近(jin)年(nian)來(lai)，酶(mei)免(mian)疫(yi)分析的技(ji)術(shu)取(qu)得了(le)顯著的發展(zhan)，主(zhu)要表(biao)現(xian)在(zai)以下(xia)方(fang)面：

1、繼單克(ke)隆抗(kang)體後的第(di)三(san)代抗(kang)體基因工程抗體的應(ying)用(yong)，明顯地提高了檢(jian)測(ce)的特(te)異(yi)性，基本(ben)消(xiao)除(chu)了(le)抗原、抗體間的(de)非(fei)特(te)異(yi)xing jiao叉(cha)反應(ying)，保證(zheng)了分(fen)析的準(zhun)確性(xing)。抗體制備(bei)技(ji)術(shu)的進步，使(shi)試(shi)劑的生產制備得以規模化，檢(jian)測(ce)範圍(wei)日(ri)益(yi)擴展(zhan)，小(xiao)分(fen)子抗(kang)原、半抗(kang)原的檢(jian)測(ce)成為事實。

2、分(fen)析方式(shi)的改(gai)進與(yu)多樣化提高了試(shi)驗的敏感性(xing)。

1）、除(chu)早(zao)期的競(jing)爭法，間接(jie)法外(wai)，又發展(zhan)了(le)雙(shuang)抗(kang)原夾心法測(ce)抗體，偶(ou)聯(lian)酶(mei)標(biao)記法測(ce)抗原，橋聯(lian)酶(mei)免(mian)疫(yi)分析，酶放(fang)大免(mian)疫(yi)分析技術(shu)等，後者(zhe)應(ying)用(yong)了-親(qin)和(he)素(su)系統，底物(wu)循(xun)環(huan)放(fang)大(da)系統，酶(mei)-抗(kang)酶放大系統及酶偶(ou)聯(lian)放(fang)大(da)系統等。

2）、由(you)於酶標(biao)記技(ji)術(shu)的進步，標(biao)記酶的應(ying)用(yong)已從(cong)過氧(yang)化物(wu)酶(mei)，擴展(zhan)到(dao)堿性磷(lin)酸(suan)酶，β半(ban)乳(ru)糖(tang)苷酶(mei)，尿(niao)素(su)酶，葡(pu)萄糖(tang)6磷(lin)酸(suan)脫氫酶，葡(pu)萄糖(tang)氧化酶，蘋果(guo)酸(suan)脫氫酶，至(zhi)今有(you)二十多種酶被應(ying)用(yong)於EIA ，但應(ying)用(yong)比較(jiao)多的(de)仍然是(shi)辣(la)根過氧化物(wu)酶(mei)（Horseradish Peroxidase,HRP）和堿性磷(lin)酸(suan)酶（Alkalinephasphotase，ALP）。

3）、酶(mei)免(mian)疫(yi)分析與其(qi)它(ta)標記免(mian)疫(yi)分析相(xiang)結(jie)合(he)如與熒光免(mian)疫(yi)分析（Fluorescence Immunoassay ,FIA）結(jie)合(he)形(xing)成熒光酶(mei)免(mian)疫(yi)分析（Fluorescence Enzyme Immunoassay ，FEIA），酶促(cu)放大(da)時間(jian)分(fen)辨熒光免(mian)疫(yi)分析（Enzyme-am-plified time-resolved fluoroimmunoassay ，EATRFIA），EIA與化學(xue)發光免(mian)疫(yi)分析（Chemiluminescence immunoassay，CLIA）結(jie)合(he)形(xing)成酶—化學(xue)發光免(mian)疫(yi)分析，增強化學(xue)發光酶(mei)免(mian)疫(yi)分析（ECLEIA）。EIA與聚(ju)合(he)酶鏈反應(ying)結(jie)合(he)形(xing)成的PCR-EIA分析等。

4）、改進固(gu)相(xiang)載(zai)體的技(ji)術(shu)

傳統ELISA應(ying)用(yong)的固(gu)相(xiang)載(zai)體是(shi)聚(ju)苯乙(yi)稀(xi)微孔(kong)板(ban)，聚(ju)苯乙(yi)烯(xi)珠(zhu)或(huo)條(tiao)，後發展(zhan)為(wei)硝酸(suan)纖維(wei)素(su)膜、活(huo)化濾紙(zhi)、矽片(pian)、尼(ni)龍(long)、利(li)用(yong)高分(fen)子材(cai)料(liao)合(he)成的各種固相(xiang)微(wei)粒等。為提高固相(xiang)表(biao)面的(de)結(jie)合(he)容(rong)量(liang)，增加結(jie)合(he)物(wu)的(de)範圍(wei)而(er)改(gai)造(zao)聚(ju)苯乙(yi)烯(xi)的表(biao)面，如用(yong)化學(xue)偶(ou)聯(lian)法導入(ru)功(gong)能(neng)性(xing)醛(quan)基、酰(xian)基、烷胺(an)基等以更好(hao)地與(yu)蛋白(bai)質(zhi)，多肽(tai)的(de)羧基結(jie)合(he)，用(yong)位點(dian)導向(xiang)性(xing)共(gong)價(jia)偶(ou)聯(lian)法引(yin)入親(qin)和(he)素(su)，蛋白(bai)A，多聚(ju)賴(lai)氨(an)酸(suan)等，以牢固(gu)地捕(bu)獲(huo)蛋(dan)白(bai)或多肽(tai)，超(chao)平整聚(ju)苯乙(yi)烯(xi)表(biao)面的(de)制備，克(ke)服(fu)了表(biao)面粗糙(cao)帶來的(de)不均(jun)壹性，達(da)到(dao)平均粗糙(cao)度(du)只有(you)2A+的(de)超平整平面，實(shi)現(xian)了(le)對(dui)蛋(dan)白(bai)的結(jie)合(he)容(rong)量(liang)大(da)，脫附(fu)率低(di)，孔(kong)間(jian)均壹性(xing)好(hao)，使試(shi)驗精密度達(da)5%。

應(ying)用(yong)於雙(shuang)抗(kang)體夾心法時，聚(ju)苯乙(yi)烯(xi)經射線照(zhao)射後，可以增加其(qi)吸附(fu)性能(neng)特(te)別是(shi)對(dui)免(mian)疫(yi)球蛋(dan)白(bai)的吸(xi)附(fu)性能(neng)。近(jin)年(nian)美(mei)國(guo)Corning公司(si)研制(zhi)成功表(biao)面經琥(hu)珀(po)酰(xian)亞胺(an)酯活(huo)化酶標(biao)板(ban)，其(qi)質(zhi)量(liang)達(da)到(dao)氨(an)基活(huo)化相(xiang)似水平。

5）、分析方法的創(chuang)新 如同步ELISA法測(ce)定(ding)多種抗體是(shi)將抗(kang)原包被在(zai)與微(wei)孔相(xiang)匹(pi)配的釘(ding)板(ban)的釘(ding)子上(shang)，蓋上(shang)釘(ding)板(ban)的同時與(yu)微(wei)孔內(nei)的所(suo)需標本(ben)、試(shi)劑反應(ying)，是(shi)又壹種改良ELISA。利用(yong)抗體和抗(kang)抗(kang)體能(neng)形(xing)成多層(ceng)復(fu)合物(wu)的(de)特性，將常(chang)規二步溫(wen)育(yu)法改為(wei)壹步溫(wen)育(yu)測(ce)定(ding)法，使檢(jian)測(ce)時間(jian)大(da)為縮短(duan)，現(xian)在(zai)已廣(guang)為應(ying)用(yong)。