SIHa人(ren)子宮頸(jing)鱗(lin)癌細(xi)胞(bao)

公司(si)產品(pin)僅(jin)供科研(yan)研究(jiu)使用、不得(de)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診斷！

壹(yi)、商品(pin)介紹：

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培養液，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓後加入 5ml 培養

液終止消化，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之脫落，然(ran)後將(jiang)懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重懸，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例進行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養箱中培(pei)養；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培養液，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓後加入培養液終

止消化，輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之脫落，然(ran)後將(jiang)懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管中；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存管放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其移入-80℃過(guo)夜，24h 後轉入液氮中進(jin)行長期保存。使用程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫盒可(ke)直(zhi)接放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培(pei)養凍存(cun)處(chu)理僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體(ti)操作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨貨(huo)產品(pin)說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液的(de)凍存管在 37℃水浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍，加4 mL培(pei)養基(ji)混合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去(qu)上清液，加1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所有(you)細(xi)胞(bao)懸液加入含適量(liang)培養基(ji)的(de)培養瓶(ping)中培(pei)養過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜）。第(di)二天換(huan)液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去(qu)培養上清，用不(bu)含鈣(gai)、鎂離子的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中，使消化液浸(jin)潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養箱中消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況而定），然(ran)後在(zai)顯微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況，若細(xi)胞(bao)大(da)部分變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回操作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶(ping)後加2-3ml培(pei)養基(ji)終止消化。輕輕打勻(yun)後裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上清液，補加1-2 mL培(pei)養液後吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液按1:2比(bi)例分到新(xin)的(de)含8 mL培養基(ji)的(de)新皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培養箱中培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好時，可(ke)進(jin)行細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為例；a、收集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養液，裝入無(wu)菌(jun)離心管中，1000 rpm條(tiao)件下離心4 min，棄去(qu)上清液，用PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加入無(wu)血(xue)清細(xi)胞(bao)凍(dong)存液，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管凍存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註意凍存(cun)管做(zuo)好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管放入-80℃冰箱，24 h後轉入液氮灌儲存。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管位置(zhi)以(yi)便(bian)下次拿取。

三(san)、培養註意事項 

1. 收到細(xi)胞(bao)後首(shou)先觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培養液是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及時和我們聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解細(xi)胞(bao)相(xiang)關信息，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用培養基(ji)、血清比(bi)例、所需 細(xi)胞(bao)因子等(deng)，確(que)保細(xi)胞(bao)培(pei)養條件(jian)壹(yi)致，若由(you)於(yu)培養條件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任由(you) 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運輸(shu)問題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫度(du) 變化及劇烈(lie)碰亡破(po)碎形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀態(tai)後，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接混勻(yun)收集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮的(de)培養基(ji)重懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培養瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿中，置(zhi)於(yu)培養箱中進(jin)行培(pei)養。

5. 請客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培養基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議客戶收到細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天各拍幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於(yu)和我司(si)技術部溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由(you)於(yu)運輸(shu)的(de)原因，個(ge)別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出現(xian)不(bu)穩(wen)定的(de)情況，請(qing)及時和我們聯(lian)系，告知細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情況(kuang)，以(yi)便(bian)我們的(de)技術人員(yuan)跟蹤(zong)回訪直至問(wen)題解決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用的(de)培養基(ji) (灌液培養基(ji)) 不能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養條件(jian)新(xin)配制(zhi)的(de)培養基(ji)來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。

公司(si)正在出(chu)售(shou)的(de)產品(pin)：

HA Others H4N4 甲(jia)型(xing)流感(gan) H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對照(zhao)) 大鼠(shu)Ⅴ(F5)ELISA試(shi)劑(ji)盒 iNOS(Mouse inducible nitric oxide synthase)  小鼠(shu)誘(you)導(dao)型(xing)合(he)成酶(mei) 96T

NDUFS3： 線粒體(ti)復(fu)合(he)物NDUFS3蛋(dan)白抗(kang)體(ti) 外周(zhou)血白細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(1ml)

