苦參染(ran)料(liao)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑盒(he)保存(cun)

特點(dian)：
1. 即開(kai)即用，用戶只(zhi)需要(yao)提(ti)供病毒樣品。
2. 根(gen)據地(di)黃保(bao)守序(xu)列設計(ji)的專(zhuan)壹性引物，與相(xiang)關(guan)病(bing)毒無(wu)交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)。
3. 靈(ling)敏度(du)可(ke)以(yi)達(da)到幾(ji)百(bai)拷貝/反(fan)應(ying)。
4. 壹管式(shi)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避免後(hou)續汙染(ran)。
5. 本(ben)試(shi)劑盒(he)足(zu)夠 50 次(ci) 20μL 反(fan)應(ying)體(ti)系的熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產品(pin)只(zhi)適用於(yu)科研(yan)，不(bu)能用於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷(duan)。

使用方(fang)法(fa)：
壹、樣品采(cai)集：
1、食品樣品：樣品的采(cai)集與預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)樣品的采(cai)集與預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)《食品衛生(sheng)微(wei)生(sheng)物學(xue)檢驗(yan)阪(ban)崎腸桿(gan)菌(jun)檢(jian)驗(yan)要(yao)求進行。
2、血(xue)液樣品：用無(wu)菌(jun)註(zhu)射器抽取受(shou)檢(jian)者(zhe)靜脈(mai)血(xue)2mL，註入無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉(na))抗(kang)凝管(guan)，立(li)即混(hun)勻(yun)。
3、糞(fen)便(bian)樣品：取糞(fen)便(bian)置於(yu)滅(mie)菌(jun)的收(shou)集管中送檢(jian)。
4、病竈(zao)部(bu)位(wei)樣品：取發病部(bu)位(wei)新(xin)鮮(xian)滲出(chu)物、粘(zhan)液膿(nong)血(xue)送檢(jian)。
壹、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍稀(xi)釋(shi)度(du)為(wei)例(li)）
1. 註意：由(you)於(yu)標準(zhun)品濃(nong)度(du)非(fei)常(chang)高，因此(ci)下列(lie)稀釋(shi)操(cao)作(zuo)壹定(ding)要(yao)在獨立(li)的區(qu)域進行(xing)，千(qian)萬(wan)不(bu)能汙染(ran)樣品或(huo)本(ben)試(shi)劑盒(he)的其他成(cheng)分）。為(wei)增(zeng)加(jia)產品(pin)穩定(ding)性和避免擴(kuo)散傳染(ran)性病原(yuan)，本(ben)產品(pin)不(bu)提(ti)供活體樣品做陽性對照(zhao)，只(zhi)提(ti)供可以直接使(shi)用的 DNA段(duan)作(zuo)為(wei)陽(yang)性對照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個(ge)離心管(guan)，分別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯槍(qiang)頭(tou)分別(bie)加(jia)入 45 μL 熒光(guang) PCR 模(mo)板稀釋(shi)液(ye)（用帶(dai)芯槍(qiang)頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在 7 號管(guan)中加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yang)性對照(zhao)，充(chong)分震(zhen)蕩 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在 6 號管(guan)中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性對照(zhao)(上(shang)步稀(xi)釋(shi)所得(de))，充(chong)分震(zhen)蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在 5 號管(guan)中加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性對照(zhao)到(dao) 5 號管中，充分震(zhen)蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
7. 重復上(shang)面的操(cao)作直到(dao)得(de)到(dao) 6 個(ge)稀(xi)釋(shi)度(du)的陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
註：上(shang)述樣品建(jian)議(yi)經(jing)過增(zeng)菌(jun)後(hou)，收(shou)集(ji)培(pei)養(yang)物用於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二、DNA提(ti)取：
可(ke)采用PCR試(shi)劑盒(he)配備的DNA抽提(ti)液，按(an)以(yi)下說(shuo)明(ming)進(jin)行DNA核(he)酸(suan)的粗(cu)提(ti)。也可(ke)采購上(shang)海澤(ze)葉生(sheng)物科技有(you)限(xian)公(gong)司生(sheng)產的DNA提(ti)取試(shi)劑盒(he)(過(guo)柱法(fa)-熒光(guang)配套)或(huo)其他合(he)適的商(shang)業化(hua)產品，並按(an)照(zhao)相(xiang)應(ying)試(shi)劑盒(he)說明(ming)進(jin)行操作。
1、液(ye)體培(pei)養(yang)物：取液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)物100μL加(jia)到1.5mL無(wu)菌(jun)離心管(guan)中，8000rpm離心3min，盡(jin)量(liang)吸棄上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體培(pei)養(yang)物：挑(tiao)取單(dan)克(ke)隆(long)菌(jun)落與50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
