1. 血(xue)清:室(shi)溫(wen)血(xue)液(ye)自(zi)然凝固(gu)10-20分(fen)鐘(zhong),離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。
仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing),保(bao)存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)出(chu)現沈(chen)澱(dian),應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。
2. 血(xue)漿(jiang):應(ying)根(gen)據(ju)標(biao)本的(de)要(yao)求選(xuan)擇(ze)EDTA或(huo)檸檬(meng)酸(suan)鈉作為抗凝劑,混(hun)合(he)10-20分(fen)鐘(zhong)後(hou),離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing),保(bao)存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈(chen)澱(dian)形(xing)成,應(ying)該(gai)再次(ci)離(li)心(xin)。
3. 尿液(ye):用(yong)無菌(jun)管收(shou)集(ji),離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing),保(bao)存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈(chen)澱(dian)形(xing)成,應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。胸腹水、腦(nao)脊液(ye)參(can)照實(shi)行。
4. 細(xi)胞(bao)培養(yang)上清(qing):檢測分(fen)泌(mi)性的成份時,用(yong)無菌(jun)管收(shou)集(ji)。離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。檢測細(xi)胞(bao)內的成份時,用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye),細(xi)胞(bao)濃度達(da)到(dao)100萬(wan)/ml左(zuo)右(you)。通(tong)過反復(fu)凍融(rong),以(yi)使(shi)細(xi)胞(bao)破壞並(bing)放(fang)出(chu)細(xi)胞(bao)內成份。離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。保(bao)存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈(chen)澱(dian)形(xing)成,應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。
5. 組織標(biao)本:切割(ge)標(biao)本後(hou),稱(cheng)取重量(liang)。加(jia)入(ru)壹定(ding)量(liang)的PBS,PH7.4。用(yong)液(ye)氮(dan)迅(xun)速冷凍保(bao)存(cun)備(bei)用。標(biao)本融(rong)化(hua)後(hou)仍然保(bao)持(chi)2-8℃的溫度。加(jia)入(ru)壹定(ding)量(liang)的PBS(PH7.4),用(yong)手(shou)工或(huo)勻(yun)漿(jiang)器將標(biao)本勻(yun)漿(jiang)充(chong)分(fen)。離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。分(fen)裝後(hou)壹份待(dai)檢測,其(qi)余冷凍備(bei)用。
6. 標(biao)本采集(ji)後(hou)盡早進(jin)行提(ti)取(qu),提(ti)取(qu)按相關文(wen)獻進(jin)行,提(ti)取(qu)後(hou)應(ying)盡快進(jin)行實(shi)驗(yan)。若(ruo)不(bu)能馬(ma)上(shang)進(jin)行試驗(yan),可(ke)將標(biao)本放(fang)於-20℃保(bao)存(cun),但應(ying)避(bi)免反復(fu)凍融(rong).
7. 不(bu)能檢測含NaN3的樣品(pin),因(yin)NaN3抑(yi)制辣根(gen)過氧化(hua)物酶的(de)(HRP)活(huo)性。