SK-N-MC人(ren)神經上(shang)皮瘤(liu)細胞

公(gong)司產(chan)品僅供科(ke)研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞生長至(zhi)覆蓋培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養基重(zhong)懸(xuan)，然後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進行分瓶傳代(dai)，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養；

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生長至(zhi)覆蓋培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變圓(yuan)後加入(ru)培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並放置於凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先將(jiang)細胞凍(dong)存(cun)管放置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液(ye)氮中(zhong)進行長期(qi)保存(cun)。使(shi)用(yong)程序(xu)

降(jiang)溫盒可直(zhi)接放入(ru)-80℃。

壹、商品介(jie)紹(shao)：

二(er)、細胞培(pei)養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞：以下細胞培(pei)養凍(dong)存(cun)處理僅供參考，具體操作(zuo)步驟以隨(sui)貨產(chan)品說(shuo)明書為(wei)主。將(jiang)含有(you)1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養基混(hun)合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心3 min，棄去上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)含適量培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並檢查細(xi)胞密(mi)度。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可進行傳代(dai)培(pei)養。

a、棄去培(pei)養上(shang)清，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞，將(jiang)培(pei)養瓶置(zhi)於37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而(er)定），然後(hou)在(zai)顯微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大(da)部分變圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上(shang)清液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養基的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置於培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞生長狀態良好時(shi)，可進行細胞凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶為(wei)例；a、收集(ji)細胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養液(ye)，裝入(ru)無菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心4 min，棄去上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清洗壹遍(bian)，棄盡PBS，進行細胞計數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞數(shu)量(liang)加入(ru)無血清細胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄凍(dong)存(cun)管位(wei)置以便下次拿(na)取。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出(chu)售的(de)產(chan)品：

IL2 Protein Canine 重(zhong)組狗 Ierleukin-2 / IL-2 蛋(dan)白(bai) (147 Cys/Ser) 大(da)鼠尿(niao)苷(gan)二(er)0酸葡萄(tao)糖(tang)酸轉移酶(mei)1(UGT1)ELISA試(shi)劑盒 Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1)  小鼠細(xi)胞周期1 96T

NRSF/REST： 神(shen)經元抑制蛋(dan)白(bai)抗(kang)體 PDE1B Others Human 人(ren) PDE1B 桿狀病毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

III型(xing)膠(jiao)原酶(mei)(含(han)100mL酶(mei)解(jie)緩(huan)沖液(ye)) 10mL 大鼠(shu)尿(niao)苷(gan)二(er)0酸葡萄(tao)糖(tang)酸轉移酶(mei)1(UGT1) ELISA試(shi)劑盒 GRO Alpha/CXCL1/MGSA(Human growth-regulated oncogene Alpha/melanoma growth stimulating activity)  人(ren)生長調(tiao)節(jie)致(zhi)癌(ai)基因(yin)α/黑(hei)素瘤(liu)生激(ji)因(yin)子(zi) 96T

ARHGAP17： 神(shen)經細胞發(fa)育(yu)相(xiang)關調(tiao)控蛋(dan)白(bai)抗(kang)體 A9細胞，皮下(xia)結(jie)締組(zu)織細(xi)胞 人(ren)肝星形(xing)細胞正(zheng)常(chang),LX-2細胞 CL-0088H4-IIE(大(da)鼠(shu)肝癌(ai)細(xi)胞 )5×106cells/瓶(ping)×2

NRG1 Others Human 人(ren) NRG1-beta 1 (EGF Domain) 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠尿(niao)蛋(dan)白(bai)(UP)ELISA試(shi)劑盒 MBP(Mouse myelin basic protein)  小鼠髓(sui)0脂(zhi)堿(jian)性(xing)蛋(dan)白(bai) 96T

CD24 Others Mouse 小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 牛(niu)幹擾素γ(IFN-γ)ELISA試(shi)劑盒 AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1) 脂肪細胞增(zeng)強(qiang)結(jie)合蛋(dan)白(bai)1 0.5mg

Kv4.3： 離(li)子(zi)通(tong)道(dao)蛋(dan)白(bai)Kv4.3抗(kang)體 人(ren)導(dao)管(guan)癌細(xi)胞;ZR-75-30