3、糞(fen)便(bian)樣品：挑(tiao)取米(mi)粒(li)大(da)小糞(fen)便(bian)於(yu)滅(mie)菌(jun)離心管(guan)中，加(jia)入0.5mL生(sheng)理鹽水，振蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離心3分鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱中加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
4、其他液(ye)體標本(ben)：取標本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱中加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
註(zhu)：陽性對照(zhao)和陰性對照(zhao)為(wei)已(yi)經(jing)抽提(ti)好的核(he)酸(suan)(無(wu)需提(ti)取)，直(zhi)接取5μL加(jia)入到反(fan)應(ying)體(ti)系中即可(ke)。由(you)於(yu)陽(yang)性對照(zhao)濃(nong)度(du)較(jiao)高，建(jian)議(yi)在樣品制(zhi)備區(qu)域加(jia)入陽性對照(zhao)。 
實(shi)驗(yan)流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個(ge)檢(jian)測(ce)過(guo)程(cheng)應(ying)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)本(ben)說明(ming)書(shu)要求分別(bie)在試(shi)劑準(zhun)備區(qu)、樣本(ben)處理區(qu)和PCR擴(kuo)增(zeng)區(qu)進(jin)行(xing)操作，各(ge)區(qu)實(shi)驗(yan)服、儀器 、耗(hao)材(cai)應獨立(li)使(shi)用，不(bu)能混(hun)用；實(shi)驗(yan)用吸頭(tou)采用帶(dai)濾(lv)芯吸頭(tou)；樣本(ben)處理區(qu)應(ying)配有生(sheng)物安(an)全(quan)櫃(gui)，樣本(ben)處理在生(sheng)物安(an)全(quan)櫃(gui)中進行(xing)操(cao)作；三個(ge)區(qu)應該配(pei)有紫外(wai)線(xian)殺菌(jun)裝置。
2. 為(wei)避免RNA降(jiang)解(jie)，樣本(ben)處理過(guo)程(cheng)應(ying)在0-4℃條(tiao)件(jian)下操(cao)作，且(qie)完成(cheng)實(shi)驗(yan)後(hou)立(li)即上(shang)機檢(jian)測(ce)；樣本(ben)處理過(guo)程(cheng)中使用的器具耗(hao)材(cai)應經(jing)過(guo)無(wu)核(he)酶(mei)處理。
3. 每次(ci)實(shi)驗(yan)應(ying)該(gai)設(she)置陰、陽性對照(zhao)。
4. 試(shi)劑盒(he)所有(you)試(shi)劑在使(shi)用前應該(gai)在常(chang)溫下充(chong)分融(rong)化混(hun)勻(yun)，並(bing)應瞬(shun)時(shi)離心。
5. 試(shi)劑盒(he)內所配(pei)陰(yin)性和陽性對照(zhao)在壹次(ci)使用前應全(quan)部(bu)轉(zhuan)移(yi)至標本(ben)準備區(qu)，並單(dan)獨存放(fang)。
6. 為防止(zhi)熒(ying)光(guang)幹擾(rao)，應(ying)避免裸手直(zhi)接接(jie)觸PCR反(fan)應(ying)管(guan)，並(bing)應(ying)避免在PCR反(fan)應(ying)管(guan)上(shang)進行(xing)任何標記(ji)。
7. 儀器 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關(guan)參數(shu)應(ying)按(an)照(zhao)本(ben)說明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要(yao)求進行設(she)置(zhi)；不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)試(shi)劑不(bu)能混(hun)用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)參數(shu)設(she)置(zhi)中不(bu)選(xuan)ROX校正，淬滅(mie)基因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗(yan)過(guo)程(cheng)中產品(pin)的廢(fei)棄物應(ying)該進(jin)行無(wu)害化(hua)處理後(hou)方(fang)可(ke)丟(diu)棄(qi)。
儲存條(tiao)件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣品收(shou)集、處理及(ji)保(bao)存方(fang)法(fa)
1. 血(xue)清：使(shi)用不(bu)含熱原(yuan)和內毒素(su)的試(shi)管，操(cao)作過(guo)程(cheng)中避免任何細胞刺(ci)激，收(shou)集血(xue)液後(hou)，3000 轉離心10 分鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清和紅(hong)細胞(bao)迅速小心地(di)分離。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸(suan)鹽或肝素(su)抗(kang)凝。3000 轉(zhuan)離心30 分鐘(zhong)取上(shang)清。
3. 細胞(bao)上(shang)清液(ye)：3000 轉(zhuan)離心10 分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和聚(ju)合物。
4. 組(zu)織勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組織(zhi)加(jia)入適量(liang)生(sheng)理鹽水搗碎。3000 轉(zhuan)離心10 分鐘(zhong)取上(shang)清。
5. 保存(cun)：如果樣本(ben)收集(ji)後(hou)不(bu)及時檢測(ce)，請按(an)壹次(ci)用量(liang)分裝，凍存於(yu)-20℃，避免反(fan)復凍融(rong)，在室溫下解(jie)凍並(bing)確(que)保(bao)樣品均(jun)勻(yun)地(di)充(chong)分解(jie)凍。
人(ren)十二脂腸(chang)腺(xian)癌;HuTu-80鈉；SV鈉(na)Rifamycin  salt質(zhi)量(liang)規格(ge)：>900IU/mg ,BR

