SHP-77人(ren)小細(xi)胞(bao)肺(fei)癌細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研研究使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床(chuang)診斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培養

液終(zhong)止(zhi)消化，再(zai)輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落，然後將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱(dian)細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比(bi)例進行(xing)分瓶傳代(dai)，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱(xiang)中培養；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後加入(ru)培養液終(zhong)

止(zhi)消化，輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落，然後將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量的(de)凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍存(cun)管中；

4）先將細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後將其移(yi)入-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入液氮(dan)中進(jin)行(xing)長(chang)期保存(cun)。使用(yong)程序

降溫盒(he)可直接放(fang)入-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養操作

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培養凍(dong)存處(chu)理(li)僅(jin)供參考(kao)，具體(ti)操作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍存管(guan)在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速搖晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培養基(ji)混合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件下離(li)心3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加1-2 mL培養基(ji)後吹(chui)勻。然後將所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)含(han)適量(liang)培養基(ji)的(de)培養瓶中培養過夜（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約8 mL培養基(ji)，培養過夜）。第二天(tian)換液並檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即可進行(xing)傳(chuan)代培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，使消化(hua)液浸潤所有(you)細(xi)胞(bao)，將培養瓶置於37℃培養箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分變圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回操作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下培養瓶後加2-3ml培養基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕輕打勻(yun)後裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培養液後吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例分到新的(de)含8 mL培養基(ji)的(de)新皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中，置(zhi)於培養箱(xiang)中培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm條件下離(li)心4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數量加入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註意凍存(cun)管做(zuo)好(hao)標(biao)識(shi)。將凍存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉(zhuan)入液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍存管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下次拿取。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產品(pin)：

CT26.WT小(xiao)鼠結腸癌細(xi)胞(bao) CT26.WT mouse colon cancer cells DMEM培養基(ji)+10%FBS 大(da)鼠(shu)糖(tang)原(yuan)0酸化酶同工(gong)酶II(GP-II)ELISA 試劑(ji)盒 pERK(Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase)  小鼠(shu)0酸化細(xi)胞(bao)外(wai)信(xin)號(hao)調節激(ji)酶 96T

MAVS： 線(xian)粒(li)體(ti)抗病(bing)毒(du)信(xin)號(hao)MAVS蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) IL18BP Others Mouse 小鼠(shu) IL18BP 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao))

CL-0159MLTC-1(小(xiao)鼠間質(zhi)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 大(da)鼠(shu)糖(tang)原(yuan)0酸化酶同工(gong)酶BB(GP-BB)ELISA試劑(ji)盒 MCP-3/CCL7(Human monocyte chemotactic protein 3)  人(ren)單核(he)細(xi)胞(bao)趨(qu)化(hua)蛋(dan)白(bai)3 96T

MCSF Receptor： 巨(ju)噬細(xi)胞(bao)集落刺激(ji)因子受體(ti)抗體(ti) tTA基(ji)因修飾(shi)的(de)小鼠胰腺(xian)癌細(xi)胞(bao)(B類(lei));Pan02-CAG-tTA-4C5

RKO-AS45-1(人(ren)結腸癌轉基(ji)因細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 6T-CEM(T細(xi)胞(bao)白(bai)血病(bing)) 大(da)鼠(shu)糖(tang)原(yuan)0酸化酶同工(gong)酶BB(GP-BB)ELISA 試劑(ji)盒 CCB(Mouse calcium channel blockers)  小鼠(shu)鈣通道(dao)阻滯(zhi)劑(ji) 96T

人(ren)細(xi)胞(bao);Hela S3 [HeLaS3] 人(ren)白細(xi)胞(bao)分化(hua)抗(kang)原40配(pei)體(ti)(CD40) ELISA試劑(ji)盒 CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 型乙(yi)酰(xian)受(shou)體(ti)α7(多肽) 0.5mg

phospho-IRF3 (Ser386)： 0酸(suan)化幹擾(rao)素調節因子3抗體(ti) 人(ren)癌細(xi)胞(bao);MDA-MB-435S

PIEC(豬(zhu)髖動脈(mai)內皮細(xi)胞(bao) ) 5×106cells/瓶×2 食蟹(xie)猴(hou) CD10 / Neprilysin / MME 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao)) 人(ren)白細(xi)胞(bao)分化(hua)抗(kang)原40L配(pei)體(ti)(CD40L) ELISA試劑(ji)盒 Nanog fragment 幹細(xi)胞(bao)關鍵(jian)蛋(dan)白(多(duo)肽) 0.5mg

ISLR2： ISLR2蛋(dan)白抗體(ti) 人(ren)肺微血管(guan)內皮細(xi)胞(bao)-HPMEC-a

XCL2 Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) XCL2 蛋白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 人(ren)白細(xi)胞(bao)分化(hua)抗(kang)原4(CD4)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲(qu)酮偶聯(lian)血清(qing)白蛋白(bai)：納(na)曲(qu)酮偶聯(lian)血藍(lan)蛋(dan)白 0.5mg

SHP-77人(ren)小細(xi)胞(bao)肺(fei)癌細(xi)胞(bao)Renin： 腎素/血管(guan)緊(jin)張(zhang)素形(xing)成(cheng)酶Ren1抗體(ti) 大(da)鼠(shu)骨(gu)肉瘤(liu)細(xi)胞(bao);UMR-106

CL-0385MFC-GFP(小(xiao)鼠前胃癌細(xi)胞(bao)(綠(lv)色(se)熒光蛋(dan)白(bai)標(biao)記(ji)))5×106cells/瓶×2 大(da)鼠(shu)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao)生長(chang)因子21(FGF21)ELISA試劑(ji)盒 Beta-OHB(Human Beta-Hydroxybutyric Acid)  人(ren)β羥(qiang) 96T

RSPO1： 分泌(mi)性蛋(dan)白(bai)RSPO1抗(kang)體(ti) HAPLN1 Others Human 人(ren) HAPLN1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao))

人(ren)視網(wang)膜色(se)素上(shang)皮細(xi)胞(bao)總(zong)RNAHRPEpiC NA 大(da)鼠(shu)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao)生長(chang)因子2(FGF2/bFGF)ELISA試劑(ji)盒 HDL-C(Human High density lipoprotein cholesterol)  人(ren)高密度(du)脂(zhi)蛋白(bai) 96T

RASA2： RAS的(de)GTP酶激(ji)活(huo)蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) 非(fei)洲(zhou)綠猴(hou)腎細(xi)胞(bao)(SV40轉(zhuan)化(hua));COS-1 [COS1]

三(san)、培養註意事項 

1. 收到細(xi)胞(bao)後首先觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培養液是(shi)否(fou)有漏(lou)液、渾濁等現象(xiang)，若(ruo)有上述現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培養基(ji)、血清(qing)比例、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因子等，確保(bao)細(xi)胞(bao)培養條件壹致，若由(you)於培養條件不(bu)壹致而(er)導致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責任由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運輸(shu)問(wen)題，部分細(xi)胞(bao)由(you)於溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒(du)瓶壁將 T25 瓶置於 37℃培養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可以(yi)消(xiao)化，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接混勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新鮮的(de)培養基(ji)重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到新的(de)培養瓶或培養皿(min)中，置(zhi)於培養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條件的(de)培養基(ji)用(yong)於細(xi)胞(bao)培養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於和我(wo)司技(ji)術部溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由(you)於運輸(shu)的(de)原因，個(ge)別敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩定(ding)的(de)情況(kuang)，請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術人(ren)員跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研使用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的(de)培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條件新配制的(de)培養基(ji)來培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後第壹次傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。