C57/B1細胞(bao)

公(gong)司(si)產品(pin)僅供(gong)科研(yan)研究(jiu)使(shi)用(yong)、不得用(yong)於(yu)臨床診斷(duan)！

1、細胞(bao)傳代：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的培(pei)養(yang)液，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終止(zhi)消化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之脫落，然(ran)後將(jiang)懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸，然(ran)後按 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分瓶傳代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)；

壹(yi)、商(shang)品介紹(shao)：

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的培(pei)養(yang)液，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之脫落，然(ran)後將(jiang)懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍(dong)存管中；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存管放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中進(jin)行長期保存。使用(yong)程序(xu)

降溫盒可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處(chu)理(li)僅供(gong)參考，具體操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨產品(pin)說明書為主。將(jiang)含(han)有1 mL細胞(bao)懸液的(de)凍(dong)存管在(zai) 37℃水浴(yu)中迅速搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹(chui)勻。然(ran)後將(jiang)所(suo)有細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培(pei)養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過夜（或將(jiang)細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿中，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二(er)天(tian)換液(ye)並檢(jian)查(zha)細胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳代：如(ru)果細胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即可進(jin)行傳代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上清，用不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中，使消化液浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中消化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而定），然(ran)後在(zai)顯微(wei)鏡下觀(guan)察細胞(bao)消化情況(kuang)，若細胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓並脫落(luo)，迅速拿(na)回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後裝入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液按1:2比(bi)例(li)分到新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的新(xin)皿中或者瓶中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀態良(liang)好(hao)時，可進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶為例；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數。

b、根(gen)據細胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液，使(shi)細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每(mei)支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記錄(lu)凍(dong)存管位置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售的(de)產品：

體液單胺氧(yang)化(hua)酶（MAO）總活性比色法定(ding)量(liang)檢(jian)測試劑盒(he)

紅(hong)細胞(bao)可溶(rong)性膜蛋(dan)白(bai)（粗(cu)提(ti)）制(zhi)備試(shi)劑盒(he)

體液HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病(bing)毒定(ding)量(liang)PCR

CASPASE-10蛋(dan)白(bai)表達西方雜(za)交分析(xi)試(shi)劑盒(he)

組織(zhi)總氨基酸含(han)量(liang)熒光定(ding)量(liang)檢(jian)測試劑盒(he)

TEM電(dian)鏡石(shi)蠟切片(pian)免疫(yi)組織(zhi)化(hua)學(xue)AP酶聯NBT/BCIP間接(jie)檢(jian)測試劑盒(he)

組織(zhi)FLT3激酶活性(xing)定(ding)量(liang)檢(jian)測試劑盒(he)（A/B/C）

動物(wu)細胞(bao)周(zhou)期S期同(tong)步(bu)（SYNCHRONY）處(chu)理(li)試(shi)劑盒(he)

人血液(ye)前(qian)白(bai)蛋(dan)白(bai)（prealbumin；PA）免疫(yi)比濁(zhuo)法定(ding)量(liang)檢(jian)測試劑盒(he)

總脂肪酶（lipase）定量(liang)檢(jian)測試劑盒(he)

頂(ding)體形(xing)態刀豆(dou)素(su)A凝集(ji)素(su)熒光標記（ConA-FITC）染色試劑盒(he)

細胞(bao)色(se)素(su)P450亞酶(mei)2B6（BUPROPION）活性高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)法(fa)（HPLC）定量(liang)檢(jian)測試劑盒(he)

鈣(gai)ATP酶PMCA蛋(dan)白(bai)表達ELISA定量(liang)檢(jian)測試劑盒(he)

組織(zhi)艾(ai)滋病(bing)毒1（HIV-1 PROTEASE）活性熒光淬滅(mie)法

人體胚胎幹細胞(bao)培(pei)養(yang)基

載脂(zhi)蛋(dan)白(bai)B-mRNA編輯(ji)酶(mei)復(fu)合物(wu)2抗體

鈣(gai)調磷酸酶(mei)B相(xiang)關蛋(dan)白(bai)2抗體

清道夫(fu)受(shou)體B1+B2抗體

ISLR2蛋(dan)白(bai)抗(kang)體

細胞(bao)分裂(lie)周(zhou)期蛋(dan)白(bai)23重(zhong)組兔單克(ke)隆抗體

XVII型膠原(yuan)蛋(dan)白(bai)/膠原蛋(dan)白(bai)17/17型膠原(yuan)蛋(dan)白(bai)抗(kang)體

跨膜蛋(dan)白(bai)16A/鈣(gai)激活氯(lv)離(li)子(zi)通道抗(kang)體

C57/B1細胞(bao)APC標記人CD42a單克(ke)隆抗體

鋅(xin)指蛋(dan)白(bai)744抗(kang)體

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到細胞(bao)後首(shou)先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶是否完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液是否有漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及時和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說明書，了(le)解細胞(bao)相(xiang)關信(xin)息，如細胞(bao)形(xing)態、所(suo)用培(pei)養(yang)基、血清比例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保細胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹(yi)致，若由於(yu)培(pei)養(yang)條件不壹(yi)致而導(dao)致細胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責任(ren)由 客戶自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞(bao)瓶表面(mian)，顯微(wei)鏡下觀(guan)察細胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分細胞(bao)由(you)於(yu)溫度(du) 變(bian)化及劇烈碰亡破碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞(bao)可以(yi)消化，懸浮細胞(bao)直(zhi)接混勻收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮的(de)培(pei)養(yang)基重(zhong)懸 細胞(bao)，並接種到新(xin)的培(pei)養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件的培(pei)養(yang)基用於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收到細胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝通 交(jiao)流。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏感細胞(bao)會出(chu)現(xian)不穩(wen)定的情況，請(qing)及時和(he)我(wo)們聯系，告知(zhi)細胞(bao) 的(de)具體情況，以便(bian)我(wo)們(men)的技(ji)術人員跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至問(wen)題(ti)解決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供(gong)科研(yan)使用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液培(pei)養(yang)基) 不能再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)，請(qing)換用(yong)按照說明書細胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新(xin)配制(zhi)的培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後第(di)壹(yi)次(ci)傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。