MDA-MB-436人(ren)乳腺癌細胞(bao)

公司產品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)、不得用(yong)於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)！

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理(li)僅(jin)供參(can)考，具體(ti)操作步驟以(yi)隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書(shu)為主。將(jiang)含有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細胞(bao)懸(xuan)液加入含適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜(ye)（或將細胞(bao)懸(xuan)液加入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第(di)二(er)天換液並檢(jian)查(zha)細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可(ke)進行傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

    a、棄去培(pei)養(yang)上清(qing)，用(yong)不含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消化液浸潤(run)所(suo)有(you)細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而定），然後在顯微鏡(jing)下觀察(cha)細胞(bao)消化情(qing)況，若細胞(bao)大(da)部分變圓並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿回(hui)操作臺，輕敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消化。輕輕打(da)勻後裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上(shang)清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻。        

     c、將細胞(bao)懸(xuan)液按1:2比例分到新(xin)的含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新皿中(zhong)或者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良好時，可(ke)進行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶為例；a、收集(ji)細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進行細胞(bao)計(ji)數。

     b、根據細胞(bao)數量(liang)加入無血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使(shi)細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註意凍(dong)存(cun)管(guan)做好標識(shi)。將凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入液氮灌儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便下次(ci)拿取(qu)。  

三、培(pei)養(yang)註意事(shi)項(xiang) 

1. 收到細胞(bao)後(hou)首先觀察(cha)細胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完好，培(pei)養(yang)液是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若有(you)上(shang)述現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯系。

2. 仔細閱讀細胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了解細胞(bao)相關信息(xi)，如(ru)細胞(bao)形(xing)態、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)壹(yi)致，若由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹致而導致細胞(bao)出(chu)現問(wen)題(ti)，責任(ren)由(you) 客戶自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面，顯微鏡(jing)下觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態。因運輸問題(ti)，部分細胞(bao)由(you)於(yu)溫度(du) 變化及劇烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常現象(xiang)。觀察(cha)好細胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸浮細胞(bao)直(zhi)接混勻收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細胞(bao)，並接(jie)種到新的培(pei)養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)進行培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相同條件(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收到細胞(bao)後(hou)前 3 天各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態，便於(yu)和我(wo)司技(ji)術部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸的原因，個別敏(min)感(gan)細胞(bao)會(hui)出(chu)現不(bu)穩定的情(qing)況，請及(ji)時(shi)和我們(men)聯系，告知細胞(bao) 的具體(ti)情(qing)況，以(yi)便我們(men)的技術人(ren)員跟蹤回訪直(zhi)至問(wen)題解決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸用(yong)的培(pei)養(yang)基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能再(zai)用(yong)來培(pei)養(yang)細胞(bao)，請(qing)換用(yong)按照說(shuo)明書(shu)細胞(bao)培(pei) 養(yang)條件(jian)新(xin)配制(zhi)的培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收到細胞(bao)後(hou)第壹次傳(chuan)代建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公司正在出(chu)售(shou)的產品：

Phospho-NMDAR2A (Tyr1246)： 0酸(suan)化谷酸(suan)受體(ti)2A抗(kang)體(ti) F11 Others Human 人(ren) F11 / FXI 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照)

CL-0103Hep G2(人(ren)肝癌細胞(bao))5×106cells/瓶×2 大(da)鼠羧肽(tai)酶(mei)B1(CPB1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 IL-1sR II (Human soluble interleukin-1 receptor II )  人(ren)白介素(su)1可(ke)溶性受(shou)體(ti)Ⅱ 96T

NKG2D： NK細胞(bao)受(shou)體(ti)2D抗(kang)體(ti) 大(da)鼠腎上腺嗜鉻細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao);PC-12 [PC12]

RTE(大(da)鼠氣管(guan)上(shang)皮(pi)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 A375(人(ren)類惡性(xing)黑色(se)素(su)瘤(liu)) 大(da)鼠羧肽(tai)酶(mei)A3(CPA3)ELISA試(shi)劑(ji)盒 RBP-4  大(da)鼠結(jie)合蛋(dan)白4 96T

NRF-1： 核呼(hu)吸(xi)因子(zi)-1抗(kang)體(ti) 人(ren)肝癌細胞(bao);Hep G2 [HepG2]

人(ren)結(jie)直腸(chang)癌細胞(bao);T84 人(ren)白介素(su)17(IL-17)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 ORX-A(orexin-A) 增食(shi)欲素(su)-A/欲激素(su)A抗(kang)原 0.5mg

IFI44： 幹擾(rao)素(su)誘導蛋(dan)白44抗(kang)體(ti) 人(ren)卵巢腺癌細胞(bao);SK-OV-3

RD(人(ren)惡性胚(pei)胎(tai)橫紋肌(ji)瘤細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照) 人(ren)白介素(su)16(IL-16)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 OTR(oxytocin receptor)受體(ti) 0.5mg

ITPR3： 5-三0酸(suan)肌醇受(shou)體(ti)3抗(kang)體(ti) 人(ren)腦膜細胞(bao)HMC

CCL1 Protein Mouse 重(zhong)組小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋(dan)白 (Fc 標(biao)簽) 人(ren)白介素(su)15(IL-15)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 OXR (Orexin receptor) 食(shi)欲素(su)受(shou)體(ti)(多(duo)肽) 0.5mg

MDA-MB-436人(ren)乳腺癌細胞(bao)RCCD1： RCCD1蛋(dan)白抗(kang)體(ti) tTA基(ji)因修(xiu)飾(shi)的小鼠畸胎(tai)瘤(liu)細胞(bao)(B類(lei));P19-CAG-tTA-1D3

CL-0328CEM/C1(人(ren)急性淋巴(ba)細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao))5×106cells/瓶×2 大(da)鼠不對(dui)稱(cheng)二甲基(ji)精(jing)酸(suan)(ADMA)ELISA試(shi)劑(ji)盒 MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1)  人(ren)骨髓抑制(zhi)因子(zi)1 96T

phospho-RAD9(Ser328)： 0酸(suan)化細胞(bao)周期(qi)檢(jian)查(zha)控制(zhi)蛋(dan)白質抗體(ti) GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒 HCMV gB ECD 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照)

人(ren)毛細胞(bao)總RNAHHDPC NA 大(da)鼠補體(ti)因子(zi)H(CFH)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ADP(Human adiponectin)  人(ren)脂(zhi)聯素(su) 96T

phospho-REC8(Ser251)： 0酸(suan)化減(jian)數分裂重(zhong)組蛋(dan)白家族(zu)REC8抗體(ti) SV40轉化的非洲綠猴(hou)腎細胞(bao);COS-7