T2 (174xcem.T2 )人(ren)淋巴(ba)母細胞

公司(si)產(chan)品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

1、細胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞生長至覆蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶中，倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落，然(ran)後將懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸，然後按 1:2 比例進行分瓶傳代(dai)，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生長至覆蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶中，倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入培養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落，然(ran)後將懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離心 5min；

3）用適量的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍(dong)存(cun)管中；

4）先(xian)將細(xi)胞凍(dong)存(cun)管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後轉入液(ye)氮(dan)中進行長期保存(cun)。使用程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培養(yang)操(cao)作

1) 復蘇細胞：以下(xia)細胞培養(yang)凍(dong)存(cun)處理(li)僅(jin)供參考(kao)，具體(ti)操(cao)作步(bu)驟以隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書為主。將含(han)有(you)1 mL細胞懸液(ye)的凍(dong)存(cun)管在 37℃水浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離心3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹勻。然後將所有(you)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入含(han)適(shi)量培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶中培養(yang)過夜(ye)（或將細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過夜(ye)）。第二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查(zha)細胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳代(dai)培養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使消化液(ye)浸(jin)潤(run)所有(you)細(xi)胞，將培養(yang)瓶置於37℃培養(yang)箱(xiang)中消化1-2 min（視細胞情(qing)況(kuang)而(er)定），然(ran)後在顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細(xi)胞大部分變(bian)圓並脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作臺，輕(qing)敲幾下(xia)培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管中，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹勻。

c、將細(xi)胞懸液(ye)按(an)1:2比例分到新的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新皿中或者瓶中，置於培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待細胞生長狀態(tai)良(liang)好時(shi)，可(ke)進行細胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞及(ji)細胞培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管中，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄盡PBS，進行細胞計(ji)數。

b、根據細(xi)胞數量加(jia)入無(wu)血清(qing)細胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液(ye)，註意凍(dong)存(cun)管做好(hao)標識。將凍(dong)存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入液(ye)氮(dan)灌儲存(cun)。記錄凍(dong)存(cun)管位(wei)置(zhi)以便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取(qu)。

公(gong)司正在出售(shou)的產(chan)品：

NAT8 + NAT8B： N-乙(yi)酰(xian)轉移(yi)酶8抗體(ti) 腎系(xi)膜細(xi)胞培養(yang)基(ji)MCM-prf

H1650-M3人(ren)非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌細(xi)胞 H1650-M3 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS 大鼠(shu)水通(tong)道蛋白(bai)5(AQP-5)ELISA 試劑盒 G-CSF(Human Granulocyte Colony Stimulating Factor)  人(ren)粒(li)細(xi)胞集(ji)落刺(ci)激因(yin)子 96T

NAT8B： N-乙(yi)酰(xian)轉移(yi)酶8B抗體(ti) VSIG4 Others Mouse 小鼠(shu) VSIG4 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

CL-0031BEL-7402(人(ren)肝(gan)癌細(xi)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠(shu)水通(tong)道蛋白(bai)4(AQP-4)ELISA試劑盒 MIP-2(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2)  小鼠(shu)巨噬細(xi)胞炎性(xing)蛋白(bai)2 96T

NOMO1： NOMO蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 正常(chang)大鼠(shu)腎細(xi)胞;NRK

Yac-1細(xi)胞，小(xiao)鼠(shu)淋巴(ba)瘤細胞 PA317(成(cheng)纖(xian)維細胞) 人(ren)臍靜脈(mai)內(nei)皮細(xi)胞;HUV-EC-C 人(ren)β酚(β-naphthol)ELISA 試(shi)劑盒 PSAP/PAP peptide 前(qian)列(lie)腺(xian)酸(suan)性(xing)0酸(suan)酶抗原 0.5mg

IFI30： γ幹(gan)擾素(su)誘導(dao)蛋(dan)白(bai)IP30抗體(ti) VCAM1 Others Human 人(ren) CD106 / VCAM1 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

