轉(zhuan)基(ji)因(yin)玉米(mi)Bt10核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)

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 產品(pin)名稱：轉(zhuan)基(ji)因(yin)玉米(mi)Bt10核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)
規(gui)格：48T   0.2PCR管
編號(hao)：BH-P97100
分類(lei)：PCR-熒(ying)光(guang)探針法(fa)
儲(chu)存條(tiao)件(jian)：-20℃避光(guang)保存，避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融。
運輸(shu)：低(di)溫(wen)、避光(guang)，快遞免(mian)費(fei)送(song)貨上(shang)門。
產品(pin)特(te)點(dian)：
◇高特(te)異性(xing)：與其他(ta)病(bing)毒無(wu)交(jiao)叉(cha)反應，無(wu)非(fei)特(te)異性(xing)擴增；
◇高靈(ling)敏度：檢(jian)測(ce)靈(ling)敏度可(ke)達(da)10~100拷(kao)貝(bei)；
◇操(cao)作簡便：該(gai)系列所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)均(jun)采(cai)用相同的體系和條(tiao)件(jian)，可(ke)同時進(jin)行多(duo)個(ge)檢(jian)測(ce)；
◇高通量：多(duo)種(zhong)雙重(zhong)PCR檢測(ce)以(yi)及(ji)三(san)重(zhong)PCR檢測(ce)試劑(ji)盒(he)。

準備物(wu)品：
清(qing)理(li)液(ye)（A）                                   毫升
染色液(ye)（t B）                                   微(wei)升
稀釋液(ye)（C）                                   毫升
溶(rong)解液(ye)（tD）                                   毫升
產品(pin)說明書(shu)                                   1份(fen)
使用及效(xiao)果：
PCR反應特(te)點(dian)
(1) 特(te)異性(xing)強
PCR反應的特(te)異性(xing)決(jue)定因素為(wei)：
①引物(wu)與模(mo)板(ban)DNA特(te)異正確(que)的結合(he)；
②堿(jian)基(ji)配對(dui)原則(ze)；
③Taq DNA聚合(he)酶(mei)合(he)成(cheng)反應的忠(zhong)實性(xing)；
④靶基(ji)因(yin)的特(te)異性(xing)與保(bao)守性(xing)。
其中(zhong)引(yin)物(wu)與模(mo)板(ban)的正確(que)結合(he)是(shi)關鍵。引(yin)物(wu)與模(mo)板(ban)的結合(he)及(ji)引物(wu)鏈的延伸是遵(zun)循(xun)堿(jian)基(ji)配對(dui)原則(ze)的。聚合(he)酶(mei)合(he)成(cheng)反應的忠(zhong)實性(xing)及Taq DNA聚合(he)酶(mei)耐(nai)高(gao)溫性(xing)，使反應中(zhong)模(mo)板(ban)與(yu)引(yin)物(wu)的結合(he)(復(fu)性(xing))可以(yi)在(zai)較(jiao)高的溫度下進(jin)行，結合(he)的特(te)異性(xing)大大(da)增加(jia)，被擴增的靶基(ji)因(yin)片(pian)段(duan)也(ye)就能(neng)保(bao)持(chi)很高的正確(que)度。再(zai)通過選擇特(te)異性(xing)和保(bao)守性(xing)高的靶基(ji)因(yin)區(qu)，其特(te)異性(xing)程(cheng)度就(jiu)更(geng)高(gao)。
(2) 靈(ling)敏度高(gao)
PCR產物(wu)的生成(cheng)量是(shi)以(yi)指數(shu)方式(shi)增加的，能將(jiang)皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量級(ji)的起始待(dai)測(ce)模(mo)板(ban)擴增到(dao)微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xi)胞中(zhong)檢(jian)出(chu)壹個靶(ba)細(xi)胞；在(zai)病(bing)毒的檢測(ce)中(zhong)，PCR的靈(ling)敏度可(ke)達(da)3個RFU(空(kong)斑形成(cheng)單位)；在(zai)細菌學(xue)中(zhong)zui小檢出(chu)率(lv)為(wei)3個細菌(jun)。
(3) 簡便、快速(su)
PCR反應用耐高(gao)溫的Taq DNA聚合(he)酶(mei)，壹(yi)次(ci)性(xing)地(di)將(jiang)反應液(ye)加好後(hou)，即在(zai)DNA擴增液(ye)和水浴(yu)鍋(guo)上(shang)進(jin)行變(bian)性(xing)-退火-延伸反應，壹(yi)般在(zai)2～4 小時完(wan)成(cheng)擴增反應。擴增產物(wu)壹般(ban)用電(dian)泳分(fen)析(xi)，不(bu)壹定(ding)要用同位素，無(wu)放(fang)射(she)性(xing)汙染、易(yi)推廣(guang)。
(4) 對(dui)標(biao)本的純(chun)度要求(qiu)低(di)
不(bu)需(xu)要分離(li)病(bing)毒或細菌(jun)及培養(yang)細胞，DNA 粗制品及(ji)總RNA均可作(zuo)為(wei)擴增模(mo)板(ban)。可(ke)直(zhi)接用臨床標(biao)本如(ru)血(xue)液(ye)、體腔(qiang)液(ye)、洗嗽液(ye)、毛發、細(xi)胞、活PCR技術概(gai)論(lun)。
CGA Others Human  FSH alpha / TSH alpha / CGA 細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) Paclitaxel>99%,BR,用於細胞培養(yang),藥劑(ji)造(zao)模(mo)

