Tera-2細胞(bao)

公司產(chan)品(pin)僅供科研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

壹、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細胞生長至覆蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡下觀察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再輕輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使之脫(tuo)落，然後將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然後按 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長至覆蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡下觀察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加入(ru)培養(yang)液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹(chui)打細胞(bao)使之脫(tuo)落，然後將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並放置(zhi)於(yu)凍(dong)存管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存管放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。使用(yong)程(cheng)序降溫盒(he)可(ke)直接放入-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下細胞培(pei)養(yang)凍(dong)存處理(li)僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞懸(xuan)液的凍(dong)存管在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹(chui)勻。然後將(jiang)所(suo)有(you)細胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)含適(shi)量(liang)培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或將細胞懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液並檢查(zha)細胞(bao)密度。

2) 細胞傳代：如果(guo)細胞密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代培養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子的PBS潤洗細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況(kuang)而定(ding)），然後在顯(xian)微鏡下觀察(cha)細胞(bao)消化(hua)情(qing)況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落，迅(xun)速拿回(hui)操作(zuo)臺，輕敲幾下培養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液按1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的含8 mL培養(yang)基(ji)的新皿(min)中(zhong)或者瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細胞(bao)生長狀(zhuang)態(tai)良好時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下離心4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量加入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞凍(dong)存液，使(shi)細(xi)胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻，每支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意凍(dong)存管做(zuo)好標識。將(jiang)凍(dong)存管放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管位置(zhi)以(yi)便(bian)下次(ci)拿(na)取。

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後首先觀察(cha)細胞(bao)瓶是(shi)否完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾濁等(deng)現象，若有(you)上(shang)述(shu)現象 發生請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞相關信息(xi)，如細胞(bao)形態、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因(yin)子等(deng)，確保(bao)細(xi)胞培養(yang)條件壹致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培(pei)養(yang)條件不壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細(xi)胞出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任由 客戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表面，顯(xian)微鏡下觀察(cha)細胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞由於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破(po)碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好細(xi)胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞直接混勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新鮮的培養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細胞(bao)，並接種到(dao)新的培養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶用(yong)相同條件的培養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客戶收(shou)到(dao)細胞(bao)後前 3 天各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細胞照片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便於(yu)和我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝(gou)通 交流。由於(yu)運(yun)輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細胞(bao)會出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知細胞(bao) 的具體情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的技術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供(gong)科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液培養(yang)基(ji)) 不能再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換用(yong)按照說(shuo)明(ming)書細(xi)胞培 養(yang)條件新配(pei)制的培養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後第(di)壹次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司正(zheng)在出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：

通用(yong)型(xing)丁(ding)酰酯(zhi)酶活(huo)性(xing)化(hua)學(xue)發(fa)光(guang)法(fa)定(ding)量(liang)檢測(ce)試(shi)劑盒20次(ci)

CLIAKitforISR-BetaELISAKit大(da)鼠(shu)胰島(dao)素受(shou)體β規格(ge)：48T/96T

ELISAKitTNFsR-Ⅱ大(da)鼠(shu)壞死(si)因(yin)子可(ke)溶(rong)性(xing)受(shou)體Ⅱ規格(ge)：48T/96T

大(da)鼠(shu)半胱酸(suan)抑制劑/胱抑素(su)C(Cys-C)ELISA 試(shi)劑盒 96T/48T 試(shi)劑盒 組裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)

人絡(luo)酶(mei)(TYR)免疫(yi)試(shi)劑盒 Human Tyrosinase,TYR ELISA kit

HumanSS-B/LaAibody,ELISA試(shi)劑盒人(ren)抗SS-B/La抗體ELISA試(shi)劑盒規格(ge)：96T/48T

ELISAKitAQP-4小鼠(shu)水(shui)通道(dao)蛋白4規格(ge)：48T/96T

Humanbasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4ELISAKit人堿(jian)性(xing)成纖維細胞(bao)生長因(yin)子4(bFGF-4)ELISA試(shi)劑盒規格(ge)：96T/48T

人M(IgM)ELISA 試(shi)劑盒 96T/48T 試(shi)劑盒 組裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)

小鼠(shu)特異(yi)性(xing)抗(kang)中(zhong)性(xing)粒(li)細(xi)胞胞質(zhi)抗(kang)體 免疫(yi)試(shi)劑盒 Mouse myeloperoxidase-aineuophil cytoplasmic aibody ELISA kit

Mousemonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAkit 小鼠(shu)單(dan)核(he)細(xi)胞(bao)趨(qu)化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試(shi)劑盒 96T/48T 進(jin)口分(fen)裝(zhuang)

CLIAKitforHumanBetaamyloidprecursorprotein,BetaAPPELISAKit人澱粉(fen)樣(yang)前體蛋白規格(ge)：48T/96T

細胞(bao)EBV(EPSTEIN-BARR)病毒(du)定(ding)性(xing)檢測(ce)試(shi)劑盒20次(ci)

ELISAKitLDL-IC大(da)鼠(shu)低密度脂蛋白免疫(yi)復(fu)合物(wu)規格(ge)：48T/96T

大(da)鼠(shu)血管內皮生長因(yin)子D(VEGFD)ELISA試(shi)劑盒 ，英文名(ming)： VEGFD ELISA Kit

周(zhou)期素(su)G2抗體

含SH2結(jie)構(gou)域蛋白D5抗體

三(san)磷酸(suan)腺(xian)苷(gan)結(jie)合盒(he)亞(ya)家族(zu)G1抗體

NDUFAF4抗體

線粒(li)體內膜轉(zhuan)位同源蛋白50抗體

伴(ban)肌動蛋白相關錨定(ding)蛋白抗體

磷酸(suan)化雌(ci)激(ji)素(su)受體ER alpha 抗體

Tera-2細(xi)胞(bao)Cullin3抗(kang)體

氧(yang)化(hua)還(hai)原(yuan)酶(mei)GlyR1/核(he)蛋白60抗體