EB病(bing)毒(du)轉(zhuan)化的人(ren)B淋巴(ba)細(xi)胞(傣(dai)族(zu));KM9403 人(ren)β防禦(yu)素(su)1(HβD-1)ELISA試劑(ji)盒 PSAP/PAP peptide (human) 前(qian)列(lie)腺(xian)酸(suan)性(xing)0酸(suan)酶抗原(人(ren)) 0.5mg

IFFO： 中間絲(si)家族(zu)孤啡(fei)肽(tai)1蛋白(bai)抗體(ti) 人(ren)前(qian)列(lie)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞;LNCaP

Saos-2(人(ren)骨肉(rou)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人(ren) Ephrin-A4 / EFNA4 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 人(ren)β澱粉樣蛋(dan)白(bai)1-42(Aβ1-42)ELISA 試劑盒 P-selectin P選擇素(su)抗原 0.5mg

T2 (174xcem.T2 )人(ren)淋巴(ba)母細胞RLFs, 大鼠(shu)肺成(cheng)纖(xian)維細胞 大鼠(shu)胞外5'-核(he)苷酸(suan)酶(5E)ELISA試劑(ji)盒 PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2)  人(ren)0酸(suan)甘(gan)油(you)酸(suan)變(bian)位(wei)酶2 96T

Retinol binding protein： 結(jie)合(he)蛋(dan)白(bai)抗體(ti) IL18R1 Others Canine 狗 IL18R1 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

3T3? 成(cheng)纖(xian)維細胞 大鼠(shu)胞漿(jiang)型(xing)0脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑(ji)盒 PTGDS(Human Prostaglandin D synthase)  人(ren)前(qian)列(lie)腺(xian)合(he)成(cheng)酶 96T

RGC32： 補(bu)體(ti)應(ying)答基(ji)因(yin)32抗體(ti) CEM細胞，白(bai)血病(bing)細胞 人(ren)前(qian)列(lie)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞,PC-3M細(xi)胞 人(ren)肝(gan)內(nei)膽管上(shang)皮細(xi)胞總(zong)RNAHIBEpiC NA

CTSB Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) Cathepsin-B / CTSB 人(ren)細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 大鼠(shu)半乳糖(tang)凝集素(su)9(GAL9)ELISA試劑(ji)盒 PPIL1(Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1)  人(ren)肽(tai)酰(xian)脯酰(xian)異(yi)構酶(親(qin)環蛋白(bai))樣1 96T

三(san)、培養(yang)註意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後首(shou)先(xian)觀(guan)察細(xi)胞瓶是否(fou)完好(hao)，培養(yang)液(ye)是否(fou)有(you)漏液(ye)、渾濁等現象(xiang)，若有(you)上(shang)述現象(xiang) 發生請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀細胞說(shuo)明書，了解細(xi)胞相關信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所用(yong)培養(yang)基(ji)、血清(qing)比例(li)、所需(xu) 細(xi)胞因(yin)子等，確保細(xi)胞培養(yang)條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由(you)於培養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞出(chu)現問(wen)題，責任由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細胞瓶表面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分細胞由(you)於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀察好(hao)細(xi)胞狀態(tai)後，75%酒精消毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細胞直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮的培養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細胞，並(bing)接種(zhong)到新的培養(yang)瓶或培養(yang)皿中，置於培養(yang)箱(xiang)中進行培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相同條(tiao)件(jian)的培養(yang)基(ji)用(yong)於細(xi)胞培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天各拍幾張(zhang)細(xi)胞照(zhao)片，記錄細(xi)胞狀態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於運(yun)輸(shu)的原因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不(bu)穩定的情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知細胞 的具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便(bian)我(wo)們(men)的技(ji)術人(ren)員跟蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至問(wen)題解決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來培養(yang)細(xi)胞，請(qing)換(huan)用(yong)按照說明書細胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配制(zhi)的培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到細(xi)胞後第壹次(ci)傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。