各(ge)種PCR概(gai)述匯(hui)總如(ru)下:
1、常規(gui)PCR:
直(zhi)接(jie)PCR是(shi)指直(zhi)接(jie)從(cong)樣品(pin)擴增目標DNA,無需進(jin)行(xing)核酸(suan)分(fen)離(li)純化。
2、熱啟動(dong)PCR:
熱啟動(dong)PCR常用於增強(qiang)PCR擴(kuo)增(zeng)的(de)特(te)異(yi)性(xing)。該方法主(zhu)要(yao)利用抗(kang)體(ti)、親合(he)配體(ti)、適(shi)體(ti)或化學修飾物(wu)等(deng)酶修飾酶(mei),來(lai)抑(yi)制(zhi)室溫下的DNA聚合酶(mei)的活(huo)性(xing)。這種修飾使(shi)得(de)在PCR體(ti)系配制(zhi)階(jie)段(duan)引物與模(mo)板(ban)、引物與引物之前的結合能力(li)降低(di),從(cong)而避免了(le)非(fei)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增。
3、巢式PCR:
巢式(shi)PCR是(shi)標準PCR的(de)壹種演變,其(qi)增強(qiang)了(le)反應特(te)異(yi)性(xing)和(he)目標擴增子的產(chan)量。
4、快速PCR:
在快速PCR中,通過(guo)縮減(jian)PCR步驟(zhou)所(suo)需時間(jian)來(lai)完成(cheng)更(geng)快的擴增,且不(bu)會影(ying)響(xiang)擴(kuo)增(zeng)產量和(he)效率。快速循環條件尤(you)其適(shi)用於具有高(gao)擴(kuo)增(zeng)能力(li)的DNA聚合酶(mei),這類聚合酶(mei)在每(mei)個(ge)結合中(zhong)可(ke)引入(ru)更(geng)多的核苷(gan)酸(suan)。
5、高(gao)GC含(han)量(liang)PCR:
具有高(gao)GC含(han)量(liang)(>65%)的(de)DNA模(mo)板(ban)由(you)於G和(he)C堿基(ji)間(jian)的(de)強氫鍵影響(xiang),比(bi)較(jiao)難(nan)以(yi)擴(kuo)增(zeng)。富(fu)含(han)GC的(de)序(xu)列(lie)同時也涉(she)及二(er)級(ji)結構。因(yin)此(ci),富(fu)含(han)GC的(de)序(xu)列(lie)可(ke)導致(zhi)DNA聚合酶(mei)沿(yan)模板(ban)擴(kuo)增時(shi)“卡頓"並幹擾(rao)DNA合(he)成(cheng)。
6、多重 PCR:
多重PCR可(ke)在同(tong)壹PCR反應管中同(tong)時擴(kuo)增多個不(bu)同的(de)片段(duan)。多種PCR不(bu)僅意味著節省(sheng)時間、試劑和(he)樣品(pin),還能夠同時對比(bi)多個擴增(zeng)子(zi)
7、長(chang)片段(duan) PCR:
長(chang)片段(duan)PCR通常(chang)是(shi)指擴(kuo)增大於5kb的DNA片段(duan)。長(chang)片段(duan)PCR傳統上使(shi)用 Taq DNA 聚合酶(mei)(用於快速延伸(shen))和(he)高(gao)保真(zhen)酶(mei)(用於提高(gao)準確(que)性(xing))的混(hun)合(he)物。
8、定(ding)量PCR:
序(xu)列的擴增(zeng)程度(du)(得(de)率)取(qu)決於(yu)模(mo)板(ban)起(qi)始(shi)量(liang),PCR常用於對樣品(pin)中的DNA進(jin)行(xing)定(ding)量,其(qi)中,最(zui)常(chang)見的應用是(shi) 基因(yin)表(biao)達(da)定(ding)量。