MOR細(xi)胞(bao)

公(gong)司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使(shi)用、不(bu)得(de)用於臨(lin)床診(zhen)斷！

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹：

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養(yang)

液終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行分瓶(ping)傳(chuan)代，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入培(pei)養(yang)液終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並放置(zhi)於凍(dong)存管中；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入(ru)液氮中進(jin)行長期保(bao)存。使(shi)用程(cheng)序

降溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍存處理僅供(gong)參考，具(ju)體操作步驟以(yi)隨貨產品(pin)說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞(bao)懸液的(de)凍存管在 37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合均勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下離心3 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所有細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入含適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)過夜（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二(er)天換(huan)液並檢查(zha)細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細(xi)胞(bao)密度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上清(qing)，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離子的(de)PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消化(hua)液(ye)浸潤(run)所有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置於37℃培(pei)養(yang)箱中消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況(kuang)而定(ding)），然後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大部分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅速拿回操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止(zhi)消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液按(an)1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新的含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時，可(ke)進(jin)行細(xi)胞(bao)凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝入(ru)無菌離心管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量加入無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍存液，使(shi)細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管凍存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍存管做好(hao)標識。將(jiang)凍(dong)存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌儲存。記錄凍存管位置以(yi)便下次拿取(qu)。

公(gong)司正在出售的(de)產品(pin)：

藻(zao)類(lei)細(xi)胞(bao)鐵型(xing)亞(ya)鹽(yan)還原酶活性比(bi)色(se)法定(ding)量檢測試(shi)劑(ji)盒

體外加(jia)帽RNA轉錄合成(cheng)試劑盒

純(chun)化(hua)葉(ye)綠體DNA萃取(qu)試(shi)劑盒

GSK-3BETA蛋白免(mian)疫共沈澱分(fen)析(xi)試劑(ji)盒(he)

通(tong)用型馬原蟲性腦(nao)脊(ji)髓(sui)炎（Equine Protozoa Myeloencephalitis）

組織(zhi)鈉離子（Na）濃度化(hua)學(xue)比色法定(ding)量檢測試(shi)劑(ji)盒

細(xi)菌半(ban)乳糖(tang)總(zong)含量酶連續(xu)循(xun)環(huan)反(fan)應比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測試(shi)劑(ji)盒

石蠟切(qie)片(pian)氧化(hua)8-氧脫(tuo)氧(yang)鳥(niao)苷（8-oxo-dG）熒(ying)光(guang)染色(se)測定試劑(ji)盒

Lowy FMA固著液

腸毒素D（Staphylococcus aureus : enterotoxin D）鑒定(ding)16S rDNA PCR擴(kuo)增檢測試(shi)劑(ji)盒

細(xi)胞(bao)PDGF-A蛋白表(biao)達(da)比色(se)法定量檢測試(shi)劑(ji)盒

糖(tang)類(lei)蔗(zhe)糖(tang)比色法(fa)定(ding)量檢測試(shi)劑(ji)盒

組蛋白賴(lai)特異性(xing)脫(tuo)甲(jia)基(ji)酶1（ LYSINE SPECIFIC DEMETHYLASE-1；LSD-1）活性熒(ying)光(guang)定(ding)量檢測試(shi)劑(ji)盒

組織(zhi)MAPKAP KINASE2激酶活性定(ding)量檢測試(shi)劑(ji)盒（A/B/C）

OXALATE（鉀鹽(yan)）血(xue)液抗(kang)凝(ning)液(ye)

脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)型脂(zhi)肪酸結(jie)合蛋白抗(kang)體

睪丸(wan)特異蛋白抗(kang)體

人乙(yi)肝(gan)病(bing)毒Large S蛋白抗(kang)體

LSMD1蛋白抗(kang)體

細(xi)胞(bao)纖毛內轉(zhuan)運同源(yuan)蛋白122抗體

癌/睪丸(wan)抗原(yuan)63

淋巴(ba)細(xi)胞(bao)特異性(xing)蛋白酪激酶抗體

MOR細(xi)胞(bao)B淋巴(ba)細(xi)胞(bao)連接蛋白抗(kang)體

嗅(xiu)覺受(shou)體5H15抗體

三、培(pei)養(yang)註意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完好(hao)，培(pei)養(yang)液是(shi)否有(you)漏液、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述現象(xiang) 發生請(qing)及時和我們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解(jie)細(xi)胞(bao)相關信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形態(tai)、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因子等(deng)，確保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)壹(yi)致，若由於培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹(yi)致而導致細(xi)胞(bao)出現問題，責(ze)任由(you) 客(ke)戶自行承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運輸(shu)問(wen)題，部分細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度 變化(hua)及劇烈碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正常現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀態(tai)後，75%酒精(jing)消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮(xian)的培(pei)養(yang)基(ji)重懸 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到(dao)新的培(pei)養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶用相同條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便於和我司技術部溝通(tong) 交(jiao)流。由於運輸(shu)的(de)原因(yin)，個別(bie)敏感(gan)細(xi)胞(bao)會出現不(bu)穩(wen)定的情(qing)況(kuang)，請(qing)及時和我們聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具(ju)體情況(kuang)，以(yi)便我們的技術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用的培(pei)養(yang)基(ji) (灌液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換用按(an)照說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件(jian)新配制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳(chuan)代建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。