敘利亞(ya)倉鼠皮膚(fu)細(xi)胞;GH-S1（）PaclitaxelHPLC>98%,

APP-PS1(M146L)雙基(ji)因(yin)轉(zhuan)染CHO細胞株;7WML6.0 癌細胞，MDA-MB-453細胞 GIK細胞，草魚(yu)腎細胞系Palonosetron HCl>98.5%,BR,可用於細胞培養(yang)

皮膚(fu)成(cheng)纖維(wei)細胞;CCC-HSF-1Paromomycin Sulfate≥675 U/mg,USP28

HA Others H9N2 甲(jia)型(xing)流(liu)感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) ()Paromomycin Sulfate含(han)量測(ce)定
豬(zhu)腎細胞;LLC-PK1 惡(e)性(xing)非(fei)霍(huo)奇金(jin)瘤(liu)患(huan)者(zhe)的自然殺傷(shang)細胞，NK-92細胞 P615細胞，615小鼠狀肺腺癌瘤株(zhu)鹽(yan)酸(suan)吡(bi)哆醛>98%,BRPyridoxal

Asp2胚(pei)胎(tai)腎細胞轉(zhuan)化(hua)細(xi)胞;FC33矽(gui)油BRSilicone oil

HA Others H5N1 甲(jia)型(xing)流(liu)感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) >99%,AR bromide

CL-0283Ishikawa(內膜(mo)癌細胞)5×106cells/瓶(ping)×2D-α-氨基(ji)己(ji)二酸(suan)0.97D-a-Aminoadipic acid

PLK1 Others Human  PLK1 / PLK-1 桿(gan)狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) D-高苯>90%(T),BRD-Homophenylalanine
轉(zhuan)基(ji)因(yin)玉米(mi)Bt10核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)CSF2 Protein Rat 重組大(da)鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白(bai) (His 標(biao)簽(qian))1,5,9-三氮雜(za)環(huan)十二烷(wan)(>90.0%(GC))>90.0%(GC)1,5,9-Triazacyclododecane

T-24(膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 甲(jia)型(xing)流(liu)感 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 1,4,7-三氮雜(za)環(huan)壬(ren)烷(wan)(>98.0%(GC))>98.0%(GC)1,4,7-Triazacyclononane

外根(gen)殼細胞cDNAHHORSC cDNA1,4,7-基(ji)-1,4,7-三氮雜(za)環(huan)壬(ren)烷(wan)(含(han)穩定(ding)劑(ji))>98.0%(GC)(T)1,4,7-Trimethyl-1,4,7-triazacyclononane (stabilized with NaHCO3)

SELP Others Rat 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 1,4,8,11-四硫代環(huan)十四烷(wan)(>98.0%(GC))>98.0%(GC)1,4,8,11-Tetrathiacyclotetradecane

小鼠腹水瘤細胞;S-1801,4,7-三硫雜環(huan)壬(ren)烷(wan)(>98.0%(GC))>98.0%(GC)1,4,7-Trithiacyclononane
檢測(ce)步(bu)驟(zhou)：
壹、 試劑(ji)的準備(bei)
從試劑(ji)盒(he)中(zhong)取(qu)出(chu)熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混(hun)合物(wu)(Enzymes MIX)，冰(bing)上(shang)融化(hua)並(bing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻後(hou)，10000rpm離(li)心10s。
設所(suo)需(xu)要的PCR反應管管數(shu)為(wei)N(N=樣(yang)本數(shu)+1管陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)+1管陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))，每個測(ce)試反應體(ti)系配制如下表：
試劑(ji) 每個反應加(jia)入的量 N個反應加(jia)入的量
熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye) 14µL N×14µL
酶混(hun)合物(wu) 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試(shi)劑(ji)的使用量，加(jia)入(ru)壹(yi)適(shi)當體(ti)積潔凈(jing)離(li)心管中(zhong)，充(chong)分(fen)混(hun)勻，10000rpm離(li)心10s，向設定的N個PCR反應管中(zhong)分(fen)別(bie)加入15μL熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye)，向每管中(zhong)加(jia)入(ru)處理後(hou)樣(yang)品或(huo)陰性(xing)對(dui)照(zhao)(NTC)和陽性(xing)對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離(li)心10秒。
7.2 qPCR反應條(tiao)件(jian)
將(jiang)各(ge)反應管放(fang)入(ru)定(ding)量PCR儀器(qi)的反應槽內。
循環(huan)條(tiao)件(jian):
1循環(huan) 50℃ for 2 min
預變性(xing) 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延伸時收集(ji)熒(ying)光(guang)信號(hao)。報告基(ji)團(tuan)：設(she)置為(wei)FAM。淬滅基(ji)團(tuan)：NONE，請勿選(xuan)擇ROX參比熒(ying)光(guang)。