Bst 4.0 Basic Mix (液(ye)體(ti)預混(hun))

公(gong)司(si)產品(pin)僅供科(ke)研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不得用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷！

商(shang)品(pin)屬性

該制品(pin)為單壹組分(fen)的 MasterMix（2 倍濃度），包(bao)含(han)了(le)反(fan)應(ying)緩(huan)沖(chong)液(ye)、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等，使用(yong)時只(zhi)需(xu)要加(jia)入引(yin)物、模(mo)板即(ji)可進(jin)行核(he)酸(suan)恒溫擴增。Bst4.0 DNA/RNA 聚合酶具有(you)依(yi)賴於(yu) RNA 模板(ban)的聚合酶活(huo)性（逆(ni)轉(zhuan)錄(lu)），還具有(you)依(yi)賴於(yu) DNA 的聚合酶活(huo)性，因(yin)此無(wu)論(lun)DNA 或(huo) RNA 樣(yang)本(ben)均(jun)可使用(yong)該制品(pin)進(jin)行高(gao)效的恒溫擴增。該制品(pin)是進(jin)行 LAMP 及 RT-LAMP 擴(kuo)增反(fan)應(ying)的(de)試(shi)劑(ji)。優(you)化的(de)反應(ying)體(ti)系，確保快(kuai)速的完成檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)的反(fan)應(ying)體(ti)系建立。該系列(lie)產品不包(bao)含(han)任(ren)何其(qi)它(ta)輔(fu)助(zhu)染(ran)料(liao)，在 LAMP 的擴增搭(da)配 OG 橙綠(lv)變色(se)管(guan)進(jin)行可視(shi)化(hua)變色(se)反應(ying)。除(chu)此外(wai)，該制品(pin)還可以用(yong)於(yu)其它(ta)恒溫擴增實(shi)驗，包(bao)括(kuo) CPA、SMAP 等(deng)。
儲(chu)存(cun)：長期保存(cun)制(zhi)品於(yu)-20℃，保存(cun) 2 年。
使用(yong)實(shi)例(li)（以 LAMP OG 橙綠(lv)變色(se)為例(li)）橙(cheng)綠(lv)變色(se)染料(liao)（OG Dye）以凍(dong)幹的(de)形式預(yu)加(jia)在 8 聯管(guan)蓋(gai)上。在 LAMP 反應(ying)完(wan)畢(bi)後（在反應(ying)完(wan)畢(bi)前，務
必(bi)不能(neng)將(jiang)管(guan)蓋(gai)上染料(liao)混(hun)入反(fan)應(ying)液(ye)中(zhong)），將(jiang) 0.2ml EP 管(guan)顛(dian)倒溶解 OG 染料(liao)後。LAMP 的(de)反應(ying)產(chan)物將(jiang)與 OG 染(ran)料(liao)形成強(qiang)烈(lie)的綠(lv)色肉眼(yan)可見變色(se)反應(ying)（陽(yang)性(xing)），而(er)未發(fa)生擴增的(de) EP管(guan)為(wei)深(shen)橙(cheng)色(se)（陰(yin)性(xing)）。
（1）配制反(fan)應(ying)體(ti)系
在 0.2ml EP 反應(ying)管(guan)中(zhong)加(jia)入下(xia)述試(shi)劑(ji)
2xBst 4.0 Basic Mix 10 μl
*10xLAMP Primer Mix 2 μl
模板(ban) DNA/RNA X μl
ddH2O 到總(zong)體(ti)積 20 μl
*10xLAMP Primer Mix 濃度(du)：FIP/BIP 分(fen)別為 16 μM、LoopF/B 分(fen)別為(wei) 4 μM、F3/B3 分(fen)別(bie)為(wei) 2 μM全(quan)部試(shi)劑(ji)加入完(wan)畢(bi)後，輕彈(dan) EP 管(guan)底(di)部後(hou)，再(zai)蓋(gai)上 OG 橙綠(lv)變色(se)管(guan)（蓋(gai)上管(guan)蓋(gai)後務必(bi)不能(neng)再(zai)劇烈(lie)混(hun)合與(yu)倒置(zhi)，以防止(zhi)將(jiang)管(guan)蓋(gai)上的 OG 染料(liao)溶解，OG 染料(liao)壹旦(dan)混(hun)入反(fan)應(ying)液(ye)中(zhong)將(jiang)會終(zhong)止(zhi) LAMP 反(fan)應(ying)）。
實(shi)驗 LAMP Primer Mix 分別(bie)采用(yong) 1、1.5、2 μl，以陰性不變色(se)，陽(yang)性(xing)樣品(pin)正(zheng)常(chang)變色(se)為標準，作為(wei)後續(xu)測(ce)試(shi)用(yong)量。
（2）反應(ying)體(ti)系配好後(hou)，置(zhi)於(yu) 60~68°C（實(shi)驗采用(yong)65°C）進(jin)行反(fan)應(ying) 20~45min。（擴(kuo)增良(liang)好(hao)的引(yin)物組合(he)，通常 25min 即(ji)可變色(se)，壹般不超過(guo) 45min，實(shi)驗設(she)置(zhi)20、25、30、45min）。
（3）觀察(cha)結果(guo)：觀(guan)察結果(guo)時(shi)，盡可能(neng)不要與(yu)配制反(fan)應(ying)空間(jian)共(gong)用(yong)，以防止(zhi)汙染操作(zuo)臺。將(jiang)反應(ying) EP 管(guan)倒置(zhi)，並手(shou)腕輕(qing)甩(shuai)，反(fan)應(ying)液(ye)浸(jin)泡 EP 管(guan)蓋(gai)上的 OG 染料(liao)，靜(jing)置(zhi) 30s。再(zai)將(jiang) EP 反應(ying)管(guan)正(zheng)置(zhi)，並輕(qing)甩反(fan)應(ying)液(ye)到(dao) EP 管(guan)底(di)部，此(ci)時擴增樣(yang)品(pin)將(jiang)變為(wei)鮮艷(yan)肉(rou)眼(yan)可見綠(lv)色，而(er)陰(yin)性(xing)未發(fa)生擴增的(de)管(guan)將(jiang)為深(shen)橙(cheng)色(se)。
註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)
1. 在用(yong)於(yu)其它(ta)恒溫擴增反(fan)應(ying)時(shi)（如(ru) CPA、SMAP 等），可參考(kao)如(ru)上策略進(jin)行使(shi)用(yong)，反應(ying)時(shi)間(jian)可能(neng)會(hui)需(xu)要調整。
2. 關於(yu)礦(kuang)物油(you)的使(shi)用(yong)，在配制完(wan) LAMP 反(fan)應(ying)體(ti)系後，可加入壹(yi)滴(di)礦(kuang)物油(you)覆蓋(gai)於(yu)反應(ying)液(ye)上部，以減少(shao)氣溶膠的汙染(ran)。
3. 鑒於(yu)特殊(shu)的生產工(gong)藝， 全(quan)系(xi)恒溫擴增 Mix 系(xi)
列(lie)均不能(neng)進(jin)行濁度(du)分(fen)析(xi)。

公(gong)司(si)正在出售(shou)的產(chan)品(pin)：