MCF-7人(ren)乳(ru)腺癌(ai)細胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅供科(ke)研(yan)研(yan)究使用、不(bu)得(de)用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷！

二(er)、細胞(bao)培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培養(yang)凍(dong)存處理(li)僅供參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產(chan)品(pin)說明書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細胞(bao)懸液的(de)凍存管在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混合均勻。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含適量(liang)培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜（或將(jiang)細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天換液並檢查細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

    a、棄(qi)去培養(yang)上(shang)清，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細胞(bao)1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察細胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若細胞(bao)大(da)部(bu)分變圓並脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下培養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養(yang)基(ji)終止(zhi)消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹勻(yun)。        

     c、將(jiang)細胞(bao)懸液按(an)1:2比例分(fen)到(dao)新的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新皿中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待細胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數(shu)。

     b、根據細胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液，使(shi)細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管凍存1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍存管做(zuo)好(hao)標識。將(jiang)凍存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液氮灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍存管位置以(yi)便下次拿取(qu)。  

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事項 

1. 收到(dao)細胞(bao)後(hou)首先(xian)觀察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培養(yang)液是(shi)否(fou)有漏(lou)液、渾(hun)濁等現(xian)象，若(ruo)有上(shang)述現象(xiang) 發生請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說明書，了解(jie)細胞(bao)相關信息(xi)，如細胞(bao)形(xing)態(tai)、所用(yong)培養(yang)基(ji)、血清(qing)比例、所(suo)需 細胞(bao)因子等，確(que)保細胞(bao)培養(yang)條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若由於培養(yang)條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導致細胞(bao)出現問(wen)題，責(ze)任由(you) 客戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察細胞(bao)狀態(tai)。因運輸(shu)問題，部(bu)分細胞(bao)由(you)於溫度 變化(hua)及(ji)劇烈碰亡破碎形成碎片(pian)，是正常現象(xiang)。觀察好(hao)細胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細胞(bao)直接混(hun)勻(yun)收集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重懸 細胞(bao)，並接種(zhong)到新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請客戶用相同(tong)條(tiao)件的(de)培養(yang)基(ji)用於細胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客戶收到(dao)細胞(bao)後(hou)前 3 天各拍幾(ji)張細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀態(tai)，便於和我(wo)司技術部(bu)溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由(you)於運輸(shu)的(de)原(yuan)因，個別(bie)敏(min)感(gan)細胞(bao)會出現不(bu)穩定(ding)的(de)情況，請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知細胞(bao) 的(de)具體情況，以(yi)便我(wo)們(men)的(de)技術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直至問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備註：運輸(shu)用的(de)培養(yang)基(ji) (灌(guan)液培養(yang)基(ji)) 不(bu)能再(zai)用來培養(yang)細胞(bao)，請換用按(an)照(zhao)說明書細胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件新(xin)配(pei)制的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。

公司正在出售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

-MAP4(Ser941)： 0酸化(hua)微(wei)管(guan)相關蛋白4抗(kang)體 HA Others H1N1 甲(jia)型流(liu)感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

CL-0143Lncap clone FGC(人前列腺(xian)癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠糖(tang)缺(que)失(shi)性(xing)轉鐵(tie)蛋白(CDT)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PP  大(da)鼠蛋酸(suan)酶(mei) 96T

membrane glycoprotein E(VZV)： 人水(shui)痘(dou)帶狀皰疹病(bing)毒(du)gE蛋白抗(kang)體 雜交瘤(B類);C3110D2E11

RL1(大(da)鼠肺成纖維(wei)樣細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 JAR(胚絨毛癌(ai)細胞(bao)) 大(da)鼠糖(tang)皮(pi)質類固(gu)醇(chun)受(shou)體(GR)ELISA試(shi)劑(ji)盒 TrxR  大(da)鼠硫(liu)氧還(hai)蛋白還(hai)原(yuan)酶 96T

MAGEG1： 黑色素瘤相關抗原(yuan)G1/肝癌(ai)相關蛋白4抗(kang)體 人(ren)黑(hei)色素瘤細胞(bao);A875

IKK Alpha + IKK beta： KB抑制蛋白激(ji)酶(mei)α/β抗體 人(ren)惡(e)性多(duo)發性(xing)畸胎(tai)瘤細胞(bao);ERA-2

QGY-7701(人肝癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠 EphA3 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 人白介(jie)素受(shou)體相關激酶(IRAK)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 NGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6) 鼻咽癌(ai)細胞(bao)相關基因6(多肽(tai)) 0.5mg

Interferon alpha 11： 幹擾(rao)素α11抗(kang)體 人(ren)角質細胞(bao)HHFK

XCL1 Protein Human 重組人 XCL1 蛋白 (His 標簽) 人白介(jie)素9(IL-9)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 NIT2 (nitrilase family, member 2) NIT2蛋白抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IFNA10： 幹擾(rao)素α10抗(kang)體 Spike Others MERS-CoV 中(zhong)東(dong)呼(hu)吸(xi)綜(zong)合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 Protein (aa 1-725) 桿(gan)狀病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

MCF-7人乳(ru)腺癌(ai)細胞(bao)CL-0369IR983F(大(da)鼠骨(gu)髓瘤細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠成(cheng)纖維(wei)生長(chang)因子受(shou)體底(di)物(wu)2(FRS2)ELISA試(shi)劑(ji)盒 FA(Human Folic acid)  人 96T

RBMY1A1： RNA結合蛋白片(pian)段(duan)Y染色體家(jia)族蛋白1抗(kang)體 GZMB Others Human 人(ren) Granzyme B / GZMB 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

人滑(hua)膜細胞(bao)總(zong)RNAHS NA 大(da)鼠成(cheng)肌分化(hua)蛋白(MyoD)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ET(Human endotoxin)  人內毒素 96T

RNA polymerase III： RNA聚合酶III抗體 非洲綠(lv)猴腎細胞(bao);VERO

人胚肺二(er)倍體細胞(bao);HEL-1 人(ren)胃(wei)粘膜上(shang)皮細胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠沈(chen)默(mo)調(tiao)節(jie)蛋白3(SI3)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PPAR- Gamma(Human Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma)  人過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)體增(zeng)殖(zhi)因子活(huo)化(hua)受(shou)體γ 96T