SCC-9人類鱗狀(zhuang)上皮舌癌(ai)細胞(bao)

公司(si)產品僅(jin)供(gong)科研研究(jiu)使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床(chuang)診斷！

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察，待細胞(bao)回縮(suo)變圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終止(zhi)消化，再輕輕吹打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清，沈澱細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍存(cun)：

1）細胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察，待細胞(bao)回縮(suo)變圓後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終

止(zhi)消化，輕輕吹打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍存(cun)管(guan)中；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍存(cun)管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中進(jin)行(xing)長(chang)期保(bao)存(cun)。使(shi)用程(cheng)序(xu)

降溫盒(he)可直接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具體操作(zuo)步(bu)驟以隨貨產品說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖晃(huang)解凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)3 min，棄去上清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過夜(ye)（或將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換液並(bing)檢(jian)查細胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果細胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄去培(pei)養(yang)上清，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子的(de)PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中，使消化液浸潤所(suo)有(you)細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於37℃培(pei)養(yang)箱中消化1-2 min（視細胞(bao)情況(kuang)而定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下觀察細胞(bao)消化情況，若細胞(bao)大(da)部分(fen)變圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶後加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止(zhi)消化。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍存(cun)：待細胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時(shi)，可進行(xing)細胞(bao)凍存(cun)。下面 T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝入(ru)無菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)4 min，棄去上清液，用(yong)PBS清洗壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數量加入(ru)無血(xue)清細胞(bao)凍存(cun)液(ye)，使細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每(mei)支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記錄凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以便(bian)下次拿取。

公司(si)正在出售(shou)的(de)產品：

RIN-m5f(大(da)鼠(shu)胰島β細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 SGC7901(胃(wei)腺(xian)癌(ai)細胞(bao)) 大(da)鼠(shu)鐵蛋白(FE)ELISA 試(shi)劑盒(he) Alpha1-MG  大(da)鼠(shu)α1微球蛋白 96T

Mine adenosyltransferase： 蛋酸腺(xian)苷轉移酶抗體 人細胞(bao);Hela S3 [HeLaS3]

LIF Protein Human 重組人 LIF 蛋白 (Fc 標簽) 大(da)鼠(shu)調節(jie)轉錄(lu)肽(tai)(CA)ELISA試(shi)劑盒(he) Collagenase II(Mouse Collagenase Type II)  小(xiao)鼠(shu)膠原(yuan)酶(mei)II 96T

phospho-MAPK11(Thr180+Tyr182)： 0酸化原(yuan)活(huo)化的(de)蛋白激(ji)酶p38β抗體 CCL21 Others Human 人 CCL21 / 6Ckine 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆蟲細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照)

小(xiao)鼠(shu)腸(chang)靜(jing)脈(mai)內(nei)皮細胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)調節(jie)激活(huo)正常T-細胞(bao)表達(da)分(fen)泌(mi)因子(RAES)ELISA試劑(ji)盒(he) MDC/CCL22(Human Macrophage-Derived Chemokine)  人(ren)巨(ju)噬(shi)細胞(bao)來源(yuan)的(de)趨化因子 96T

CXCL16 Protein Rat 重(zhong)組大(da)鼠(shu) CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽) 人白細胞(bao)調節(jie)素(LR)ELISA 試劑盒(he) MLH1(Mutl homolog l gene) 錯(cuo)配(pei)修(xiu)復(fu)蛋白1抗(kang)原(yuan) 0.5mg

ILT2/CD85j： 細胞(bao)表面免疫(yi)球蛋白樣(yang)轉錄因子2抗體 PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆蟲細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照)

人(ren)肝內(nei)膽管(guan)上皮細胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人白細胞(bao)介素4受體(IL-4R)ELISA試劑(ji)盒(he) MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1) 胃(wei)粘(zhan)液(ye)素抗原(yuan) 0.5mg

Integrin alpha 2/CD49b： 整(zheng)合(he)素α2抗體 非(fei)洲綠(lv)猴腎(shen)細胞(bao)系/IgR;VERO/IgR 大(da)鼠(shu)肝癌(ai)細胞(bao)，CBRH-7919細胞(bao) BEL-7405(肝癌(ai)細胞(bao))

LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照) 人白細胞(bao)介素25(IL-25)ELISA試劑盒(he) MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B) 褪黑素受體1B抗原(yuan) 0.5mg

SCC-9人(ren)類鱗狀(zhuang)上皮舌癌(ai)細胞(bao)phospho-RAD51(Thr309)： 0酸化Rad51抗體 長(chang)尾綠(lv)猴胚(pei)胎(tai)細胞(bao);4179

人類成纖(xian)維(wei)細胞(bao)系;CNLMG-B5537SKIN 人(ren)肝動(dong)脈(mai)內(nei)皮細胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)遲現(xian)抗原(yuan)(VLA)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) YKL-40/CGP-39 human 軟(ruan)骨糖(tang)蛋白39(人(ren)) 96T

Phospho-RSK2(Ser369)： 0酸(suan)化核(he)糖體S6激酶(mei)RSK2抗體 肝動(dong)脈(mai)平滑(hua)肌細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(1ml)

MA, 小(xiao)鼠(shu)星形(xing)膠質(zhi)細胞(bao) 大(da)鼠(shu)成纖(xian)維(wei)細胞(bao)生長(chang)因子受體1(FGFR1)ELISA試劑(ji)盒(he) HRGP(Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein)  人(ren)羥脯酸(suan)糖(tang)蛋白 96T

phospho-RPS6KA1(Thr359)： 0酸(suan)化絲酸(suan)/蘇(su)酸(suan)激(ji)酶(mei)p90RSK蛋白抗(kang)體 CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照)

三(san)、培(pei)養(yang)註意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後首先(xian)觀察細胞(bao)瓶是否完好，培(pei)養(yang)液是否有漏液(ye)、渾(hun)濁等現(xian)象(xiang)，若有(you)上述現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀細胞(bao)說明(ming)書，了(le)解細胞(bao)相關(guan)信息，如(ru)細胞(bao)形(xing)態、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血清比例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因子等，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹致，若由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹致而導(dao)致細胞(bao)出現(xian)問題，責任由 客戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面，顯微鏡下觀察細胞(bao)狀(zhuang)態。因運輸(shu)問(wen)題，部分(fen)細胞(bao)由於(yu)溫度(du) 變化及(ji)劇烈(lie)碰亡破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是正常現(xian)象(xiang)。觀察好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可以消化，懸(xuan)浮細胞(bao)直接混勻收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客戶收(shou)到(dao)細胞(bao)後前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照片，記錄細胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部(bu)溝通 交(jiao)流。由(you)於運輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細胞(bao)會出現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況，請(qing)及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯系，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體情況(kuang)，以便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術人(ren)員跟(gen)蹤回訪(fang)直(zhi)至問題解決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供(gong)科研使用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換用按(an)照說明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後第(di)壹次傳代(dai)建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。