P30/OHK細胞(bao)

公(gong)司(si)產(chan)品僅(jin)供科研研究使(shi)用、不(bu)得用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

壹、商品介紹(shao)：

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長至覆(fu)蓋培(pei)養瓶的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中，倒置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫落，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分瓶傳代(dai)，最後放入 37℃，5%CO2細胞(bao)培養箱(xiang)中培養；

2、細胞(bao)凍存(cun)：

1）細胞(bao)生長至覆(fu)蓋培(pei)養瓶的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中，倒置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培(pei)養液終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)使之(zhi)脫落，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並放置於(yu)凍(dong)存(cun)管中；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍存(cun)管放置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉入(ru)液(ye)氮(dan)中進行長期(qi)保存(cun)。使用(yong)程序

降(jiang)溫盒可直接(jie)放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下細胞(bao)培養凍(dong)存(cun)處理(li)僅(jin)供參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書為(wei)主。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水浴中迅(xun)速搖晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基混(hun)合均勻。在1000 rpm條件(jian)下離心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後吹勻。然(ran)後將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入含適(shi)量培(pei)養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中培養過夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入10 cm皿中，加入約(yue)8 mL培養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢查(zha)細胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如果細胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即可進(jin)行傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂離(li)子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中，使消化液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況(kuang)而定(ding)），然(ran)後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消化情況(kuang)，若細胞(bao)大部(bu)分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速拿回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下培(pei)養瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻後裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液後吹勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養基的(de)新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中，置於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中培養。 3) 細胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀態(tai)良好時(shi)，可進(jin)行細胞(bao)凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)及細胞(bao)培養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件(jian)下離心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計數。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數量(liang)加(jia)入無血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)液，使(shi)細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻，每支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液，註意凍(dong)存(cun)管做好標(biao)識(shi)。將凍(dong)存(cun)管放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管位(wei)置以便(bian)下(xia)次拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在出(chu)售(shou)的(de)產品(pin)：

RatdopamineD2receptor,D2RELISAKit大(da)鼠(shu)多巴(ba)胺(an)D2受(shou)體(ti)(D2R)ELISA試(shi)劑(ji)盒規格：96T/48T

細(xi)胞(bao)纖維(wei)蛋白(bai)溶(rong)酶(mei)原(yuan)激(ji)活(huo)劑(ji)抑制物(PAI)活(huo)性化學(xue)發光(guang)法(fa)定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒20次

大鼠(shu)雌激(ji)素受體(ti)(ER)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ，英(ying)文(wen)名： ER ELISA Kit

Mouse aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 小(xiao)鼠(shu)Ⅲ型前膠(jiao)原(yuan)氨(an)基端(duan)肽(tai)(PⅢ)ELISA試(shi)劑(ji)盒

ELISA 小(xiao)鼠(shu)C反(fan)應蛋白(bai)(mouse CRP) 48T/96T 進(jin)口(kou)分(fen)裝(zhuang)

ELISAKitHBsAg小(xiao)鼠(shu)乙型肝炎(yan)表(biao)面(mian)抗(kang)原(yuan)規格：48T/96T

HumanCollageypeⅡ，ColⅡELISAKit人Ⅱ型膠(jiao)原(yuan)(ColⅡ)ELISA試(shi)劑(ji)盒規格：96T/48T

人(ren)熱休克蛋白(bai)70(HSP-70)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 96T/48T 試(shi)劑(ji)盒 組裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)

小(xiao)鼠(shu)血(xue)小(xiao)板因子4(PF-4/CXCL4)免疫(yi)試(shi)劑(ji)盒 Mouse Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit

麻(ma)疹(zhen)病(bing)毒(du)(MV)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(-PCR法(fa)) 48T

CLIAKitforsP-selectin(MousesolubleP-selectin)ELISAKit小(xiao)鼠(shu)可溶(rong)性P選(xuan)擇素規格：48T/96T

人(ren)血(xue)液(ye)脂(zhi)蛋白(bai)A(lipoproteinA)免疫(yi)比(bi)濁法定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒20次

ELISAKitMIP-5人巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)炎(yan)性蛋白(bai)5規格：48T/96T

大(da)鼠(shu)氧還(hai)原(yuan)蛋白(bai)過(guo)氧化(hua)物酶(mei)2(PRDX2)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 96T/48T 試(shi)劑(ji)盒 組裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)

人(ren)相(xiang)撲結合酶(mei)UBC9(UBE2I/UBC9/UBCE9)免疫(yi)試(shi)劑(ji)盒 Human SUMO-conjugating enzyme UBC9,UBE2I/UBC9/UBCE9 ELISA kit

腫(zhong)瘤(liu)錯配(pei)修復(fu)基因(yin)PMS1抗(kang)體(ti)

骨/軟骨蛋白(bai)多(duo)糖1重組兔單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)

溶(rong)質(zhi)載(zai)體(ti)家(jia)族蛋白(bai)22成(cheng)員(yuan)A1/有(you)機(ji)陽(yang)離(li)子(zi)轉運蛋白(bai)1抗(kang)體(ti)

MICAL樣(yang)蛋白(bai)2抗(kang)體(ti)

纖(xian)維(wei)連接(jie)蛋白(bai)抗(kang)體(ti)

白(bai)介(jie)素-23受(shou)體抗(kang)體(ti)

磷(lin)酸化(hua)GATA結(jie)合蛋白(bai)2抗(kang)體(ti)

P30/OHK細(xi)胞(bao)CD3G重(zhong)組兔單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)

血(xue)紅(hong)素氧合酶(mei) 1抗(kang)體(ti)

三(san)、培(pei)養(yang)註意事(shi)項 

1. 收(shou)到細胞(bao)後首(shou)先(xian)觀察細(xi)胞(bao)瓶是否(fou)完好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏液、渾濁等(deng)現象，若有上(shang)述(shu)現象 發生請及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱讀細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解細胞(bao)相關(guan)信(xin)息，如細胞(bao)形態、所(suo)用培養(yang)基、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因子等(deng)，確(que)保細(xi)胞(bao)培養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞(bao)出現問題(ti)，責(ze)任(ren)由 客戶自(zi)行承擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分細胞(bao)由於(yu)溫度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇烈碰亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶壁將 T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可以消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混勻收集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮的(de)培養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中進行培養。

5. 請客戶用相同條(tiao)件(jian)的(de)培養(yang)基用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培養。

6. 建(jian)議(yi)客戶收到細胞(bao)後前 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張細胞(bao)照(zhao)片，記錄(lu)細胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於(yu)和我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由於(yu)運輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細胞(bao)會出現不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情況(kuang)，請及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情況(kuang)，以便(bian)我(wo)們(men)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直至問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的(de)培養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培養(yang)基) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請換用(yong)按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制的(de)培養(yang)基來(lai)培養細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後第壹次傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。