Tca-8113-EGFP(CMV-EGFP慢(man)病毒(du)構建(jian)穩定株)人舌(she)鱗(lin)癌細(xi)胞(bao) Tca-8113-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) of human tongue squamous cell carcinoma 1640+10% FBS 大(da)鼠(shu)Ⅲ(FⅢ)ELISA試(shi)劑(ji)盒 eNOS-3  大鼠(shu)內皮(pi)型(xing)合(he)成酶(mei)3 96T

NRIP： 雄(xiong)激(ji)素受體(ti)復(fu)合(he)物相(xiang)關蛋(dan)白/核受體(ti)相(xiang)互作用(yong)蛋白抗(kang)體(ti) F11R Others Human 人 JAM-A 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對照(zhao))

CM-H019人(ren)前(qian)列(lie)腺上皮(pi)細(xi)胞(bao)培(pei)養基(ji)100mL 大鼠(shu)Ⅲ(FⅢ)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 Human c-jun  人c-jun 96T

JMJD5： 組蛋白去(qu)甲(jia)基(ji)化酶JMJD5抗(kang)體(ti) CD200R4 Others Mouse 小鼠(shu) CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對照(zhao))

人(ren)氣管平(ping)滑(hua)肌細(xi)胞(bao)cDNAHTSMC cDNA 牛(niu)血(xue)清白蛋(dan)白殘(can)留檢(jian)測(BSA)ELISA 試劑(ji)盒 RRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多(duo)肽抗(kang)原) 0.5mg

phospho-JUP(Tyr550)： 0酸(suan)化γ連環蛋白抗(kang)體(ti) 人惡(e)性黑色(se)素瘤細(xi)胞(bao);A-375 [A375]

A2(人(ren)腺樣囊性癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 小鼠(shu)黑(hei)色(se)素瘤細(xi)胞(bao);B16 牛(niu)鋅(xin)金屬硫蛋(dan)白(Zn-MT)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1) 基(ji)質細(xi)胞(bao)衍生(sheng)因子-1(抗(kang)原) 0.5mg

JLP： JNK相(xiang)互作用(yong)蛋白4抗(kang)體(ti) B16-F10, 小鼠(shu)黑(hei)色(se)素瘤高(gao)轉移細(xi)胞(bao)

SIHa人(ren)子宮頸(jing)鱗(lin)癌細(xi)胞(bao)RAB-14： RAS相(xiang)關蛋(dan)白癌(ai)基(ji)因Rab14抗(kang)體(ti) 恒河猴(hou)胚腎細(xi)胞(bao);FRhK-4 [FRhK4]

CM-R107大(da)鼠(shu)海(hai)馬(ma)神(shen)經元(yuan)細(xi)胞(bao)培(pei)養基(ji)100mL 大鼠(shu)UDP葡(pu)萄糖酸(suan)轉移酶(mei)2家(jia)族(zu)多(duo)肽B7(UGT2B7)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Ly6a(Human lymphocyte antigen 6 complex locus A)  人淋(lin)巴細(xi)胞(bao)抗(kang)原6復(fu)合(he)物基(ji)因座A 96T

phospho-p107(Ser975)： 0酸(suan)化視網膜母(mu)細(xi)胞(bao)瘤樣蛋白p107抗(kang)體(ti) RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對照(zhao))

小鼠(shu)間充(chong)質(zhi)幹(gan)細(xi)胞(bao)-骨(gu)髓(sui)MMSC-bm 大(da)鼠(shu)UDP葡(pu)糖酸(suan)基(ji)轉移酶(mei)1家(jia)族(zu)多(duo)肽A1(UGT1A1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 EAR1(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 1)  人嗜(shi)酸性白血(xue)球相(xiang)關之(zhi)RNA水(shui)解酵素家(jia)族(zu)成(cheng)員1 96T

phospho-RelB(Ser551)： 0酸(suan)化轉錄因子RelB蛋(dan)白抗(kang)體(ti) A549(人非(fei)小細(xi)胞(bao)肺(fei)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2