OVMANA細胞

公司產(chan)品僅(jin)供科(ke)研研究使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨床診(zhen)斷！

 壹、商(shang)品介紹(shao)：

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生長至覆(fu)蓋培養瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培養液，用 PBS 清洗細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液終止消化，再輕輕吹打(da)細胞使(shi)之脫落，然(ran)後將(jiang)懸液轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈澱細胞用 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細胞凍存：

1）細胞生長至覆(fu)蓋培養瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培養液，用 PBS 清洗細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養液終

止消化，輕輕吹打(da)細胞使(shi)之脫落，然(ran)後將(jiang)懸液轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並放(fang)置(zhi)於凍存管(guan)中(zhong)；

4）先將細胞凍存管(guan)放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入液氮中(zhong)進(jin)行(xing)長期保(bao)存。使(shi)用(yong)程(cheng)序

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培養操(cao)作

1) 復蘇(su)細胞：以下細胞培養凍存處(chu)理僅供參(can)考(kao)，具體(ti)操(cao)作步驟(zhou)以隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書(shu)為主。將含(han)有(you)1 mL細胞懸液的凍存管(guan)在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅速搖(yao)晃解凍，加(jia)4 mL培養基(ji)混(hun)合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所有(you)細胞懸液加(jia)入(ru)含適量(liang)培養基(ji)的培養瓶(ping)中(zhong)培養過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細胞懸液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜(ye)）。第二(er)天換(huan)液並檢(jian)查細胞密(mi)度。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄(qi)去培養上(shang)清，用不(bu)含鈣、鎂離子(zi)的PBS潤洗細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤(run)所有(you)細胞，將培養瓶(ping)置於37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而(er)定），然(ran)後在(zai)顯微鏡(jing)下觀(guan)察細胞消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大部分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落，迅速拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養基(ji)終(zhong)止消化。輕輕打勻後裝(zhuang)入無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清液，補加(jia)1-2 mL培養液後吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸液按(an)1:2比例(li)分(fen)到新的含8 mL培養基(ji)的新皿中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細胞凍存：待(dai)細胞生長狀態良好時(shi)，可(ke)進行細胞凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細胞及細胞培養液，裝(zhuang)入無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清液，用PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細胞計數。

b、根據細胞數量(liang)加(jia)入(ru)無血(xue)清細胞凍存液，使(shi)細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管(guan)凍存1mL細胞懸液，註意凍存管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入液氮灌(guan)儲存(cun)。記錄凍存管(guan)位(wei)置以便下次(ci)拿取(qu)。

公司正在(zai)出(chu)售(shou)的產品(pin)：

通(tong)用(yong)型HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病(bing)毒(du)定性(xing)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒20次(ci)

CLIAKitforLH(Rabbitleoopichormone)ELISAKit兔(tu)子(zi)促黃體(ti)激素規(gui)格(ge)：48T/96T

ELISAKitHSPgp96熱(re)休克蛋(dan)白(bai)糖蛋白96規(gui)格(ge)：48T/96T

大(da)鼠(shu)雌三醇(chun)(E3)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 96T/48T 試(shi)劑(ji)盒 組(zu)裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)

人(ren)結合蛋白(BIP)免(mian)疫(yi)試劑(ji)盒 Human immunoglobulin binding protein，BIP ELISA KIT

HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISA試(shi)劑(ji)盒人(ren)抗肝(gan)可溶性抗原(yuan)抗體(ti)(SLA)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

ELISAKitfPSA小鼠(shu)遊離前列(lie)腺(xian)特異性(xing)抗原(yuan)規格(ge)：48T/96T

Humancollectinsub-familymember11,COLEC11ELISAKit人(ren)集蛋(dan)白亞家族(zu)成員11(COLEC11)ELISA試(shi)劑(ji)盒規(gui)格(ge)：96T/48T

人(ren)絨毛膜(mo)(HCG)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 96T/48T 試(shi)劑(ji)盒 組(zu)裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)

小鼠(shu)氧(yang)化高(gao)密(mi)度脂(zhi)蛋(dan)白(bai)(Ox-HDL)免(mian)疫(yi)試劑(ji)盒 Mouse oxidized high density lipoprotein,Ox-HDL ELISA Kit

大(da)鼠(shu)Toll樣(yang)受體(ti)7(TLR-7)免(mian)疫(yi)試劑(ji)盒 Rat toll-like receptor 7,TLR-7 ELISA Kit

CLIAKitforsRANKLELISAKit大(da)鼠(shu)可溶性(xing)核(he)因(yin)子(zi)κB受(shou)體(ti)活(huo)化因(yin)子(zi)配基(ji)規(gui)格(ge)：48T/96T

人(ren)血(xue)液載(zai)脂(zhi)蛋白A1(APOLIPOPROTEINA1)免(mian)疫(yi)比濁(zhuo)法(fa)定量(liang)檢測(ce)試劑(ji)盒20次(ci)

ELISAKitAgrin人(ren)聚集(ji)蛋白規格(ge)：48T/96T

大(da)鼠(shu)氧(yang)化低(di)密(mi)度脂(zhi)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)(OLAb)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 96T/48T 試(shi)劑(ji)盒 組(zu)裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)

腫(zhong)瘤/睪(gao)丸(wan)抗原(yuan)家族(zu)104成員3抗體(ti)

谷(gu)氧(yang)還蛋(dan)白/巰(qiu)基(ji)轉(zhuan)移酶抗體(ti)

溶(rong)質(zhi)載(zai)體(ti)家族(zu)蛋白(bai)1成員A4抗體(ti)

MGEA5抗體(ti)

纖(xian)維(wei)蛋(dan)白(bai)肽(tai)A抗體(ti)

白(bai)介素(su)21受(shou)體(ti)抗體(ti)

磷酸(suan)化FMS樣(yang)酪激酶3抗體(ti)

OVMANA細胞CD39樣蛋(dan)白2/ENTPD6抗體(ti)

血(xue)紅蛋(dan)白ε抗體(ti)

三、培養註意事項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞後首(shou)先觀(guan)察細胞瓶是(shi)否(fou)完好(hao)，培養液是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請及時(shi)和我(wo)們(men)聯系(xi)。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞說(shuo)明書(shu)，了解細胞相(xiang)關信息(xi)，如(ru)細胞形態、所用(yong)培養基(ji)、血(xue)清比例(li)、所需(xu) 細胞因(yin)子(zi)等，確保(bao)細胞培養條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦(ca)拭細胞瓶表面(mian)，顯微鏡(jing)下觀(guan)察細胞狀態。因(yin)運(yun)輸問(wen)題，部分(fen)細胞由於溫度 變(bian)化(hua)及劇烈(lie)碰亡(wang)破(po)碎形成碎片(pian)，是(shi)正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞狀態後，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以消化，懸浮(fu)細胞直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的培養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接(jie)種到新(xin)的培養瓶(ping)或培養皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條(tiao)件(jian)的培養基(ji)用(yong)於(yu)細胞培養。

6. 建議客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後前 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞照片，記錄細胞狀態，便於(yu)和我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由於運輸的原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏(min)感細胞會出(chu)現(xian)不(bu)穩定的情(qing)況(kuang)，請(qing)及時(shi)和我(wo)們(men)聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的具體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我們的技術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤回(hui)訪直至問(wen)題解決。

7. 該細胞僅供科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸用(yong)的培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不(bu)能再用(yong)來(lai)培養細胞，請換用按(an)照說(shuo)明書(shu)細胞培 養條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制的培養基(ji)來(lai)培養細胞。     收到細胞後第壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。