HCC-2108細胞(bao)

公(gong)司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研研究使(shi)用、不得用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

壹(yi)、商(shang)品介紹：

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細胞(bao)壹次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待細胞(bao)回縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕吹打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落，然後將懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清，沈澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸，然後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細胞(bao)壹次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待細胞(bao)回縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕吹打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落，然後將懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放(fang)置於(yu)凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然後將其移入-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中進行長期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培養(yang)凍(dong)存(cun)處理(li)僅供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操作步驟以隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培養(yang)基混合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後吹(chui)勻(yun)。然後將所有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含適(shi)量(liang)培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中(zhong)培養(yang)過(guo)夜（或將細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入約8 mL培養(yang)基，培養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上清，用不含(han)鈣、鎂離(li)子的(de)PBS潤洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所有(you)細(xi)胞(bao)，將培養(yang)瓶置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而(er)定），然後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況，若(ruo)細胞(bao)大部分(fen)變圓(yuan)並脫落，迅速拿回操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培養(yang)基終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕打勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例分到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基的(de)新(xin)皿中或者(zhe)瓶中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀態(tai)良好時(shi)，可(ke)進(jin)行細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集細胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，用PBS清洗壹遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數量(liang)加(jia)入無血(xue)清細胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好標(biao)識。將凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置以便下(xia)次(ci)拿取。

公(gong)司正(zheng)在出(chu)售(shou)的(de)產品：

真(zhen)菌聚(ju)甲(jia)基半(ban)乳糖醛(quan)酸酶(mei)（Polymethylgalacturonase；PMG）活(huo)性(xing)比色(se)法定量(liang)檢(jian)測試劑盒

蛋白電泳(yong)染色(se)試劑專(zhuan)題(ti)

裂解(jie)液(ye)VII：細菌裂解(jie)溶液(ye)

石蠟切(qie)片組織(zhi)CASPASE-6蛋白表達(da)熒光顯(xian)微(wei)鏡檢(jian)測(ce)試劑盒

食品三(san)聚(ju)胺(an)快速(su)顯(xian)色(se)定(ding)性檢測試劑盒（家用型/工(gong)業(ye)型(xing)）

組織(zhi)包埋(mai)試劑盒

細胞(bao)磷酸二(er)酯(zhi)酶2（PDE2）活性(xing)酶連續循環光譜(pu)法定量(liang)檢(jian)測試劑盒

細胞(bao)培養(yang)液(ye)氧化(hua)應激(ji)活性氧（ROS）比色(se)法定量(liang)檢(jian)測試劑盒（超(chao)氧陰(yin)離(li)子）

冰凍(dong)切(qie)片黑(hei)色(se)素(su)去(qu)色(se)試劑盒

羥基吲(yin)哚氧甲(jia)基轉(zhuan)移(yi)酶(mei)（hydroxyindole-O-methyltransferase）活性

APC蛋白表達(da)ELISA定量(liang)檢(jian)測試劑盒

食物(wu)氨(an)壹(yi)步法定量(liang)檢(jian)測試劑盒

載玻(bo)片細(xi)胞(bao)βCOLLAGEN II蛋白表達(da)NBT顯(xian)色(se)光學(xue)顯(xian)微(wei)鏡檢(jian)測(ce)試劑盒

體液(ye)基質金屬 3H同(tong)位(wei)素(su)標(biao)記(ji)檢測(ce)試劑盒

真菌/酵母(mu)氧化(hua)酶活性測(ce)定試劑盒

長鏈(lian)脂(zhi)肪酸轉(zhuan)運(yun)蛋白4抗體(ti)

肝羧酸酯(zhi)酶1抗體(ti)

缺氧誘(you)導因子脯(pu)氨(an)酰(xian)羥化酶4抗體(ti)

KIAA0753蛋白抗體(ti)

細(xi)胞(bao)角蛋白7重(zhong)組兔單克(ke)隆(long)抗體(ti)

α肌(ji)糖蛋白2抗體(ti)

賴(lai)特異(yi)性脫甲基酶4B抗體(ti)

HCC-2108細(xi)胞(bao)ATP-依賴(lai)的(de)RNA解旋(xuan)酶30抗體(ti)

鋅(xin)指蛋白蛋白474抗體(ti)

三(san)、培養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後首(shou)先觀(guan)察細胞(bao)瓶是否完(wan)好，培養(yang)液(ye)是否有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現象，若(ruo)有(you)上述現象 發生請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形態(tai)、所(suo)用培養(yang)基、血(xue)清比例(li)、所需 細胞(bao)因子等，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由 客戶自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察好細胞(bao)狀態(tai)後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直接混勻(yun)收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並接種(zhong)到新(xin)的(de)培養(yang)瓶或培養(yang)皿中，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培養(yang)。

5. 請客戶用相同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培養(yang)基用於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各拍幾張(zhang)細胞(bao)照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我(wo)司技(ji)術部(bu)溝通(tong) 交流。由(you)於運(yun)輸的(de)原因，個(ge)別敏感細胞(bao)會(hui)出(chu)現不穩定的(de)情況(kuang)，請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情(qing)況，以便我(wo)們的(de)技術人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供(gong)科(ke)研使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運輸用的(de)培養(yang)基 (灌液(ye)培養(yang)基) 不能(neng)再(zai)用來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)，請換(huan)用按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配制的(de)培養(yang)基來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後第(di)壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。