鰒(fu)發光桿菌說(shuo)明書

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鰒(fu)發光桿菌說(shuo)明書 培(pei)養溫(wen)度：  35-37℃　英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng)：Photobacterium leiognathi　培(pei)養保藏(zang)法:培(pei)養後於(yu)4—6℃冰箱(xiang)內(nei)保存。
培(pei)養及(ji)打(da)管說明
1、鰒(fu)發光桿菌說(shuo)明書安瓿瓶(ping)開封(feng)：用浸(jin)過(guo)75％酒(jiu)精(jing)的(de)脫(tuo)脂棉擦凈(jing)安瓿管，用火(huo)焰加(jia)熱(re)其(qi)頂(ding)端，滴(di)少(shao)量無(wu)菌(jun)水(shui)至(zhi)加(jia)熱(re)頂(ding)端(duan)使(shi)之(zhi)破裂(lie)，用銼(cuo)刀或者鑷(nie)子敲下(xia)已(yi)破(po)裂的安瓿管頂端。
2、菌(jun)株(zhu)恢復培(pei)養：用無(wu)菌(jun)吸管吸取(qu)0.3--0.5ml適(shi)宜的(de)液體培(pei)養基，滴(di)入(ru)安瓿管內(nei)，輕輕振(zhen)蕩，使(shi)凍幹菌(jun)體溶(rong)解(jie)呈(cheng)懸浮(fu)狀。吸(xi)取(qu)全(quan)部(bu)菌(jun)體(ti)懸浮(fu)液，移植(zhi)於1-2支(zhi)建(jian)議(yi)的培(pei)養基試(shi)管中(zhong)，並在(zai)建(jian)議(yi)的條件(jian)下(xia)培(pei)養。
3、註意(yi)事(shi)項(xiang)：菌種(zhong)活化前(qian)，請(qing)將安瓿管保存在(zai)6-10℃的(de)環境下(xia)，某些(xie)菌(jun)種(zhong)經(jing)過(guo)冷凍幹燥(zao)保存後(hou)，延(yan)遲(chi)期較(jiao)長，需(xu)要連續(xu)兩次繼(ji)代(dai)培(pei)養才能正(zheng)常生長(chang)
4、復蘇(su)後(hou)的(de)菌種(zhong)在傳(chuan)1-2代(dai)後使(shi)用。
5、暫不(bu)啟(qi)開的(de)安瓿及(ji)復蘇(su)後(hou)需(xu)保藏(zang)的斜(xie)面應(ying)於4℃中(zhong)保藏(zang)。
影響(xiang)質(zhi)量的(de)因(yin)素：
⒈ 鰒(fu)發光桿菌說(shuo)明書培(pei)養基
構(gou)成(cheng)孢子培(pei)養基的(de)原(yuan)材(cai)料，其(qi)產地(di)、品種(zhong)、加(jia)工(gong)方(fang)法(fa)和(he)用量(liang)對(dui)孢(bao)子質(zhi)量都有壹(yi)定的影(ying)響(xiang)。