更新(xin)時間:2025-12-12
rTEV蛋白酶儲存:長(chang)期儲存-70℃,可儲存 2 年,-20℃可儲存 6 個(ge)月(yue)。
公司產品(pin)僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使用、不(bu)得用於(yu)臨(lin)床診斷!
商(shang)品(pin)屬性(xing)
貨(huo)號(hao) | 產品(pin)名(ming)稱 | 規(gui)格(ge) |
P-PR1348 | rTEV蛋白酶 | 1000U |
產品(pin)介(jie)紹:
rTEV 蛋白酶(重組(zu)型(xing))是(shi)經(jing)過(guo)基(ji)因(yin)工(gong)程(cheng)改(gai)造(zao)後的重(zhong)組蛋白酶,該酶(mei)特異性(xing)識(shi)別 Glu-Asn- Leu-Tyr -Phe-Gln-Gly七氨基(ji)酸(suan)序列(lie),並高特異性(xing)、高(gao)活性(xing)剪(jian)切(qie)(剪切(qie)位點(dian)在(zai)Gln-Gly之間)。該(gai)酶(mei)經(jing) 6×His 標簽純(chun)化而(er)得(含組(zu)氨(an)標簽),純(chun)度達(da)99%,剪切(qie)反應(ying)完畢(bi)後可通(tong)過(guo) Ni-NTA Resin )去除。該(gai)酶(mei)在(zai) 4℃-30℃溫度、pH 範圍(6.0-8.5)反(fan)應(ying)條件下(xia)均具有活(huo)性(xing)(見(jian)下表(biao))。
活(huo)性(xing)定(ding)義:在(zai) 1×rTEV Buffer(50 mM,pH8.0, 0.5 mM EDTA,1mM DTT),30℃反(fan)應(ying) 1h,剪切(qie)>85%的 3 μg 底(di)物所需要的酶(mei)量(liang)定(ding)義為(wei)壹(yi)個活性(xing)單位。
應(ying)用:融(rong)合蛋白標簽剪(jian)切(qie)去除。
儲存:長(chang)期儲存-70℃,可儲存 2 年,-20℃可儲存 6 個(ge)月(yue)。
操作(zuo)方(fang)法(fa)
1. 在(zai) EP 管(guan)中配制如下反(fan)應(ying)體系
融(rong)合蛋白 20 μg
20×rTEV Buffer 7.5 μl
0.1M DTT 1.5 μl
rTEV Protease 1-3 μl
ddH20 Up to 150 μl
2. 30℃孵(fu)育(yu),在(zai) 1、2、4、6 小時分(fen)別吸(xi)出 30 μl 上(shang)述(shu)反(fan)應(ying)液,置(zhi)於單獨(du)的 EP 管(guan)中。
3. 向(xiang)上(shang)述(shu) EP 管(guan)中加(jia)入 30 μl 2×SDS Loading Buffer,置(zhi)於-20℃。
4. 樣品(pin)全(quan)部(bu)反(fan)應(ying)完畢(bi)後,樣品(pin)煮沸(fei) 5 min,取(qu) 40 μl 進(jin)行(xing)SDS-PAGE 分析(xi)。
5. 如融(rong)合蛋白要求低溫(wen)處(chu)理(li),可將(jiang)反(fan)應(ying)液置(zhi)於 4℃,請延(yan)長(chang)反(fan)應(ying)時間,並(bing)增加(jia) rTEV 酶用(yong)量(liang)。


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