ELISA實(shi)驗中(zhong)血(xue)清的(de)采(cai)集、處理和保(bao)存;
1、 真(zhen)空采(cai)血(xue)針(zhen)采(cai)集2ml新鮮血(xue)液,加(jia)入無(wu)菌(jun)試(shi)管(guan)中(zhong);
2、 采(cai)血(xue)後室(shi)溫(wen)靜(jing)置1小時(shi);
3、 將(jiang)采(cai)集血(xue)液用離心機(ji)4℃,2500rpm離心10min,,將(jiang)離心好的(de)勻漿留(liu)上(shang)清,棄(qi)下(xia)面(mian)沈澱(dian)。
4、 取(qu)上(shang)清。 分(fen)裝凍存備(bei)用,
2-8℃下(xia),可(ke)放(fang)置保(bao)存24-48小時(shi);
-20℃下(xia),可(ke)放(fang)置保(bao)存1個月;
-70℃下(xia),可(ke)放(fang)置保(bao)存6個月;
5、 根(gen)據(ju)妳的(de)實驗需(xu)要,取適量上(shang)清夜(ye)進(jin)行(xing)各種(zhong)ELISA測(ce)定(ding)。
大(da)部分(fen)ELISA檢測(ce)均(jun)以(yi)血(xue)清為(wei)標本。血(xue)清標本可(ke)按常(chang)規方法采(cai)集,應(ying)註意(yi)避(bi)免(mian)溶(rong)血(xue),紅(hong)細(xi)胞溶(rong)解時(shi)會(hui)釋放(fang)出具有(you)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)活性的(de)物(wu)質(zhi),以(yi)HRP為(wei)標記的(de) ELISA測(ce)定(ding)中,溶(rong)血(xue)標本可(ke)能會(hui)增(zeng)加(jia)非(fei)特異(yi)性顯(xian)色(se)。此外還應(ying)避(bi)免(mian)細菌(jun)汙染,因(yin)為(wei)菌(jun)體中(zhong)可(ke)能含有(you)含有(you)內(nei)源性HRP,也會(hui)產生(sheng)假陽(yang)性反(fan)應(ying)。血(xue)清標本宜(yi)在新(xin)鮮(xian) 時(shi)檢測(ce)。如(ru)在冰箱中(zhong)保(bao)存過(guo)久,其中(zhong)的(de)可(ke)發(fa)生(sheng)聚合,在間(jian)接(jie)法ELISA中可(ke)使本底加(jia)深(shen)。