Super ECL Substrate

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供科研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得用於(yu)臨(lin)床診斷！

商品(pin)屬性

產(chan)品(pin)介(jie)紹：
超敏 ECL 顯(xian)色液用於 Western、Northern 和(he) Southernblot 分(fen)子雜(za)交(jiao)的化學發光檢(jian)測(ce)，比傳(chuan)統化學顯色法靈敏度(du)高(gao)，可達 pg 水平(ping)。原理(li)是(shi)采(cai)用新型(xing)發(fa)光底(di)物(wu)（Luminol），其與辣(la)根過(guo)氧化(hua)物酶(mei)反(fan)應時產(chan)生(sheng)很強(qiang)的發光信(xin)號(hao)，在(zai)暗(an)室中(zhong)對(dui)X-光片感光，以(yi)此檢(jian)測(ce)微量(liang)蛋(dan)白(bai)而獲(huo)得理(li)想(xiang)的實(shi)驗結(jie)果。海(hai)基(ji)增(zeng)強(qiang)型(xing) ECL 顯(xian)色液具(ju)有靈(ling)敏度(du)高(gao)，持(chi)續(xu)時間長等(deng)特點。

應用
在 Western 印(yin)跡(ji)分(fen)析，核(he)酸(suan)雜(za)交(jiao)以(yi)及 EMSA 實(shi)驗中(zhong)，HRP標(biao)記(ji)的二抗(kang)或探(tan)針與靶分(fen)子結(jie)合(he)再與底物(wu)反(fan)應產(chan)生(sheng)可見光。
儲(chu)存：2-8°C，Super ECL A 要求(qiu)避(bi)光保(bao)存(cun)。
操作方(fang)法（以(yi) Western Blot 為例)
1．按(an)每平(ping)方厘米(mi)膜面(mian)積用 0.1-0.2 ml 配(pei)置顯(xian)色液：根據(ju)顯(xian)色液的需(xu)要量(liang)，取等體積 A 液和(he) B 液，混(hun)勻(yun)後避光保(bao)存(cun)備用；該顯色液必須現配現用。
2．2. 取出膜，平(ping)放在幹(gan)凈(jing)的保鮮(xian)膜(mo)上，膜的正面(mian)（蛋(dan)白(bai)質(zhi)面(mian)）朝上，在(zai)膜(mo)的中(zhong)央(yang)加(jia)適(shi)量(liang)的配置(zhi)好的顯色液（6×8 cm 的膜加(jia) 2 ml 顯(xian)色液），溶液向四(si)周迅速(su)擴散(san)，覆(fu)蓋(gai)所有膜面(mian)。室溫(wen)保溫(wen) 5 分(fen)鐘(zhong)左右(you)，在此(ci)過(guo)程(cheng)中(zhong)請(qing)仔細(xi)觀察(cha)信(xin)號(hao)的出現。註(zhu)意：如果信(xin)號(hao)強(qiang)，在暗(an)室中(zhong)能(neng)很快(kuai)看到(dao)陽(yang)性信(xin)號(hao)出(chu)現。
3．3. 待信(xin)號(hao)出(chu)現且穩(wen)定後，用鑷(nie)子夾起(qi)膜(mo)，除去(qu)多余(yu)的顯色液，平(ping)放在幹(gan)凈(jing)的保鮮(xian)膜(mo)上，膜的正面(mian)（蛋(dan)白(bai)質(zhi)面(mian)）朝上，在(zai)轉(zhuan)移膜的上面(mian)再覆蓋(gai)壹層保鮮(xian)膜(mo)，除去(qu)保鮮(xian)膜(mo)與轉移膜之(zhi)間的空氣泡，請務(wu)必保(bao)證(zheng)保鮮(xian)膜(mo)是幹(gan)凈(jing)的，不(bu)被其他(ta)雜(za)物(wu)或液(ye)體汙染。
4．4. 在暗(an)室中(zhong)，將(jiang)膜的正面(mian)對(dui)著(zhe) X-光片，放入暗(an)盒(he)。第(di)壹次曝(pu)光時(shi)間(jian)在 1 分(fen)鐘(zhong)左右(you)(有經(jing)驗的操作者(zhe)可以(yi)根據(ju)信(xin)號(hao)的強(qiang)弱(ruo)自(zi)行(xing)決定(ding))，立(li)即按(an)要求(qiu)對(dui) X-光片進行(xing)顯(xian)影和(he)定(ding)影，確(que)定曝(pu)光時(shi)間(jian)。曝光時(shi)間(jian)從數(shu)秒(miao)到數(shu)小(xiao)時不(bu)等；特別(bie)弱(ruo)的過(guo)夜曝(pu)光也(ye)可(ke)。
註(zhu)意
1.PVDF 膜較(jiao)硝(xiao)酸(suan)纖(xian)維膜(mo)能(neng)更好(hao)的結(jie)合(he)蛋(dan)白(bai)，因(yin)此呈現較強(qiang)的信(xin)號(hao)。選高(gao)質(zhi)量(liang)的 PVDF 膜；盡(jin)可能(neng)不(bu)用 Nylon 膜(mo)。
2.2.與抗體結(jie)合(he)以(yi)後，要保(bao)證(zheng)膜處於(yu)濕潤(run)狀態(tai)，否(fou)則(ze)會(hui)導(dao)致背景較(jiao)高(gao)。
3.3.沒(mei)有(you)信(xin)號(hao)的原因(yin)：有些抗體不(bu)識別(bie)變(bian)性抗(kang)原，有時(shi)需(xu)要考慮(lv)電(dian)泳過(guo)程(cheng)對蛋(dan)白(bai)質(zhi)結(jie)構(gou)的影響；樣(yang)品中(zhong)無(wu)待(dai)測(ce)蛋(dan)白(bai)質(zhi)或含(han)量(liang)過(guo)低；壹抗效(xiao)價(jia)低(di)，用量(liang)少(shao)，可適當(dang)增加(jia)壹抗的用量(liang)；
4.4.背景過(guo)高(gao)原因(yin)：轉移膜封(feng)閉(bi)不(bu)充(chong)分(fen)；與抗體孵(fu)育(yu)後洗滌；膜在(zai)處理(li)過(guo)程(cheng)中(zhong)過(guo)幹(gan)；二(er)抗(kang)用(yong)量(liang)過(guo)多等。
5.5.註(zhu)意及時更(geng)換顯(xian)影液(ye)、定(ding)影液(ye)。

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