BICR18細胞(bao)

公司產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使(shi)用、不得(de)用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變圓(yuan)後(hou)加入 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈(chen)澱細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比例進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

壹、商品(pin)介(jie)紹(shao)：

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變圓(yuan)後(hou)加入培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並放置於(yu)凍(dong)存管中(zhong)；

4）先將細(xi)胞(bao)凍(dong)存管放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移入-80℃過(guo)夜，24h 後轉入液(ye)氮(dan)中(zhong)進行(xing)長(chang)期(qi)保存。使(shi)用程序

降溫盒可直接放入(ru)-80℃。

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作

1) 復蘇細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處(chu)理僅(jin)供參考，具(ju)體操作步驟以(yi)隨貨(huo)產品(pin)說明(ming)書為主。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸液(ye)的(de)凍(dong)存管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心3 min，棄(qi)去上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜（或將細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜）。第二天換(huan)液(ye)並檢查(zha)細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即可進行(xing)傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上清，用不含(han)鈣、鎂離(li)子的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤所(suo)有(you)細胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情況而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若細胞(bao)大部(bu)分變(bian)圓並脫(tuo)落(luo)，迅速拿(na)回操作臺，輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比例分(fen)到(dao)新的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良(liang)好時(shi)，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心4 min，棄(qi)去上清液(ye)，用PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數量加入(ru)無血清細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管做(zuo)好(hao)標識(shi)。將凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄凍(dong)存管位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取(qu)。

公司正(zheng)在(zai)出售(shou)的(de)產品(pin)：

體液(ye)結(jie)構(gou)型(xing)內皮(pi)細(xi)胞(bao)壹氧(yang)化(hua)氮(dan)合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性(xing)比(bi)色(se)法定量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

細胞(bao)可溶(rong)性(xing)膜(mo)蛋(dan)白（粗(cu)提）制備試劑(ji)盒

組織CMV（CYTOMEGALOVIRUS）病毒(du)定量PCR擴(kuo)增(zeng)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

細胞(bao)CASPASE-9蛋(dan)白表(biao)達流式(shi)細胞(bao)儀檢測試劑(ji)盒

B12比色(se)法定量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

TEM電鏡(jing)冰凍(dong)切片免疫組織化(hua)學AP酶聯NBT/BCIP間接檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

細胞(bao)EPHA3激酶活性(xing)定量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒（A/B/C）

品紅亞硫(liu)酸(suan)鹽（FUCHSIN SULFITE）原位(wei)間接染色(se)試(shi)劑(ji)盒

人(ren)補(bu)體蛋(dan)白C3標準溶液(ye)

組織脂(zhi)蛋(dan)白相(xiang)關磷(lin)脂(zhi)酶A2（LP PLA2）活性(xing)比(bi)色(se)法定量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

細胞(bao)ATP發光(guang)法定量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

細胞(bao)色(se)素P450亞酶CYP3A4（BFCD）活性(xing)熒(ying)光(guang)定量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

冰凍(dong)切片組織線(xian)粒體復合物V蛋(dan)白表(biao)達熒(ying)光(guang)顯微鏡(jing)檢測(ce)試劑(ji)盒

體液(ye)血(xue)管緊(jin)張(zhang)素Ⅰ轉化(hua)酶1（ACE1）活性(xing)熒(ying)光(guang)共振能(neng)量轉移法（FRET）定量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

二甲(jia)苯細胞(bao)脂(zhi)質溶(rong)解(jie)定性(xing)染(ran)色(se)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

閱(yue)讀(du)障礙相關蛋(dan)白DLX2抗體

鈣離(li)子通道(dao)a1F亞型(xing)抗體

親(qin)環蛋(dan)白（親(qin)環素）PPIB抗體

IQCA1蛋(dan)白抗體

細胞(bao)毒(du)性(xing)受(shou)體NK-p80抗體

WD重復(fu)蛋(dan)白77抗體

型(xing)鋅指蛋(dan)白1抗體

BICR18細胞(bao)APC標記(ji)人(ren)CD16單克(ke)隆抗體

鋅指蛋(dan)白699抗體

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後首(shou)先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現象，若有(you)上述(shu)現象 發生(sheng)請(qing)及時和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說明(ming)書，了(le)解細(xi)胞(bao)相關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比例、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因子等(deng)，確保細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件不壹(yi)致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞(bao)出現問(wen)題，責(ze)任由 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面，顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於(yu)溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞(bao)狀態(tai)後，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細胞(bao)直接混勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並接種到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相同(tong)條(tiao)件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收到(dao)細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照片，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技術部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸的(de)原因(yin)，個(ge)別(bie)敏感細胞(bao)會出(chu)現不穩(wen)定的(de)情況，請及時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)，告(gao)知細胞(bao) 的(de)具(ju)體情況，以(yi)便(bian)我們的(de)技術人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供(gong)科研使(shi)用。

8. 備註：運(yun)輸用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請換(huan)用按照說明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件新配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後第(di)壹次傳(chuan)代建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。