人骨(gu)髓間充(chong)質(zhi)幹細(xi)胞(bao)(骨(gu)髓)(HMSC-bm)(5×105)Octreotide acetate質(zhi)量(liang)規格(ge)：≥98%,BR

CM-R032大(da)鼠(shu)腸靜脈(mai)內(nei)皮細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基100mLS(+)-2-氨基-1-丁(ding)醇(chun)(S)-(+)-2-Ami-1-butal 質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%,液態(tai),0.944 g/mL ,25℃

小鼠(shu)單(dan)核(he)巨(ju)噬細胞;J774A.1 小(xiao)鼠(shu)肝動(dong)脈(mai)平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基 100mLD-鞘氨醇(chun)trans-D-erythro-sphingosine質(zhi)量(liang)規格(ge)：度≥98%

mRTEC, 小(xiao)鼠(shu)腎(shen)小(xiao)管(guan)上(shang)皮細(xi)胞(bao) Mouse糖(tang)脂;植(zhi)物鞘胺(an)醇(chun)ribophytosphingosine 質(zhi)量(liang)規格(ge)：≥98%,進口(kou)原(yuan)裝
大(da)額(e)牛(niu)皮膚成纖維樣細胞(bao);BOS-1氟(fu)草胺(an)(標準(zhun)品)質(zhi)量(liang)規格(ge)：分析標準(zhun)品Benfluralin

人腎(shen)臟上(shang)皮細(xi)胞(bao)(HREpiC)( 5×105 )苯(ben)並(k)熒(ying)蒽(標準(zhun)品)質(zhi)量(liang)規格(ge)：分析標準(zhun)品Benzo(k)fluoranthene

CL-0187PK-15(豬腎(shen)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2溴(xiu)藍(lan)[pH指(zhi)示(shi)劑(ji)]質(zhi)量(liang)規格(ge)：pH指示(shi)劑(ji)Bromochlorophel Blue

人結直腸(chang)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao);HCT-15 [HCT15] 大(da)鼠(shu)神(shen)經(jing)小(xiao)膠(jiao)質(zhi)細胞(bao)*培(pei)養(yang)基 100mL乙基(ji)橙[pH指示(shi)劑(ji)]質(zhi)量(liang)規格(ge)：pH指示(shi)劑(ji)Ethyl Orange

PC-12(高分化(hua)) 大(da)鼠(shu)腎(shen)上(shang)腺嗜(shi)鉻細(xi)胞(bao)瘤(liu)細胞(高(gao)分化(hua))4-乙氧(yang)基(ji)橘(ju)紅(hong)鹽酸(suan)鹽(>95.0%(T))質(zhi)量(liang)規格(ge)：>95.0%(T)4-Ethoxychrysoidine
FZD4 Others Rat 大(da)鼠(shu) Frizzled-4 / FZD4 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對照(zhao)) 乙酰質(zhi)量(liang)規格(ge)：>1200u/mg,CP2005Acetylspiramycin

支(zhi)氣(qi)管成纖維細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)尼(ni)羅(luo)替尼(ni)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98.5%,BRNilotinib

Daudi細胞(bao)，人白(bai)血(xue)病細(xi)胞 小鼠(shu)腎(shen)足(zu)細(xi)胞,Mouse podocyte細(xi)胞 骨(gu)骼肌細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基SkMCM-prf草酸(suan)銅(tong)(>97%,Tech Grade)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>97%,工業級Copper(II) oxalate hydrate

NCI-H157(人非(fei)小細胞(bao)肺(fei)腺癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2無(wu)水硫(liu)酸(suan)銅(tong)(>99%,BR)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%,BRCopper(II) sulfate, anhydrous

BEL-7404(人肝癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 CM-M006小(xiao)鼠(shu)肺(fei)成纖維細胞(bao)*培(pei)養(yang)基100mL 人成骨(gu)肉瘤細(xi)胞;Saos-2肌(ji)1;肌酐(gan)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%,BRCreatinine
苦參染(ran)料(liao)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑盒(he)保存(cun)人臍(qi)血(xue)間質(zhi)幹細(xi)胞(bao) Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells2,3,6,7,10,11-六(liu)(己氧(yang)基(ji))苯並菲(>98.0%(HPLC))質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexakis(hexyloxy)triphenylene

U266細胞(bao)，人骨(gu)髓瘤細(xi)胞(bao) 串珠(zhu)鐮刀菌(jun) 人(ren)胚腎(shen)二倍體(ti)細(xi)胞(bao);HEK-2二萘嵌(qian)苯(>98.0%(GC))質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98.0%(GC)Perylene

TE-11(人食管癌細胞) 5×106cells/