為(wei)了保證孢子培(pei)養基的(de)質(zhi)量，斜(xie)面培(pei)養基所用的(de)主(zhu)要(yao)原(yuan)材(cai)料，糖、氮、磷含(han)量需(xu)經(jing)過(guo)化學分(fen)析及(ji)搖(yao)瓶發酵(jiao)試(shi)驗(yan)合格(ge)後才能使(shi)用。制備培(pei)養基時要嚴(yan)格(ge)控制滅(mie)菌(jun)後的培(pei)養基質(zhi)量。斜(xie)面培(pei)養基使(shi)用前(qian)，需(xu)在適(shi)當(dang)溫(wen)度下(xia)放置(zhi)壹(yi)定的時間，使(shi)斜(xie)面無(wu)冷凝(ning)水(shui)呈(cheng)現(xian)，水(shui)分(fen)適(shi)中(zhong)有利(li)於(yu)孢(bao)子生長(chang)。 
⒉ 培(pei)養溫(wen)度和(he)濕(shi)度 
微生物在(zai)壹(yi)個較(jiao)寬(kuan)的(de)溫(wen)度範(fan)圍內(nei)生長(chang)。但(dan)是(shi)，要(yao)獲(huo)得(de)高質(zhi)量的(de)孢(bao)子，其(qi)適(shi)溫(wen)度區間(jian)很狹(xia)窄(zhai)。壹(yi)般來說(shuo)，提(ti)高培(pei)養溫(wen)度，可使(shi)菌體代(dai)謝活(huo)動加(jia)快，縮短(duan)培(pei)養時間，但(dan)是(shi)，菌(jun)體(ti)的(de)糖代(dai)謝和(he)氮代(dai)謝的(de)各種酶類，對溫(wen)度的敏(min)感(gan)性是不(bu)同(tong)的(de)。因(yin)此(ci)，培(pei)養溫(wen)度不(bu)同(tong)，菌(jun)的(de)生理(li)狀態也(ye)不(bu)同(tong)，如(ru)果(guo)不(bu)是(shi)用適(shi)溫(wen)度培(pei)養的孢(bao)子，其(qi)生產能力就(jiu)會(hui)下(xia)降。
⒊ 培(pei)養時間和(he)冷藏(zang)時間
絲(si)狀菌(jun)在(zai)斜(xie)面培(pei)養基上(shang)的生長(chang)發育過(guo)程(cheng)可分(fen)為(wei)五個階(jie)段(duan)：① 孢子發芽(ya)和(he)基(ji)內(nei)菌絲(si)生長(chang)階(jie)段(duan)；② 氣生菌(jun)絲(si)生長(chang)階(jie)段(duan)；③ 孢子形成(cheng)階(jie)段(duan)；④ 孢子成熟(shu)階(jie)段(duan)；⑤ 斜(xie)面衰(shuai)老(lao)菌(jun)絲(si)自溶(rong)階(jie)段(duan)。
斜(xie)面孢(bao)子的冷藏(zang)時間，對(dui)孢子質(zhi)量也(ye)有(you)影(ying)響(xiang)，其(qi)影(ying)響(xiang)隨(sui)菌(jun)種(zhong)不(bu)同(tong)而(er)異，總的(de)原(yuan)則是(shi)冷藏(zang)時間宜短(duan)不(bu)宜長(chang)。
灰(hui)色產色(se)鏈(lian)黴(mei)菌　Streptomyces griseochromogenes

