SK-LU-1人低(di)分(fen)化(hua)肺(fei)腺(xian)癌細胞

公司(si)產(chan)品僅供科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞傳代(dai)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待細胞回縮(suo)變圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打細胞使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈(chen)澱細胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基重懸(xuan)，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養；

2、細胞凍存：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待細胞回縮(suo)變圓後(hou)加(jia)入(ru)培養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打細胞使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將細(xi)胞凍存管放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉入(ru)液氮中(zhong)進行(xing)長(chang)期保存。使用(yong)程序(xu)

降(jiang)溫盒可直接(jie)放(fang)入-80℃。

壹(yi)、商品(pin)介(jie)紹(shao)：

二、細胞培養操(cao)作

1) 復蘇細(xi)胞：以下(xia)細胞培養凍存(cun)處(chu)理僅(jin)供參(can)考，具體操(cao)作步驟以隨(sui)貨產品(pin)說明書為主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基混合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將所(suo)有細(xi)胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基，培養過(guo)夜）。第(di)二天(tian)換液並檢(jian)查細胞密度。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞密度達 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞，將培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況(kuang)而定(ding)），然後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞消化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大(da)部分(fen)變圓並脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回操(cao)作臺，輕(qing)敲幾下(xia)培養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞凍存：待細胞生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時，可進行(xing)細(xi)胞凍存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及細胞培養液，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞計數。

b、根據細胞數量加(jia)入(ru)無血(xue)清細(xi)胞凍存液，使(shi)細(xi)胞密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍存1mL細胞懸(xuan)液，註意凍存管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液氮灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍存管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿取(qu)。

公司(si)正(zheng)在出(chu)售的(de)產(chan)品(pin)：

人表(biao)皮黑色素(su)細胞-深(shen)色素(su)(HEM)( 5×105 ) MN-h, 小(xiao)鼠海馬神(shen)經(jing)元 Mouse 大(da)鼠凝(ning)溶(rong)膠蛋白(Gelsolin)ELISA 試劑盒 SOD  大(da)鼠超(chao)氧(yang)化(hua)物歧(qi)化(hua)酶(mei) 96T

NHLH1 + NHLH2： 螺(luo)旋環螺(luo)旋蛋白1+2抗體(ti) tTA基因修飾的(de)小(xiao)鼠畸胎瘤細(xi)胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6

IL4 Protein Canine 重組狗 IL4 / Ierleukin-4 蛋白 大(da)鼠凝(ning)聚(ju)素(CLU)ELISA試劑盒 TAA(Human tumor-associated antigen)  人(ren)相(xiang)關抗原 96T

Neuronatin： 胚胎神(shen)經(jing)細胞NNAT抗體 DYRK3 Others Human 人 DYRK3 / REDK 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒-昆蟲細(xi)胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

I型膠(jiao)原酶(mei)(含(han)100mL酶(mei)解(jie)緩(huan)沖(chong)液(ye)) 10mL 大(da)鼠凝(ning)集(ji)素(su)樣氧(yang)化(hua)低(di)密(mi)度脂蛋(dan)白受體1(LOX1)ELISA試劑盒 HSP-70(Mouse Heat Shock Protein 70)  小(xiao)鼠熱休(xiu)克(ke)蛋白70 96T

人成(cheng)骨細(xi)胞培養基 100mL 牛乳鐵蛋(dan)白(LT)ELISA試劑盒 Tau protein 微(wei)管(guan)相關蛋白(抗原(yuan)) 0.5mg

Phospho-Jak1 (Tyr1022 + Tyr1023)： 0酸化(hua)蛋(dan)白質酪(lao)酸激(ji)酶JAK-1抗體(ti) RN-h, 大(da)鼠海馬趾(zhi)神(shen)經(jing)元 正(zheng)常人細(xi)胞，Hs 1.Tes細胞 MDBK (NBL-1)(牛腎細(xi)胞)

S100B Others Mouse 小鼠 S100B / S100beta 人(ren)細(xi)胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 牛(niu)乳(ru)糖合(he)成(cheng)酶(LS)ELISA 試劑盒 Thy-1/CD90 CD90 0.5mg

JNK2： 基末端(duan)激(ji)酶2抗體(ti) 小(xiao)鼠胚(pei)胎成纖(xian)維(wei)細胞;MEF

BHK-21細胞，敘利亞倉(cang)鼠腎細(xi)胞 JAR(胚絨毛(mao)癌(ai)細(xi)胞) 人APP-PS1雙基因轉染(ran)CHO細(xi)胞株(zhu);7WPS1 牛(niu)乳(ru)酸(Lactate)ELISA試劑盒 Thioster-containing protein 1 硫酯(zhi)包含(han)蛋(dan)白-1(抗原(yuan)) 0.5mg

SK-LU-1人低(di)分(fen)化(hua)肺(fei)腺(xian)癌細胞小鼠腎小(xiao)管(guan)上皮細胞MREpiC 大(da)鼠toll樣受體3(TLR3)ELISA試劑盒 PPP1R1A(Human protein phosphatase 1 regulatory subunit A)  人(ren)蛋(dan)酸酶(mei)1調(tiao)控(kong)/抑制(zhi)因(yin)子(zi)亞基1A 96T

Syntrophin Alpha1： 神(shen)經(jing)肌肉(rou)接頭(tou)蛋(dan)白SNTA1抗體(ti) A9(小(xiao)鼠皮下(xia)結締組織細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2

EB病毒轉化(hua)的(de)人(ren)B淋(lin)巴(ba)細(xi)胞;KMY0922 人表皮角(jiao)質(zhi)形成細胞培養基 100mL 大(da)鼠Toll樣受體2(TLR-2)ELISA試劑盒 ABCG2(Human ATP-binding cassette transporter G2)  人(ren)腺(xian)苷三(san)0酸結(jie)合(he)盒(he)轉運體G2 96T

sFRP-4： 子(zi)宮(gong)內膜抗體(ti) CL-0197RL95-2(人子(zi)宮(gong)內膜癌細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2

NCI-N87 [N87]人胃(wei)癌細(xi)胞 大(da)鼠Toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒 GDI(Human Guanine nucleotide dissociation Inhibitor)  人(ren)鳥苷(gan)酸解(jie)離(li)抑(yi)制(zhi)因(yin)子(zi) 96T

三(san)、培養(yang)註意事項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首先(xian)觀察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現象，若(ruo)有(you)上述現象 發(fa)生請(qing)及時和(he)我(wo)們(men)聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了(le)解(jie)細胞相關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培養(yang)基、血(xue)清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因子(zi)等(deng)，確保細胞培養條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條件(jian)不壹(yi)致(zhi)而(er)導致(zhi)細(xi)胞出現問(wen)題(ti)，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞瓶(ping)表(biao)面，顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞狀態(tai)。因(yin)運輸(shu)問(wen)題(ti)，部分(fen)細(xi)胞由(you)於(yu)溫度 變化(hua)及(ji)劇烈碰亡破碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常現象。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直接(jie)混勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基重懸(xuan) 細胞，並接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相同條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用(yong)於(yu)細(xi)胞培養。

6. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收到(dao)細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾張細胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏感細(xi)胞會(hui)出(chu)現不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及時和(he)我(wo)們(men)聯系，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便(bian)我(wo)們(men)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該細胞僅供科研使(shi)用(yong)。

8. 備註：運輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌液培(pei)養基) 不能(neng)再(zai)用(yong)來培養細胞，請(qing)換用(yong)按(an)照(zhao)說明書細(xi)胞培 養條件(jian)新配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基來培養細胞。     收到(dao)細(xi)胞後(hou)第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。