COS-1細(xi)胞，非(fei)洲(zhou)綠猴(hou)腎(shen)細胞 T-24(膀胱(guang)變移細胞癌(ai)) 中(zhong)國倉鼠卵(luan)巢細(xi)胞系(xi);CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 牛(niu)甘(gan)露糖(tang)結(jie)合凝集(ji)素(MBL)ELISA試(shi)劑盒 phospho-AMPK alpha 1(Thr172) peptaide 0酸化腺(xian)苷(gan)單0酸活化(hua)蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)α1 1mg

KLLN： Killin-p53調(tiao)節(jie)復(fu)制抑制蛋(dan)白(bai)抗(kang)體 DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

人(ren)臍動(dong)脈內皮細(xi)胞裂(lie)解(jie)物(wu)HUAECL 牛(niu)甘(gan)膽(dan)酸(CG)ELISA 試劑盒 ADM 1-52/AM 1-52/Adrenomedullin 1-52 腎(shen)上(shang)腺髓(sui)質素(1-52) 0.1mg

SK-N-MC人(ren)神經上(shang)皮瘤(liu)細胞EB病毒轉化(hua)的(de)人(ren)B淋巴細胞;HH-01 人(ren)腦靜(jing)脈(mai)血管(guan)內(nei)皮細(xi)胞培(pei)養基 100mL 大(da)鼠(shu)S100鈣結(jie)合蛋(dan)白(bai)A4(S100A4)ELISA試(shi)劑盒 ST1(Human Stromelysin-1)  人(ren)基質裂(lie)解(jie)素 96T

S100A7： S100鈣(gai)結(jie)合蛋(dan)白(bai)A7抗(kang)體 CL-0165NCI-H1299(人(ren)非小細胞肺(fei)癌(ai)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

AGS人(ren)胃腺癌(ai)細胞 大(da)鼠(shu)S100鈣結(jie)合蛋(dan)白(bai)A11(S100A11)ELISA試(shi)劑盒 ST2(Human Stromelysin-2)  人(ren)基質裂(lie)解(jie)素 96T

SIRT1： 沈默調(tiao)節(jie)蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體 SPN Others Rat 大鼠 SPN / CD43 / Sialophorin 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

HES 人(ren)胚(pei)皮膚(fu)成纖(xian)維樣細胞 大(da)鼠(shu)S100鈣結(jie)合蛋(dan)白(bai)A10(S100A10)ELISA試(shi)劑盒 ST3(Human Stromelysin-3)  人(ren)基質裂(lie)解(jie)素 96T

三(san)、培(pei)養註(zhu)意事(shi)項 

1. 收到細(xi)胞後(hou)首先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好，培(pei)養液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象 發生請及時(shi)和我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說(shuo)明書，了(le)解(jie)細(xi)胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如細(xi)胞形(xing)態、所(suo)用(yong)培(pei)養基、血清比(bi)例(li)、所(suo)需 細胞因(yin)子(zi)等，確(que)保細(xi)胞培(pei)養條件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於培(pei)養條件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問題，責(ze)任由(you) 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀態。因(yin)運輸問題，部分細胞由(you)於溫度 變化(hua)及劇烈碰亡破(po)碎(sui)形(xing)成碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好細(xi)胞狀態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可以消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻(yun)收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接種(zhong)到(dao)新的(de)培(pei)養瓶或(huo)培(pei)養皿中(zhong)，置於培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進行培(pei)養。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養基用(yong)於細胞培(pei)養。

6. 建議客戶收到細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍幾張(zhang)細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記錄細(xi)胞狀態，便(bian)於和我司技術(shu)部溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於運輸的(de)原因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞會(hui)出現(xian)不(bu)穩定的(de)情(qing)況(kuang)，請及時(shi)和我們(men)聯(lian)系，告(gao)知細胞 的(de)具體情況，以便我們(men)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員跟蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至問題解(jie)決。

7. 該細(xi)胞僅供科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸用(yong)的(de)培(pei)養基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養細胞，請換(huan)用(yong)按照(zhao)說(shuo)明書細(xi)胞培(pei) 養條件(jian)新配制的(de)培(pei)養基來(lai)培(pei)養細胞。     收到細(xi)胞後(hou)第(di)壹次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。