丙氨(an)菌(jun)素鏈(lian)黴(mei)菌　Streptomyces alanosinicus

未知諾卡氏(shi)菌(jun)　Nocardia ignorata

極(ji)暗黃(huang)鏈黴(mei)菌　Streptomyces fulvissimus

釘斑鏈黴(mei)菌　Streptomyces clavifer

香川鏈(lian)黴(mei)菌　Streptomyces kagawaensis

生米(mi)卡(ka)鏈(lian)黴(mei)菌　Streptomyces mycarofaciens

肉桂（地(di)）鏈(lian)黴(mei)菌　Streptomyces cinnamonensis

曉(xiao)多(duo)鏈黴(mei)菌　Streptomyces showdoensis

金羊(yang)毛(mao)鏈黴(mei)菌　Streptomyces chrysomallus
萘啶(ding)每支添(tian)加(jia)於(yu)225ml HB4150、HB4192中(zhong)（SN、GB標準(zhun)）10mg/支*5

添(tian)加(jia)於(yu)225ml HB4160中(zhong)制成LB14.5mg*5

添(tian)加(jia)於(yu)225ml HB4160中(zhong)制成LB12.7mg*5

添(tian)加(jia)於(yu)200ml HB4160中(zhong)制成LB25mg*5

每支添(tian)加(jia)於(yu) 100ml HB41553mg/支(zhi)*5

糖(tang)發酵(jiao)基(ji)礎(chu)肉(rou)湯   適(shi)用於(yu)微生物檢(jian)驗(yan)中(zhong)各種糖發酵(jiao)實(shi)驗(yan)，無(wu)菌(jun)加(jia)入(ru)各種糖醇類物質(zhi)（SN標準(zhun)）Bromcresol Purple Broth Base250

添(tian)加(jia)於(yu)225ml HB4160中(zhong)制成LB14.0mg*5

黃(huang)素每支添(tian)加(jia)於(yu)225ml HB4150、HB4192中(zhong)（SN、GB標準(zhun)）3.75mg/支*5

胰酪(lao)腖(dong)大(da)豆(dou)酵(jiao)母浸(jin)膏瓊(qiong)(TSA-YE)   用於(yu)單(dan)增(zeng)李氏(shi)菌(jun)的分(fen)純(chun)，培(pei)養，可用於(yu)做(zuo)7%羊(yang)血瓊(qiong)（SN標準(zhun)）Trypticase Soy-Yeast Extract Agar250

李氏(shi)菌(jun)選擇性培(pei)養基基(ji)礎(chu)(MMA)  用於(yu)單(dan)增(zeng)李氏(shi)菌(jun)選擇性分(fen)離（SN標準(zhun)）Modified Mcbride Agar Base250

李氏(shi)菌(jun)增菌肉(rou)湯(LB1,LB2)基(ji)礎(chu)    添(tian)加(jia)奈(nai)啶，黃(huang)素，即(ji)為(wei)LB1，LB2，用於(yu)李(li)氏(shi)菌(jun)二步(bu)增菌(jun)（GB標準(zhun)）Listeria Enrichment Broth Base250

七葉苷培(pei)養基   生化試(shi)驗(yan)培(pei)養基，用於(yu)細菌七葉苷利(li)用試(shi)驗(yan)（SN標準(zhun)）Esculin Medium10
鰒(fu)發光桿菌說(shuo)明書雙(shuang)(2-羥乙(yi)基)二(er)硫代(dai)氨基(ji)甲(jia)酸鋅(xin)鹽(II) Bis(2-hydroxyethyl)dithiocarbamic Acid Zinc(II) Salt >98.0%(T)　25G

雙(shuang)(2-羥乙(yi)基)二(er)硫代(dai)氨基(ji)甲(jia)酸銅(II) Copper(II) Bis(2-hydroxyethyl)dithiocarbamate >98.0%(T)　25G

