ZR-75-1+luc人乳(ru)腺癌細(xi)胞(bao)熒(ying)光(guang)素(su)酶標(biao)記

公司產(chan)品(pin)僅供科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得用於臨(lin)床診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加入 5ml 培養

液終止消化，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然後按 1:2 比(bi)例(li)進行分(fen)瓶傳(chuan)代，最後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加入培養液終

止消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移(yi)入-80℃過夜，24h 後轉入液氮中進行長期保存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序

降溫(wen)盒(he)可直(zhi)接(jie)放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理僅供參考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步驟以隨(sui)貨產(chan)品(pin)說明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水浴中迅(xun)速搖晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培養(yang)基混合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離心3 min，棄去上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培養基後吹(chui)勻。然後將所(suo)有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入含(han)適量(liang)培(pei)養基的培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入10 cm皿中，加入約8 mL培(pei)養基，培養(yang)過夜）。第二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細(xi)胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可進行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄去培養(yang)上(shang)清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使(shi)消化液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於37℃培(pei)養箱中(zhong)消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況(kuang)而(er)定），然後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消化情況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大部(bu)分(fen)變(bian)圓並脫落(luo)，迅速(su)拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下(xia)培養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終止消化。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄去上(shang)清液(ye)，補加1-2 mL培養液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分(fen)到新(xin)的(de)含(han)8 mL培養基的新(xin)皿(min)中或者瓶中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良好(hao)時(shi)，可(ke)進行細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離心4 min，棄去上(shang)清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻，每(mei)支凍存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好標(biao)識(shi)。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入-80℃冰箱，24 h後轉入液氮灌儲存(cun)。記錄凍存(cun)管(guan)位置(zhi)以便(bian)下(xia)次拿取。

公司正在(zai)出售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

小鼠腎(shen)上(shang)皮細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 大鼠(shu)神(shen)經特(te)異(yi)性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑(ji)盒(he) TSGF  大鼠(shu)特(te)異(yi)生長因(yin)子/相關因(yin)子 96T

Nm23-H2： 抑(yi)制基因(yin)抗(kang)體(ti) CV-1細(xi)胞(bao)，非(fei)洲(zhou)綠(lv)猴腎(shen)細(xi)胞(bao) 人(ren)大腸(chang)癌細(xi)胞(bao),SW116細(xi)胞(bao) CM-H133人(ren)視(shi)網(wang)膜muller細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基100mL

CPA2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase A2 / CPA2 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao)) 大鼠(shu)神(shen)經特(te)異(yi)性烯醇化酶(NSE)ELISA 試劑(ji)盒(he) PDH E1(Mouse pyruvate dehydrogenase-E1)  小鼠酸脫氫酶E1 96T

Nociceptin： 孤(gu)肽(tai)/痛(tong)敏(min)肽(tai)抗(kang)體(ti) 大鼠(shu)心肌細(xi)胞(bao)RCM

97H人肝(gan)癌細(xi)胞(bao) 97H human hepatocarcinoma cells DMEM+10%FBS 大鼠(shu)神(shen)經肽(tai)Y受(shou)體(ti)Y5(NPY5R)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Hyp  大鼠(shu)羥脯(pu)酸 96T

IFNW1 Others Human 人 IFN omega 1 / IFNW1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao)) 人(ren)E鈣(gai)粘(zhan)著蛋白(bai)/上(shang)皮性鈣(gai)黏附蛋白(E-Cad)ELISA 試劑(ji)盒(he) TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 壞(huai)死因(yin)子-β抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IL-18： 白細(xi)胞(bao)介素(su)-18/幹擾(rao)素(su)γ誘導(dao)因(yin)子抗(kang)體(ti) 大耳(er)山羊(yang)皮(pi)膚(fu)細(xi)胞(bao);LDG-3

PC12細(xi)胞(bao)，大鼠(shu)腎(shen)上(shang)腺嗜(shi)鉻細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao) Hep G2(肝(gan)癌細(xi)胞(bao)) 人(ren)低分(fen)化肺(fei)腺癌細(xi)胞(bao);GLC-82 [GLC82] 人(ren)EJ抗(kang)體(ti)/抗(kang)甘(gan)酰(xian)NA合(he)成(cheng)酶抗(kang)體(ti)(EJ/GlyRS)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 壞(huai)死因(yin)子α誘導(dao)蛋白(bai)1抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IL1RAPL1： 白介素(su)1受體(ti)相關蛋(dan)白樣1前體(ti)蛋(dan)白抗(kang)體(ti) CLEC7A Others Mouse 小鼠 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao))

人臍(qi)靜脈內皮(pi)細(xi)胞(bao)RNAHUVEC miRNA5 μg 人(ren)EB病(bing)毒IgM(EBv IgM)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha (DNA topoisomerase II Alpha) DNA拓普(pu)西(xi)異構酶Ⅱ抗(kang)原(yuan) 0.5mg

ZR-75-1+luc人乳(ru)腺癌細(xi)胞(bao)熒(ying)光(guang)素(su)酶標(biao)記REG4： 再(zai)生基因(yin)蛋白4抗(kang)體(ti) 恒河(he)猴(hou)皮(pi)膚(fu)細(xi)胞(bao);RM-S1

人胚(pei)腎(shen)細(xi)胞(bao);293 Cells, low passage 人(ren)心室肌細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 大鼠(shu)白(bai)介素(su)28A(IL-28A)ELISA試劑(ji)盒(he) PKC(Human protein kinase C)  人蛋(dan)白(bai)激酶C 96T

RIP1： 受體(ti)相互作(zuo)用蛋(dan)白激酶1抗(kang)體(ti) 人(ren)臍(qi)帶血(xue)單(dan)個核細(xi)胞(bao)

人羊(yang)膜上(shang)皮細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)白(bai)介素(su)27(IL-27)ELISA試劑(ji)盒(he) ALD(Human Aldolase)  人醛(quan)縮(suo)酶 96T

RB1CC1： RB1的誘導(dao)卷(juan)曲蛋白(bai)RB1CC1抗(kang)體(ti) IL12A&IL27B Others Human 人(ren) IL12A & IL27B Heterodimer 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao))

三、培(pei)養(yang)註意事項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是否(fou)完好(hao)，培養液是否(fou)有漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若有上(shang)述現(xian)象 發生請(qing)及時(shi)和(he)我們聯系。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培養基、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確(que)保細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹致，若由於培(pei)養條件不壹致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題(ti)，部分(fen)細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰亡破碎形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正常(chang)現(xian)象。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶或培養皿中，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)進行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相同(tong)條件的培(pei)養基用於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我司技(ji)術(shu)部溝通 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸的(de)原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出現(xian)不(bu)穩定的(de)情況(kuang)，請(qing)及時(shi)和(he)我們聯系，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情況(kuang)，以便(bian)我們的技(ji)術(shu)人員(yuan)跟蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至問題(ti)解(jie)決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研使用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸用(yong)的(de)培(pei)養基 (灌液培養基) 不能再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新(xin)配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。