5min極速RNA提取試劑(ji)盒(he)

公(gong)司(si)產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研研究使用、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷！

商品(pin)屬性(xing)

產品(pin)介紹：
本試劑(ji)盒(he)采用(yong)的裂解液(ye)，可(ke)快速可靠的從(cong)細(xi)胞(bao)、動(dong)物(wu)組織、植物組織、病(bing)毒(du)液(ye)樣(yang)本、抗凝(ning)全(quan)血、培養(yang)細(xi)菌(jun)中(zhong)純(chun)化出(chu)高(gao)純(chun)度的總(zong) RNA。該(gai)試劑(ji)盒(he)是(shi)目(mu)前(qian)國際上操作(zuo)步驟最(zui)少(shao)、用(yong)時最(zui)短(duan)的(de) RNA 提取試劑(ji)盒(he)（最(zui)快(kuai) 5 分鐘）。應(ying)用本(ben)試劑(ji)盒(he)提取的 RNA 可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)於(yu)反(fan)轉(zhuan)錄、基(ji)因(yin)克(ke)隆(long)、定(ding)量(liang)檢測、文庫(ku)構(gou)建(jian)、雜交(jiao)等(deng)多種分子(zi)生(sheng)物學實驗。

註意事(shi)項：
(1) 本試劑(ji)盒(he)中的(de) Washing Buffer 中已(yi)經(jing)加(jia)乙(yi)醇，無(wu)需(xu)單(dan)獨添(tian)加(jia)。
(2) RNA LB1 和(he) RNA BB2 均(jun)具(ju)有(you)腐(fu)蝕(shi)性(xing)，註意防(fang)護(hu)。操作(zuo)方法(fa)
（1）裂解/上(shang)柱（1.5ml EP 管(guan)中處(chu)理(li)）培養(yang)細(xi)胞(bao)：消(xiao)化完(wan)畢後，離(li)心收集(ji)細(xi)胞(bao)沈(chen)澱，用 20~30μl 水(shui)或(huo)PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)沈(chen)澱（務必重(zhong)懸充(chong)分）。加(jia)入(ru) 120μl RNA LB1 漩(xuan)渦混勻(yun) 30s(有(you)未(wei)溶解(jie)的細(xi)胞(bao)團(tuan)塊(kuai)，用槍(qiang)頭吹打(da)，助溶解(jie))，加(jia)入(ru) 500μlRNA BB2 上(shang)下顛倒混合(he)均(jun)勻(yun)，倒(dao)入吸(xi)附柱中(zhong)。13000rpm 離(li)心 30s，倒掉(diao)廢(fei)液(ye)，進(jin)行(xing)後續洗滌/洗脫(tuo)步(bu)驟。
組織樣(yang)品(pin)----采用(yong)研缽(bo)進(jin)行(xing)研磨：用(yong)液(ye)氮(dan)研磨粉碎組織樣(yang)本，將(jiang)研磨粉碎的(de)樣(yang)品(pin)加(jia)入(ru)到(dao) 200μl RNA LB1 中(zhong)，漩(xuan)渦混合(he)均(jun)勻(yun) 1min（有(you)塊(kuai)狀組織未(wei)溶解(jie)的，要使用槍(qiang)頭吹打(da)，助消(xiao)化），加(jia)入(ru) 500μl RNABB2 上(shang)下顛倒混合(he)均(jun)勻(yun)，13000rpm 離(li)心 15s。將上(shang)清(qing)倒(dao)入(ru)吸附柱中(zhong)（動(dong)作(zuo)需(xu)輕柔(rou)，勿(wu)將未(wei)消(xiao)化的組織塊(kuai)倒入(ru)吸(xi)附柱），13000rpm 離(li)心 30s，倒掉(diao)廢(fei)液(ye)，進(jin)行(xing)後續洗滌/洗脫(tuo)步(bu)驟。
組織樣(yang)品(pin)----采用(yong)鋼(gang)珠進(jin)行(xing)研磨：將(jiang)組織樣(yang)品(pin)加(jia)入(ru)到(dao) 300μl RNALB1 中(zhong)（1.5ml EP 管），並加(jia)入(ru)幾粒(li)鋼(gang)珠，置於(yu)組織研磨儀(yi)中，研磨 1~2min。向(xiang)研磨後的勻漿(jiang)液(ye)中(zhong)加(jia)入(ru) 750μl RNA BB2，漩(xuan)渦混勻(yun)5s，13000rpm 離(li)心 1min。用 1ml 吸(xi)頭(tou)吸(xi)取 750μl 上清(qing)液(ye)到(dao)吸附柱中(zhong)。13000rpm 離(li)心 30s，倒掉(diao)廢(fei)液(ye)，進(jin)行(xing)後續洗滌/洗脫(tuo)步(bu)驟。註意：植物組織的勻漿效果通常(chang)較(jiao)動(dong)物(wu)組織差壹些，所以壹般(ban)推薦(jian)采用液(ye)氮(dan)條(tiao)件下研缽(bo)來研磨。在(zai)采用鋼(gang)珠研磨的(de)條(tiao)件下務必將(jiang)組織研磨粉碎，否(fou)則(ze)會導(dao)致(zhi)產率降(jiang)低(di)。病(bing)毒(du)液(ye) /體(ti)液(ye) /血(xue)清 /血漿：吸取 150μl 病(bing)毒(du)液(ye)/體(ti)液(ye)樣(yang)品(pin)到加(jia)入(ru)到(dao)120μl RNA LB1 中(zhong)，漩(xuan)渦混合(he)均(jun)勻(yun) 30s。直(zhi)接(jie)加(jia)入(ru) 500μl RNA BB2中(zhong)，漩(xuan)渦混合(he)均(jun)勻(yun) 15s。倒(dao)入吸(xi)附柱中(zhong)，13000rpm 離(li)心 30s，倒掉(diao)廢(fei)液(ye)，進(jin)行(xing)後續洗滌/洗脫(tuo)步(bu)驟。
培養(yang)細(xi)菌(jun)：收(shou)集(ji)菌(jun)體(ti)後，用 20~30μl 水重(zhong)懸菌(jun)體(ti)（務必重(zhong)懸充(chong)分），加(jia)入(ru) 120μl RNA LB1 漩(xuan)渦混勻(yun) 30s，加(jia)入(ru) 500μl RNA BB2 上(shang)下顛倒混合(he)均(jun)勻(yun)，倒(dao)入吸(xi)附柱中(zhong)。13000rpm 離(li)心 30s，倒掉(diao)廢(fei)液(ye)，進(jin)行(xing)後續洗滌/洗脫(tuo)步(bu)驟。
（2） 洗滌和(he)洗脫(tuo)
向吸附柱中(zhong)加(jia)入(ru) 500μl Washing Buffer，13000rpm 離(li)心 15s。重(zhong)復(fu)此步驟壹次(ci)。 將吸(xi)附柱重(zhong)新放(fang)回離(li)心機，13000rpm 空離(li)心1min，將殘(can)留的(de)乙(yi)醇甩(shuai)幹(gan)。 將(jiang)吸附柱芯(xin)放(fang)入(ru)到 2mL NucleaseFree 收集(ji)管(guan)中(zhong)，向(xiang)吸(xi)附柱芯(xin)中加(jia)入(ru) 20~50μl Nuclease Free H2O，室(shi)溫(wen)放(fang)置(zhi) 1min，13,000rpm 離(li)心 1min，洗脫(tuo)液(ye)即(ji)為提取的 RNA，冷凍(dong)保(bao)存。

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