雙(shuang)(2-氯(lv)乙(yi)基)醚(mi) Bis(2-chloroethyl) Ether >99.0%(GC)　25G

雙(shuang)(2-氯(lv)乙(yi)基)醚(mi) Bis(2-chloroethyl) Ether >99.0%(GC)　500G

雙(shuang)(2,4-*)二(er) Bis(2,4-dinitrophenyl) Disulfide >80.0%(LC)　25G

薯蕷(yu)皂(zao)素 DIOSGENIN(SAPOGENIN)(P)　100mg

薯(shu)蕷(yu)皂(zao)素 DIOSGENIN(SAPOGENIN)(P)　10mg
菌(jun)種(zhong)的培(pei)養：
1、鰒(fu)發光桿菌說(shuo)明書菌(jun)種是(shi)指(zhi)食(shi)用菌(jun)菌(jun)絲(si)體及(ji)其(qi)生長(chang)基(ji)質(zhi)組成的繁殖(zhi)材(cai)料。菌種分(fen)為(wei)母種（壹(yi)級種）、原(yuan)種（二(er)級種）和(he)栽(zai)培(pei)種（三(san)級種）三(san)級。工(gong)業(ye)發酵(jiao)的(de)有(you)用菌(jun)種(zhong)，其(qi)篩(shai)選步(bu)驟(zhou)包括(kuo)菌(jun)種(zhong)分(fen)離、初(chu)篩和(he)復篩(shai)。
2、挑選具有(you)某(mou)種能力的(de)有(you)用菌(jun)種(zhong)，也(ye)稱種(zhong)子制備，是(shi)指(zhi)菌(jun)種(zhong)在(zai)壹(yi)定條件(jian)下(xia)，經(jing)過(guo)擴(kuo)大(da)培(pei)養成為(wei)具(ju)有壹(yi)定數量(liang)和(he)質(zhi)量的(de)純(chun)生產菌(jun)種(zhong)的制備過(guo)程(cheng)。以作接入(ru)發酵(jiao)罐(guan)中(zhong)進壹(yi)步(bu)擴(kuo)大(da)菌(jun)體(ti)量(liang)及(ji)合(he)成產物之(zhi)用。
3、種(zhong)子制備包(bao)括(kuo)孢子制備和(he)菌(jun)絲(si)體制備 菌(jun)種(zhong)制備。
4、保存在(zai)沙(sha)土管或冷凍管中(zhong)的生產菌(jun)種(zhong)，用無(wu)菌(jun)手續挑取(qu)少(shao)許，接(jie)入(ru)瓊(qiong)脂斜(xie)面培(pei)養基上(shang)，在25℃（或較(jiao)高溫(wen)度）下(xia)培(pei)養5～7天（或較(jiao)長時間。所得(de)孢(bao)子還需(xu)進壹(yi)步(bu)用較(jiao)大(da)表(biao)面(mian)積的(de)固(gu)體(ti)培(pei)養基以獲(huo)得(de)更(geng)多(duo)孢子（對於(yu)黴(mei)菌類孢子制備，多(duo)數采(cai)用大(da)米(mi)、小米(mi)之(zhi)類的天然(ran)培(pei)養基）。
5、將(jiang)培(pei)養成熟(shu)的斜(xie)面孢(bao)子制成懸(xuan)浮(fu)液，接種(zhong)到扁瓶固(gu)體(ti)培(pei)養基上(shang)，於25～28℃培(pei)養14天。將成(cheng)熟(shu)的扁瓶孢(bao)子於真(zhen)空(kong)中(zhong)抽幹(gan)，使(shi)水(shui)分(fen)降至10%以下(xia)，並放入(ru) 4℃冰箱中(zhong)備用。壹(yi)次制得(de)的(de)孢(bao)子瓶可在(zai)生產上(shang)延(yan)續(xu)使(shi)用半(ban)年(nian)左右(you)。
6、如(ru)果(guo)有些生產菌(jun)種(zhong)不(bu)產孢(bao)子，如(ru)赤(chi)黴(mei)素產生菌(jun)或產孢(bao)子不(bu)多(duo)的，則(ze)可采(cai)用搖(yao)瓶(ping)液體培(pei)養制得(de)菌(jun)絲(si)體，作種子罐的(de)種子。種子罐的(de)目的(de)是(shi)使(shi)接入(ru)有限的孢(bao)子或菌(jun)絲(si)體迅(xun)速(su)發芽(ya)、生長(chang)、繁(fan)殖(zhi)成(cheng)大(da)量(liang)菌(jun)體(ti)。其(qi)中(zhong)的培(pei)養基組分(fen)應(ying)是(shi)易(yi)於被菌(jun)體利(li)用的(de)碳(tan)源(yuan)（如(ru)葡(pu)萄(tao)糖(tang)）和(he)氮源（如(ru)玉米(mi)漿(jiang)），及(ji)無(wu)機(ji)鹽(如(ru)磷(lin)酸鹽)等(deng)。作為(wei)發酵(jiao)罐(guan)的(de)種子應生命(ming)力旺(wang)盛、染色(se)深(shen)、菌絲(si)粗壯(zhuang)，無(wu)雜(za)菌及(ji)異常菌(jun)體(ti)。接種(zhong)量壹(yi)般在10%～20%。