(ren)食(shi)管癌細胞,KYSR450細胞 豚(tun)鼠(shu)皮(pi)膚(fu)細胞;GP-S2

NRG1 Others Human 人(ren) NRG1-alpha (ECD) 人(ren)細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)微管(guan)相(xiang)關蛋白(bai)2(MAP-2)ELISA試劑(ji)盒 HL  大鼠(shu)肝脂酶 96T

MYBPC1： 肌球蛋白(bai)結合(he)蛋白(bai)C抗(kang)體 人(ren)心(xin)肌(ji)細胞裂解物HCML

人(ren)腸(chang)微血(xue)管內皮細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人(ren)補(bu)體(ti)片斷(duan)4b(C4b)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 Leptin receptor 瘦素(su)受體 0.5mg

IGF I： 1抗(kang)體 EB病(bing)毒(du)轉(zhuan)化的絨(rong)猴淋(lin)巴細胞;B95-8 膀(pang)胱(guang)癌(ai)細胞，J82細胞 GBC-SD(膽(dan)囊(nang)癌細胞)

TMED1 Others Human 人(ren) TMED1 人(ren)細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 人(ren)補(bu)體(ti)片斷(duan)3b(C3b)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2) 脂蛋脂(zhi)酶A2抗(kang)原(yuan) 0.2mg

IKK beta： KB抑制蛋白(bai)激酶β抗(kang)體 CM-R047大鼠(shu)腸(chang)微血(xue)管細胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL

AMS2細胞，人(ren)幹細胞因(yin)子單(dan)克隆抗(kang)體細胞株(zhu) 阪(ban)崎腸(chang)桿菌(jun) 大耳山羊(yang)皮膚(fu)細胞;LDG-3 人(ren)補(bu)體(ti)片斷(duan)3a(C3a)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 Lgr5/GPR49 腸上皮幹細胞蛋白(bai)(多(duo)肽) 0.5mg

KU812人(ren)外周(zhou)血(xue)嗜堿(jian)性白(bai)血(xue)病(bing)細胞人(ren)腦(nao)血(xue)管平(ping)滑肌細胞 大(da)鼠(shu)促胰(yi)液素(su)/胰(yi)泌素(su)(Sct)ELISA試劑(ji)盒 GAG(Human glycosaminoglycan)  人(ren)糖胺聚(ju)糖ELISA試劑(ji)盒 96T

RFC2： 復(fu)制激活因(yin)子C2抗(kang)體 NRP1 Others Cynomolgus 食(shi)蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 人(ren)細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

Panc10.05 胰(yi)腺(xian)腺(xian)癌(ai) 大鼠(shu)促性腺(xian)素(su)釋放(fang)素(su)受體(GHR)ELISA試劑盒 CysLTs(Human cysteinyl leukotrienes)  人(ren)半(ban)胱(guang)酰(xian)白(bai)三(san)烯 96T

REA： B淋(lin)巴細胞受體相關蛋白(bai)抗(kang)體 293T細胞，人(ren)胚腎T細胞 人(ren)卵(luan)巢癌細胞,HO-8910細胞 人(ren)心(xin)肌(ji)細胞裂解物HCML

LTF Others Human 人(ren) LTF / Lactoferrin / Lactoansferrin 人(ren)細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)抑制激素(su)(GnIH)ELISA試劑(ji)盒 CALU(Human calumenin)  人(ren)鈣(gai)腔(qiang)蛋白(bai) 96T