公(gong)司產(chan)品僅供科研研究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診斷！
1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：
1）細(xi)胞(bao)生長至覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次(ci)；
2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)
液終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將(jiang)懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；
3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基重懸，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)
培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；
2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：
1）細(xi)胞(bao)生長至覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次(ci)；
2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養(yang)液終(zhong)
止(zhi)消化(hua)，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將(jiang)懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；
3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管(guan)中；
4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中進(jin)行長期保存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)
降(jiang)溫(wen)盒可直接放(fang)入(ru)-80℃。
二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作(zuo)
1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍存(cun)處理僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書(shu)為主(zhu)。將含(han)有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混合均勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適量培(pei)養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)過夜（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液並(bing)檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度。
2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細(xi)胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳(chuan)代培(pei)養(yang)。
a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。
b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾下培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻(yun)。
c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的新(xin)皿(min)中或者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞(bao)生長狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數。
b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數量加(jia)入(ru)無血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌儲存(cun)。記(ji)錄凍存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以便(bian)下次拿取(qu)。
公(gong)司正在出售(shou)的產(chan)品：
phospho-MCK10 (Tyr513)： 0酸(suan)化(hua)神(shen)經上(shang)皮(pi)酪(lao)酸(suan)激(ji)酶(mei)/癌(ai)激(ji)酶(mei)10抗體 盤(pan)羊(yang)皮(pi)膚細(xi)胞(bao);ASHS3
IFNA5 Protein Human 重組人(ren) IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標(biao)簽(qian)) 大(da)鼠血管(guan)動(dong)蛋白(AMOT)ELISA試劑(ji)盒 HDL ISA Kit 大鼠高(gao)密度脂蛋(dan)白 96T
MMS21： E3連(lian)接酶(mei)MMS21蛋(dan)白抗(kang)體 AK2 Others Human 人(ren) AK2 / Adenylate kinase 2 桿(gan)狀病毒-昆蟲細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照)
大(da)鼠嗅鞘(qiao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 大鼠血(xue)沈(ESR)ELISA試劑(ji)盒 Plant Vitamin B12,VB12 植(zhi)物(wu)維生素B12 96T
MID2/RNF60/Midline-2： 環指蛋(dan)白60抗(kang)體 LS 174T細(xi)胞(bao)，結(jie)腸腺癌(ai)細胞(bao) 鼠(shu)黑(hei)色(se)素(su)瘤細(xi)胞(bao)系(xi),B16-F1細(xi)胞(bao) 人(ren)侵襲性脈(mai)絡膜(mo)黑色素(su)瘤細(xi)胞(bao);M619
HEG1： HEG同源蛋(dan)白1抗(kang)體 EB病(bing)毒(du)轉化(hua)的人(ren)B淋巴細(xi)胞(bao)(傣(dai)族(zu));KM9403
LLC-MK2(恒(heng)河猴(hou)腎(shen)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 甲(jia)型(xing)流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿(gan)狀病毒-昆蟲細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) 人(ren)甘(gan)露(lu)糖(tang)受(shou)體(MR)ELISA 試劑(ji)盒 E2F2 轉錄因子(zi)E2F-2抗原(yuan) 0.5mg
HELZ： 人(ren)抑制(zhi)蛋白抗(kang)體 EndoFectagen? 內皮(pi)細胞(bao)轉染試劑(ji)盒
CCL28 Protein Human 重組人(ren) CCL28 蛋白 (His 標(biao)簽(qian)) 人(ren)甘(gan)露(lu)糖(tang)凝(ning)集(ji)素(su)受(shou)體(MBLR)ELISA 試劑(ji)盒 E2F4 轉錄因子(zi)E2F-4抗原(yuan) 0.5mg
HEMK1： Hemk甲(jia)基轉移(yi)酶(mei)家(jia)族(zu)1號(hao)蛋(dan)白抗(kang)體 FCGR3B Others Human 人(ren) CD16b / FCGR3B CHO細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照)
LX-2+GFP人(ren)肝星(xing)形(xing)細(xi)胞(bao)+GFPMSTO-211H人(ren)肺癌(ai)細胞(bao)株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠(shu)鈣(gai)非(fei)依賴(lai)型(xing)0脂酶(mei)A2(iPLA2)ELISA試劑(ji)盒 DHEA-S 大鼠脫(tuo)氫表(biao)雄(xiong)酮(tong)酯 96T
PRSS3： 腦(nao)3抗體 LAYN Others Human 人(ren) Layilin 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照)
人(ren)鼻咽(yan)癌(ai)細胞(bao);CNE-2Z 大(da)鼠(shu)鈣(gai)/鈣(gai)調素依賴(lai)性(xing)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)2(CAMK 2)ELISA試劑(ji)盒 T 大鼠睪酮(tong) 96T
PTK9： 蛋(dan)白酪(lao)酸(suan)激(ji)酶(mei)9抗體 大(da)額牛腎細(xi)胞(bao);BFR-K1
人(ren)胚肺(fei)成纖(xian)維細(xi)胞(bao);WI-38 [WI38] 人(ren)支(zhi)氣(qi)管(guan)成纖(xian)維細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 大鼠鈣(gai)/鈣調素依賴(lai)性(xing)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)2(CAMK 2)ELISA 試劑(ji)盒 HBV preS2Ab(Human hepatitis B virus) 人(ren)乙(yi)型(xing)肝炎病(bing)毒(du)前(qian)S2抗(kang)體 人(ren)外根(gen)鞘(qiao)細(xi)胞(bao)HHORSC
三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事項(xiang)
1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液是(shi)否有漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及時(shi)和我們聯(lian)系(xi)。
2. 仔(zai)細(xi)閱讀細胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了解(jie)細(xi)胞(bao)相關信息(xi)，如(ru)細胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基、血清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問(wen)題，責(ze)任由(you) 客戶自(zi)行承擔。
3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度 變化(hua)及劇(ju)烈碰(peng)亡破(po)碎形(xing)成碎片，是(shi)正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。
4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培(pei)養(yang)基重懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的培(pei)養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培(pei)養(yang)。
5. 請客戶用(yong)相同條(tiao)件(jian)的培(pei)養(yang)基用(yong)於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)。
6. 建(jian)議客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍幾張細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於(yu)和我司技術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏感細胞(bao)會(hui)出現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及時(shi)和我們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的具(ju)體情(qing)況(kuang)，以便(bian)我們的技術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至問(wen)題解決(jue)。
7. 該細胞(bao)僅(jin)供(gong)科研使用(yong)。
8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的培(pei)養(yang)基 (灌液培(pei)養(yang)基) 不能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明書(shu)細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的培(pei)養(yang)基來培(pei)養(yang)細胞(bao)。 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次(ci)傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。
9. 註(zhu)意(yi)： 1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。
