MKN-45人(ren)胃(wei)癌細(xi)胞(bao)

公司產(chan)品(pin)僅(jin)供科研研究使用、不得用於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)！

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理僅(jin)供參(can)考，具(ju)體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離(li)心3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹勻。然(ran)後(hou)將所(suo)有細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換液(ye)並(bing)檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

    a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清，用不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。        

    b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化液(ye)浸(jin)潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而定），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾下培養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕(qing)打(da)勻後(hou)裝入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹勻。        

     c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分到新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良好時(shi)，可(ke)進行細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清洗壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進行細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

     b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加入(ru)無(wu)血(xue)清細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做好標識(shi)。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管(guan)位置以便(bian)下次拿(na)取。  

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事項 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否完好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否有漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述現象 發(fa)生(sheng)請(qing)及(ji)時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關信息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例(li)、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由於(yu)培養(yang)條(tiao)件不(bu)壹(yi)致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現問(wen)題，責任由 客戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸問題，部分細(xi)胞(bao)由於(yu)溫度 變化及劇(ju)烈碰亡(wang)破碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正常(chang)現象。觀察(cha)好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸浮細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新的(de)培養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用相(xiang)同(tong)條(tiao)件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客戶(hu)收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我(wo)司(si)技術部溝通 交流(liu)。由於(yu)運(yun)輸的原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現不(bu)穩定的(de)情(qing)況，請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情況，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的(de)技術人員(yuan)跟蹤回訪(fang)直至問(wen)題解決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研使用。

8. 備註：運(yun)輸用的培養(yang)基(ji) (灌液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不能(neng)再用來培養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配制的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司(si)正在(zai)出(chu)售的(de)產品(pin)：

CL-0023Ana-1(小鼠(shu)巨(ju)噬細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)水通道(dao)蛋(dan)白(bai)1(AQP-1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) 大(da)鼠(shu)Smad1  大(da)鼠(shu)Smad1 96T

H1N1 Nucleoprotein： A型(xing)流(liu)感病(bing)毒(du)核(he)蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 大(da)鼠(shu)嗜堿性(xing)粒細(xi)胞(bao)性(xing)白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao);RBL-1

SK-NEP-1(人(ren)腎(shen)母(mu)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 PT-67(病(bing)毒(du)轉(zhuan)染(ran)小鼠(shu)細(xi)胞(bao)) 大(da)鼠(shu)水通道(dao)蛋(dan)白(bai)1(AQP-1)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) NTX(Mouse cross linked N-telopeptide of type I collagen)  小鼠(shu)Ⅰ型(xing)膠原(yuan)N末端(duan)肽(tai) 96T

NCAM2： 神(shen)經(jing)細(xi)胞(bao)粘附分子2抗體(ti) 表(biao)達SV40T和EBNA1的(de)人(ren)胚(pei)腎(shen)細(xi)胞(bao);293ET

IL20 Protein Rat 重(zhong)組(zu)大(da)鼠(shu) IL20 / Ierleukin-20 蛋(dan)白(bai) 大(da)鼠(shu)水通道(dao)蛋(dan)白(bai)0(AQP-0)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) bFGF-9(Human basic fibroblast growth factor 9)  人堿性(xing)成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)因子9 96T

IL-6 (NT)： 白(bai)介(jie)素6抗體(ti) 人癌細(xi)胞(bao);MCF 7B

SCaBER(人(ren)膀胱鱗癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性對照) 人β2糖(tang)蛋(dan)白(bai)1抗體(ti)IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) RAP1A (RAS-related protein-1a precursor) Rap1A抗原(yuan) 0.2ml

IL-6： 白(bai)介(jie)素6抗體(ti) 胰島β細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml)

CXCL13 Protein Cynomolgus 重(zhong)組(zu)食蟹(xie)猴(hou) CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋(dan)白(bai) (His 標簽) 人(ren)β2糖(tang)蛋(dan)白(bai)1抗體(ti)IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) RAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta) 維(wei)受體(ti)-β抗原(yuan) 0.5mg

IFNE1： 幹(gan)擾(rao)素(su)epsilon 1蛋(dan)白(bai)抗體(ti) TGFBR3 Others Human 人 TGFBR3 / Betaglycan 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性對照)

MKN-45人(ren)胃(wei)癌細(xi)胞(bao)RPGRIP1L： 梅(mei)克(ke)爾(er)憩室綜合(he)征(zheng)相(xiang)關蛋(dan)白(bai)5抗體(ti) HPB-ALL細(xi)胞(bao)，T細(xi)胞(bao)白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao) 人(ren)前列(lie)腺(xian)癌細(xi)胞(bao)高轉(zhuan)移亞系(xi),PC-3M 1E8細(xi)胞(bao) 人(ren)心(xin)臟成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)總(zong)RNAHCF NA

GPNMB Others Human 人(ren) GPNMB / HGFIN 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性對照) 大(da)鼠(shu)半(ban)乳凝(ning)素3(GAL3)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) ADAM10(Human A Disintegrin And Metalloprotease 10)  人解(jie)整(zheng)合(he)素(su)樣金(jin)屬(shu)10 96T

Radical Fringe： β1,3-N-乙酰(xian)糖(tang)基(ji)轉(zhuan)移酶抗(kang)體(ti) 倉(cang)鼠(shu)/小鼠(shu)雜交瘤(liu)細(xi)胞(bao);145-2C11

CL-0246YAC-1(小鼠(shu)淋巴瘤(liu)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)半(ban)乳凝(ning)素2(GAL2)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) MMP11(Human matrix metalloproteinase 11)  人基(ji)質金(jin)屬(shu)11 96T

RAB3GAP1： RAB3-GTP酶(mei)激活蛋(dan)白(bai)催化亞單(dan)位1抗(kang)體(ti) FCGR2 Others Mouse 小鼠(shu) CD32 / FCGR2B 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽性對照)